当前 体外 用于评估接触镜（CLs）及其他眼部相关应用的模型严重受限。本研究所提出的ocular平台可模拟生理泪液流动、泪液体积、空气暴露以及机械磨损。该系统具有高度通用性，可应用于多种 体外 使用CLs进行分析。
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摘要
摘要
目前， 体外 用于药物递送的隐形眼镜（CLs）评估通常在大容量小瓶中进行，1-6 无法模拟生理泪液体积。7 传统模型还缺乏自然泪液流动成分和眨眼反射，而这两种因素都是眼表环境的关键特征。本研究描述了一种新型模型的开发，该模型采用独特的两部分设计，包括眼球部分和眼睑部分，能够模拟生理状态下的泪液体积。该模型通过三维打印模具（聚四氟乙烯或特氟龙模具）制备，可用于多种聚合物材料（如聚二甲基硅氧烷（PDMS）和琼脂）制作眼模型。对眼球部件进一步改进，例如整合离体的人或动物角膜，或人角膜构建物，将可实现更复杂的 体外 眼部研究。该平台集成了商用微流控注射泵，以模拟生理条件下泪液的分泌。通过两个机械执行器实现空气暴露和机械磨损，其中一个执行器使眼睑部件横向移动，另一个使眼球-眼模组件做环形运动。该模型已用于评估隐形眼镜的药物递送性能以及泪液成分在隐形眼镜上的沉积情况。
引言
接触镜（CL）领域的两个重要研究方向包括佩戴不适问题以及新型接触镜应用的开发。阐明接触镜不适背后的机制是困扰该领域数十年的难题.8 新型功能性接触镜（CLs）的开发，例如药物递送装置1,3,9 和生物传感器，10-12 是一个日益受到关注的领域，具有巨大的潜在市场。在这两种情况下，都需要复杂的 体外 该模型将提供相关信息，以在开发阶段辅助选择合适的镜片材料或设计特征。然而，目前 体外 用于评估隐形眼镜及其他眼部相关应用的模型相对粗糙且不够精密。传统上， 体外 CL研究中用于评估泪膜沉积或药物递送的实验通常在静态的大体积小瓶中进行，这些小瓶含有固定的液体体积，远超过生理条件下的泪液量。此外，这种简单模型缺乏自然泪液流动和眨眼反射，而这两种因素均为眼表环境的关键特征。
一种复杂且具有生理相关性的眼部模型的开发 "模型" 将需要多学科的方法，并需要大量的 体内 验证。基于这些原因，我们研究的基本框架 体外 眼模型具有高度的多功能性，可通过未来的升级和调整持续改进。迄今为止，该模型能够模拟泪液体积、泪液流动、机械磨损和空气暴露。目标是构建一个 体外 能够提供有意义结果的模型，具有预测性且可相互补充 体内 和 离体 观察。
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方案
所有实验均按照滑铁卢大学动物研究伦理委员会规定的相关指南完成，并符合其要求。牛眼由当地屠宰场慷慨捐赠。
1. 眼球模型
- 模具的设计与制造13
- 根据成年人类眼睛的平均生理尺寸设计眼模型。13
- 在眼球模型的眼球与眼睑部件之间留出250 µm的间隙。使用计算机辅助设计（CAD）软件设计相应的模具。
- 使用 AutoCAD 或 Solidworks 创建新的 .cad 文件或 .sldprt 文件。建立人眼眼球/眼睑的三维模型。对模型制作模具，并将模具保存为 .stl 文件。
- 将 .stl 文件导入 3D 打印机软件（例如， 用于Replicator2的制造文件）。指定打印参数（位置、稀疏度、比例、方向、平滑度， 等等。)13.
- 将文件保存为3D打印机可读取的G代码文件。选择用于打印模具的材料，如PLA（聚乳酸）、ABS（丙烯腈-丁二烯-苯乙烯共聚物）、PC（聚碳酸酯）或其组合材料13.
- 安装所需材料的耗材。将G代码文件导入3D打印机以读取。打印模具。
注意：如果希望眼模型表面更光滑，可选用计算机数控（CNC）机床来制作眼模具。对于CNC模具加工，模具材料不再局限于热塑性塑料，还可扩展至金属、陶瓷以及耐化学腐蚀的聚合物（如聚....
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结果
从机械加工和3D打印获得的合成眼模如图1所示。这些模具可与多种聚合物（如PDMS和琼脂糖）配合使用，以制备具有理想特性的镜片。眼模型平台与微流控注射泵的组装示意图如图2所示。该平台通过眼球部件的旋转模拟机械磨损，并通过眼睑部件的侧向开合运动模拟空气暴露。泪液通过微流控泵以设定的流速注入眼睑，流出的液体可收集于12孔板中。
牛晶状体的解剖步骤以及将其安装到PDMS目镜上的过程如图3所示。首先将眼球周围的多余组织分离并弃去，随后去除结膜。角膜的移除始于靠近角膜缘处的巩膜切口。图4展示了可用于各种体外分析的不同类型目镜。图中所示的已安装眼球部件由PDMS、琼脂以及安装在PDMS眼球部件上的离体牛角膜制成。
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讨论
本方案中有三个关键步骤需要特别注意：模具的设计与制备（第1.1节）、平台组装（第2.2.1–2.2.3节）以及实验运行的监测（第2.2.4–2.2.7节）。在模具的设计与制备（第1.1节）方面，眼球部件应根据人角膜的尺寸进行设计。然而，可能需要经过多次模具原型的尝试，才能制备出与市售隐形眼镜（CL）完全匹配的眼球部件。此外，当眼球部件与眼睑部件接触时，必须保持250 µm的间距，以确保在存在隐形眼镜的情况下，泪液能够在整个眼模型中顺畅流动。该距离在后续版本中可进行调整，但不应小于150 µm，以留出足够的空间容纳隐形眼镜。平台组装（第2.2.1–2.2.3节）需要特别仔细，以确保在眨眼运动过程中眼球部件与眼睑部件能够充分接触。如果两个部件未能完全接触，则无法有效模拟眼睑闭合及机械摩擦过程。操作人员应观察平台运行数个周期，确认眼球与眼睑部件确实接触，并按预设程序完成摩擦动作。当前平台设计为可持续运行一个月，但在实验过程中，操作人员应每24小时检查一次系统的稳定性（第2.2.4–2.2.7节）。这一点非常重要，因为当前平台不具备温湿度控制功能，环境参数的波动可能导致隐形眼镜干燥。若发生此类情况，应将眼模型置于温湿度可控的环境舱内。此外，在药.......
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披露
作者无任何利益冲突需要披露。
致谢
作者谨此感谢NSERC 20/20眼科先进材料开发网络提供的经费支持。
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材料
| 姓名 | 公司 | 目录编号 | 评论 |
|---|---|---|---|
| Arduino Uno R3（Atmega328 - 已组装） | Adafruit | 50 | 开发板 |
| 步进电机 | Adafruit | 324 | 电机及电机驱动扩展板 |
| 等臂联轴器 1.6 mm 1/16" | VWR | CA11009-280 | 50 个管路连接件 |
| PT/SIL 管路 1/16"×1/8" | VWR | 16211-316 | 每箱 50 英尺 |
| PDMS | Dow Corning | Sylgard 184 太阳能电池封装材料 | |
| 琼脂糖，1-A型，低电渗扩散（EEO） | Sigma-Aldrich | A0169-25G | |
| PHD UltraTM | Harvard Apparatus | 703006 | 微流控泵 |
| 牛角膜 | Cargill, Guelph/ON（加拿大安大略省圭尔夫） | ||
| SolidWorks | Dassault Systèmes | 软件 | |
| 3D 打印 | 滑铁卢大学 - 3D 打印中心 | ||
| 解剖工具 | Fine Science Tools | 常规解剖工具 | |
| Medium 199 | Sigma-Aldrich | 角膜培养基储存液 | |
| 胎牛血清 | Thermo Fisher | 加入培养基中，终体积占比 3% |
参考文献
- Phan, C. M., Subbaraman, L. N., Jones, L. In vitro drug release of natamycin from beta-cyclodextrin and 2-hydroxypropyl-beta-cyclodextrin-functionalized contact lens materials. J Biomater Sci Polym Ed. 25, 1907-1919 (2014).
- Peng, C. C., Kim, J., Chauhan, A.
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重印与许可
