本方案展示了如何在斯特恩伯格工作记忆范式期间测量焦虑增强的惊吓反应。
本方案展示了如何在斯特恩伯格工作记忆范式期间测量焦虑增强的惊吓反应。
本实验方案的目的是通过结合斯特恩伯格工作记忆(WM)范式与电击威胁范式,阐明工作记忆过程与焦虑之间的关系。在斯特恩伯格工作记忆范式中,受试者需要在短时间内将一系列字母保持在工作记忆中,并通过判断某个特定字母在序列中的位置是否与数字提示相符来进行反应。在电击威胁范式中,受试者会经历交替的实验区组,其中一个区组存在接受不可预测的轻微电击的风险(威胁状态),另一个区组则不会受到电击(安全状态)。在整个实验过程中,通过声学惊吓反射来探测焦虑水平,而该反射在威胁状态下会增强(即焦虑增强型惊吓反应,APS)。通过在电击威胁条件下实施斯特恩伯格工作记忆任务,并在工作记忆维持阶段或试次间间隔期间检测惊吓反应,即可评估工作记忆维持对焦虑增强型惊吓反应的影响。
根据注意控制理论(Attention Control Theory, ACT),焦虑会通过竞争有限的工作记忆(Working Memory, WM)资源来干扰认知加工过程1。然而,ACT 并未涉及这种关系的反向作用(即 认知加工对焦虑的影响)。通过在认知任务中使用电击威胁范式来操控焦虑水平,可以同时评估焦虑对认知的影响以及认知对焦虑的反向影响2,3,4,5。本实验方案的目的是演示如何在电击威胁范式下实施 Sternberg 工作记忆范式,以探究焦虑与工作记忆保持之间的双向关系。
电击威胁范式在实验室中被广泛用于操控状态焦虑6,7,8,9,10,11,并可应用于健康受试者2,3,4,5和患者12,13,14,15(参见Bradford et al.16 的示例)。该范式由交替出现的威胁期和安全期组成17。在威胁期,受试者有接受不可预测电刺激的风险,而在安全期则无此风险。可通过听觉惊跳反射定期检测受试者的焦虑水平18,19。通常情况下,受试者在威胁期的惊跳反应大于安全期,这种焦虑增强的惊跳反应(Anxiety-Potentiated Startle, APS)可作为测试过程中持续焦虑变化的外周指标17,18。电击威胁范式中的惊跳增强反应已被美国国家精神卫生研究院(National Institute of Mental Health, NIMH)在其研究领域标准(Research Domain Criteria)矩阵中认定为焦虑的生理指标20。然而,也可以使用自评式李克特量表来评估个体的焦虑水平。由于电击威胁是一种被动范式,因此可同时进行其他认知任务21。将电击威胁与Sternberg工作记忆任务结合,可以探测工作记忆维持期间的焦虑状态3。
在 Sternberg 工作记忆范式中,受试者需要在工作记忆中编码一系列字母,并在短暂间隔后做出反应3,22。与更复杂的工作记忆任务(例如,N-back 任务)4,5,23不同,Sternberg 任务不需要对工作记忆中的信息进行操作3,22。此外,受试者在不同的时间间隔内分别进行项目的编码、保持和反应。这些特点共同使得将工作记忆的保持过程与其他更复杂的认知过程区分开来成为可能24。通过在工作记忆保持阶段探测焦虑相关症状(APS),可以确定工作记忆保持对焦虑的影响。同样,通过比较威胁条件与安全条件下工作记忆的准确率和反应时间(RT),可以确定焦虑对工作记忆保持的影响。本方案将详细说明在电击威胁下实施 Sternberg 工作记忆范式所需的实验操作步骤,以及评估任务过程中 APS、准确率和反应时间所需的分析步骤。
所有参与者均签署了经国家精神卫生研究所(NIMH)联合神经科学机构审查委员会(IRB)批准的书面知情同意书,并获得了参与报酬。
1. 设置设备
注意:按照以下说明设置设备(见图1A)3。
2. 使用可用软件编程实验
注意:使用了神经行为系统软件(以下简称实验软件;参见材料表)。也可使用其他等效软件。
3. 运行实验
4. 分析性能
注意:请使用以下说明分析单个参与者的性能数据。
5. 分析惊吓反应
6. 分析自评数据
本方案产生三种主要数据类型:准确率、反应时(RT)和平均瞳孔大小(APS)。对于准确率和反应时,本方案包含两种实验操控:威胁和负荷。在准确率方面,典型结果显示出负荷的主效应,但无威胁的主效应,且无负荷与威胁的交互作用(F(1,18) = 84.34;p <0.01;见图5)。受试者在低负荷试验中的准确率通常高于高负荷试验。在反应时方面,典型结果显示出负荷(F(1,18) = 19.49;p <0.01)和威胁(F(1,18) = 8.03;p = 0.01)的主效应,但无负荷与威胁的交互作用(见图6)。受试者在低负荷试验中的反应时通常快于高负荷试验,在威胁区段中的反应时也快于安全区段。
该方案还包含针对APS的两种实验操控:负荷与惊吓时机。典型结果显示出负荷与时机之间的交互作用(F(1,18) = 16.63;p < 0.001),表明在无负荷条件下,惊吓时机对APS的影响更为显著。 <0.01;参见 图7). 通常情况下,受试者在低负荷试验中的惊跳前脉冲抑制(APS)显著大于高负荷试验,但仅当惊跳探针在维持间隔期(MNT)呈现时才如此(维持期:t(18) = 3.92;p < 0.001);而在编码期(ENC)或提示期(CUE)呈现时则无显著差异(编码期:t(18) = 0.71;p = 0.49;提示期:t(18) = 0.57;p = 0.58)。 <0.01;ITI:p >0.05;d = 0.72)。需要注意的是,由于推论统计结果在不同研究之间可能存在差异,因此重复验证这些效应非常重要。本实验之后,在言语N-back任务(3-back)中发现,随着任务难度增加,APS呈一致性的下降。 > 0-背向 d(25) = 2.24,Sternberg WM 范式(见上文,d(18) = 0.72;用于重复验证,见 Balderston 的实验 1) 等 20163高负荷 > 低负荷,d(18) = 0.44),以及一项复杂的图片识别任务(提取) > 编码,d(21) = 0.472然而,应注意的是,最终结果可能在一定程度上受到习惯化的影响。
尽管很难确定受试者在每个试验中的主观情绪状态,但可以通过自我报告数据来评估焦虑操纵的有效性,并作为个体差异的测量指标。因此,使用标准化问卷在实验前评估受试者的情绪状态,并在实验过程中探测其焦虑水平至关重要。典型结果表明,在威胁阶段的焦虑评分显著高于安全阶段;t(18) = 8.85;p <0.001。

图 1:典型设备设置示意图。(A)使用独立的计算机分别执行实验任务并记录被试的生理信号。通过实验计算机的并行端口,将事件与生理监测硬件及电击装置同步。通过以太网电缆将生理监测硬件采集的生理信号传输至数据采集计算机。电击装置由信号发生器控制,并由任务计算机触发,用于向被试施加电击刺激。白噪声通过任务计算机的声卡传递给被试,并通过生理监测硬件记录其痕迹。(B)信号发生器所需的设置参数。(C)电击装置所需的设置参数。请点击此处查看该图的放大版本。

图2:典型受试者设置示意图。 将电极连接至受试者非优势手腕以传递电刺激。将电极连接至受试者非优势手掌以测量皮肤电导。将电极连接至右眼下方,位于眼轮匝肌上方,用于测量肌电图。将电极连接至受试者左上臂和右锁骨处,用于测量心电图。请点击此处查看该图的放大版本。

图3:典型实验设计示意图。 向受试者呈现一系列字母,随后是一段短暂的保持期,接着是反应提示。在反应提示阶段,向受试者呈现一个字母(来自前述序列)和一个数字,要求受试者判断该数字是否与之前序列中目标字母的位置相符。在每次试验期间,于保持期或试验间期(ITI)给予惊吓探针刺激。请点击此处查看该图的放大版本。

图4:白噪声探针刺激后肌电图信号示例。 (A)原始肌电图信号。(B)经30至500 Hz带通滤波后的肌电图信号。(C)经滤波并使用20 ms时间常数整流后的肌电图信号。(D)受基线噪声污染的一次试验中的原始肌电图信号。请点击此处查看该图的放大版本。

图5:典型的反应时间(RT)结果。 受试者在低负荷试验中的反应通常比在高负荷试验中更快。此外,在遭受电击威胁的情况下,受试者的反应通常也更快。柱状图表示均值 ± 标准误(SEM)。请点击此处查看该图的放大版本。

图6:典型的焦虑增强惊跳(APS)结果。 在维持期(MNT)探测惊跳反应时,受试者在低负荷试次中的惊跳增强通常大于高负荷试次。然而,当在试次间间隔(ITI)探测惊跳反应时,该效应并不存在。柱状图表示均值 ± 标准误(SEM)。请点击此处查看该图的放大版本。

图7:典型的准确性(正确率,%)结果。 受试者在低负荷试验中的准确性通常高于高负荷试验;然而,其表现通常不随电击威胁的变化而变化。柱状图表示均值 ± 标准误(SEM)。请点击此处查看该图的放大版本。
补充代码文件:用于呈现白噪声的 Wav 文件(40ms_wn.wav)。请点击此处下载该文件。 用于设置实验软件硬件参数的必要代码(Sternberg_threat_v5.exp)。请点击此处下载该文件。 运行实验所需的代码(Sternberg_threat_v5.sce)。请点击此处下载该文件。
本文演示了如何在电击威胁条件下实施斯特恩伯格工作记忆任务。通过该方案,能够证明工作记忆的维持足以降低焦虑水平,这一结论通过声惊反射增强程度的测量得以验证3。这些结果表明,认知与焦虑之间的关系是双向的3-5,并且焦虑模型(例如,注意控制理论)1不仅需要解释焦虑对认知的影响,还必须阐明认知对焦虑的作用。尽管当前方案描述了斯特恩伯格工作记忆任务与电击威胁范式的结合,但它也可作为更广泛研究认知与焦虑之间关系的框架21。
通过重新设计现有的认知任务,使其在安全与威胁交替的条件下进行,可以研究焦虑对特定认知过程(如工作记忆(WM)和持续注意)的影响2,31,32。例如,在以往的研究中,N-back工作记忆任务与电击威胁范式相结合,结果表明焦虑在低负荷条件下干扰工作记忆,但在高负荷条件下则无此影响4,5。这些结果提示,焦虑虽会干扰工作记忆,但健康个体在任务需求较高时仍能克服焦虑的影响。持续注意反应任务(Sustained Attention to Response Task, SART)也被整合到电击威胁范式中;受试者需对罕见的目标刺激抑制反应。该实验显示,任务期间电击威胁可提高NoGo试次中的反应准确性31,32。结合N-back相关研究,这些结果表明焦虑既可能损害也可能促进任务表现,其影响方向取决于任务所涉及的具体认知过程。
同样,通过向已适应电击威胁范式的现有认知任务中添加精确计时的惊吓探针,可以研究特定认知任务对焦虑的影响。工作记忆负荷与焦虑之间的关系最初是在N-back工作记忆任务中观察到的,增加需要维持的项目数量会降低焦虑的惊吓反射4,5。然而,由于该任务同时需要信息的维持和操作,难以确定哪些工作记忆成分对于观察到的焦虑降低是必需的23,33。通过后续采用更简单的Sternberg工作记忆范式,研究发现中央执行加工并非焦虑降低所必需3。
该技术可用于研究焦虑对认知的影响,以及认知对焦虑的影响。因此,在此范式中,对焦虑和认知负荷进行操控,并对二者进行可靠的测量至关重要。当将该方法应用于新的认知范式时,需确保该认知范式根据表现具有可区分的难度水平。如果预实验未显示出不同实验条件下表现的差异,应检查是否存在天花板效应或地板效应,并相应调整任务难度。同样,设计电击威胁操控时,应确保在低认知负荷条件下能够观察到惊跳反射增强(APS)。如果预实验未显示出低认知负荷条件下惊跳反射的差异,可尝试检查肌电(EMG)通道的信噪比。
确保本方案有效性的关键步骤有三个。首先,必须确保受试者理解正在实施的认知任务。如有必要,可设计任务的练习版本,以确保受试者充分理解指导说明。其次,必须确保所使用的电刺激强度足以诱发受试者的焦虑状态。如有必要,每次运行后应重新校准电刺激的强度。第三,必须确保肌电图(EMG)通道的信噪比足够高,以准确记录声惊跳反应。如果通道噪声过大或阻抗过高,应彻底清洁眼部下方皮肤,并重新安放EMG电极。
尽管该范式具有诸多优势,但也存在一些需要关注的局限性。例如,使用令人厌恶的电击可能引起某些机构审查委员会(IRBs)的担忧,尤其是在涉及脆弱人群时。需要注意的是,除电击外,还有其他可诱导焦虑的方法。这些方法包括吸入较高浓度的CO₂2 (7.5%)持续较长时间(8-20 分钟)34,使用厌恶性热刺激的威胁35,呈现负性情绪图片36, 等。 然而,需要注意的是,电刺激在正确使用的情况下是安全的、应用广泛且有效的。尽管本方案推荐采用标准化方法来分析增强型惊吓反应,但在某些情况下,原始得分可能更为可靠。9,10若使用标准化分数,建议同时考察原始分数。
本方案的优势在于,它允许研究者在单次实验中灵活地操纵被试的个体状态焦虑,并检验焦虑与特定认知过程之间的关系。该方案具有三个潜在的未来应用方向。首先,重要的是要理解认知与情绪系统在神经活动层面的相互作用。未来的研究应结合此范式,在记录BOLD信号的同时,考察焦虑与工作记忆维持相关神经活动之间的关系。其次,需要将这些发现推广到其他认知过程,例如持续性注意和奖赏加工。未来使用该方案的研究应在威胁与安全条件下操纵这些认知过程。第三,重要的是要在健康个体以及患者群体中理解认知与焦虑之间的关系。未来采用该方案的研究应纳入这些特殊人群的个体。
综上所述,本研究提出了一种用于探讨工作记忆负荷与诱发焦虑之间关系的实验方案。采用该范式的研究表明,工作记忆的维持足以降低焦虑水平,而焦虑本身并不干扰工作记忆负荷。尽管本文所述发现仅针对 Sternberg 工作记忆范式,但该方案可加以调整,用于普遍研究认知与焦虑之间的双向关系。
作者声明无利益冲突。
本研究的经费由美国国家心理健康研究所内部研究计划(ZIAMH002798)提供支持(ClinicalTrial.gov 标识符:NCT00026559:方案编号 01-M-0185)。
| 姓名 | 公司 | 目录编号 | 评论 |
|---|---|---|---|
| <强>Biopac 系统 | |||
| 系统 | Biopac Systems Inc. | MP150 | 1,心理生理学监测硬件 |
| TTL 集成 | Biopac Systems Inc. | STP100C | 1 |
| EDA | Biopac Systems Inc. | EDA100C | 1 |
| 心电图 | Biopac Systems Inc. | ECG100C | 1 |
| 肌电图 | Biopac Systems Inc. | EMG100C | 1 |
| <强>名称 | <强>公司 | <强>货号 | <强>评论 |
| <强>其他设备 | |||
| 重点提示框 | 参见替代方案 | 自定义 | 1 |
| 草信号发生器 | Grass Instruments | SD9 | 1 |
| 电击装置 | Digitimer North America, LLC | DS7A | 1 |
| <强>名称 | <强>公司 | <强>货号 | <强>评论 |
| <强>替代方法 | |||
| 替代分栏框 | Cortech Solutions | SD-MS-TCPBNC | 1 |
| 替代性草类信号发生器 | Digitimer North America, LLC | DG2A | 1 |
| <强>名称 | <强>公司 | <强>货号 | <强>评论 |
| <强>音频设备 | |||
| 耳机 | 森海塞尔电子有限公司 &和 CO | HD-280 | 1 |
| 耳机放大器 | 应用研究与技术 | AMP4 | 1 |
| 声压级计 | Hisgadget 公司 | MS10 | 1 |
| <强>名称 | <强>公司 | <强>货号 | <强>评论 |
| <强>Biopac 的电极和导联线 | |||
| 肌电图 | Biopac Systems Inc. | EL254S | 2 |
| 肌电图贴片 | Biopac Systems Inc. | ADD204 | 2 |
| 用于肌电图的凝胶 | Biopac Systems Inc. | GEL100 | 1 |
| 心电图 | Biopac Systems Inc. | LEAD110 | 2 |
| 休克 | Biopac Systems Inc. | LEAD110 | 2 |
| 心电图 | Biopac Systems Inc. | LEAD110S-W | 1 |
| 心电图 | Biopac Systems Inc. | LEAD110S-R | 1 |
| 一次性电极 | Biopac Systems Inc. | EL508 | 6 |
| <强>名称 | <强>公司 | <强>货号 | <强>评论 |
| <强>软件 | |||
| 展示 | 神经行为系统 | 版本 18 | 此处称为实验性软件 |
| 承认 | Biopac Systems Inc. | 版本 4.2 | 此处称为心理生理学分析软件 |