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方法文章

左束支消融与快速起搏诱导的非同步性心力衰竭模型中心脏再同步化治疗的益处

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DOI：

10.3791/56439

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2017年12月11日

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1Department of Cardiology, Shanghai Institute of Cardiovascular Diseases, Zhongshan Hospital, Fudan University, 2Department of Echocardiography, Shanghai Institute of Medical imaging, Shanghai Institute of Cardiovascular Diseases, Zhongshan Hospital, Fudan University, 3Department of Cardiac surgery, Shanghai Institute of Cardiovascular Diseases, Zhongshan Hospital, Fudan University

* These authors contributed equally

本文内容

摘要

介绍了一种通过快速起搏联合左束支消融建立慢性非同步性心力衰竭（HF）模型的方法。采用二维斑点追踪成像和主动脉速度时间积分来验证该稳定的心力衰竭模型，该模型具有左心室非同步性，并可用于评估心脏再同步化治疗的益处。

摘要

目前公认，伴有左束支传导阻滞（LBBB）的心力衰竭（HF）患者可从心脏再同步化治疗（CRT）中获得显著的临床益处，而LBBB已成为预测CRT治疗反应的重要指标之一。传统的快速起搏诱导心力衰竭模型存在多个主要局限性，包括缺乏稳定的LBBB以及在停止起搏后左心室（LV）功能障碍迅速逆转。因此，建立一种具有孤立性LBBB的慢性心力衰竭理想模型，对于研究CRT的疗效至关重要。本研究建立了一种通过左束支（LBB）消融联合4周快速右心室（RV）起搏诱导的犬类非同步性心力衰竭模型。通过颈静脉途径植入RV和右心房（RA）起搏电极，并同时植入心外膜LV起搏电极，以实现CRT治疗。本文详细介绍了射频（RF）导管消融、起搏电极植入以及快速起搏策略的具体操作流程。术中还提供了心内和体表心电图，以便更好地理解LBB消融过程。采用二维斑点追踪成像和主动脉速度时间积分（aVTI）评估，验证了具有LV不同步及CRT疗效的慢性稳定HF模型。通过协调心室的电激动与收缩，CRT使LV机械功趋于均匀，并恢复了LV泵功能，随后LV扩张也得到逆转。此外，组织病理学研究显示，CRT治疗后心肌细胞直径和胶原容积分数（CVF）显著恢复，表明CRT诱导了组织学和细胞水平的心室逆向重构。本报告描述了一种可行且有效的构建慢性非同步性HF模型的方法，适用于研究CRT后心脏结构与生物学层面的逆向重构过程。

引言

晚期慢性心力衰竭是多种心血管疾病的首要致死原因。部分充血性心力衰竭（CHF）患者还会出现心室传导不协调，从而加重症状并恶化预后。心脏再同步化治疗（CRT），也称为双心室起搏，作为此类患者的替代疗法已应用二十余年1,2。然而，约有20%-40%的患者对CRT反应不佳。因此，已有大量研究致力于最大限度提高CRT的治疗反应3。目前普遍认为，与非左束支传导阻滞（non-LBBB）患者相比，伴有左束支传导阻滞（LBBB）的患者能从CRT中获得更大益处4，因为LBBB图形会导致心肌不同步程度更显著，其原因是室间隔壁与侧壁在运动自由度上存在不对称性。同时，近期研究开始探索与CRT相关的心肌基因表达变化及分子水平的重构过程5。伴随CRT诱导的心脏结构逆向重构，细胞和分子水平恢复至正常状态的现象备受关注6。因此，建立一种仅伴有LBBB的CHF理想模型，对于研究CRT的治疗效益至关重要。

慢性快速心室起搏曾被用于在犬模型中诱导充血性心力衰竭（CHF）。右心室起搏无疑可导致左心室收缩延迟，从而模拟类似左束支传导阻滞（LBBB）的收缩模式。然而，这种在传导系统完整的条件下产生的功能性不同步，可能无法真实模拟解剖学上的左束支传导阻滞，因此不被视为研究心脏再同步治疗（CRT）效果的合适模型，因为CRT的核心在于协调受损的电激动与心肌收缩。已有研究报道，在停止起搏后，左心室收缩功能可迅速恢复，左心室尺寸亦可部分恢复7。

实验研究通过射频消融诱导慢性左束支传导阻滞（LBBB），以建立心室不同步收缩模型8。整体泵功能下降与局部无效机械做功的共同作用，可能通过在组织、细胞和分子水平上引起心脏效率降低及心脏重构，从而加重慢性心力衰竭（CHF）。在LBBB心脏中，室间隔的工作负荷最低，而左心室侧壁的工作负荷最高。因此，心脏重构在侧壁表现最为显著9。本研究的目的在于：（i）通过快速右心室起搏联合左束支消融，建立一种具有心室间和心室内机械不同步的稳定且慢性的心力衰竭（HF）模型；（ii）利用二维斑点追踪超声心动图和左心室流出道速度-时间积分（aVTI）确认该模型中不同步性心力衰竭的存在，以及心脏再同步化治疗（CRT）在协调心肌收缩方面的益处；（iii）初步探讨CRT所诱导的细胞水平逆向重构效应。

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方案

购入15只雄性比格犬（12至18月龄，体重约10.0–12.0 kg）用于实验。所有操作均遵循美国国立卫生研究院（NIH）出版的《实验动物护理与使用指南》（出版号：85-23，1996年修订版），并经复旦大学中山医院动物护理委员会批准。图1展示了全部实验步骤的示意图。

1. 术前准备与基线数据采集

  1. 剃除一只后肢的毛发以进行静脉穿刺。通过小侧支建立静脉通路 使用静脉导管采集实验比格犬的隐静脉血液 （22 G，0.9 mm × 25 mm）。经静脉导管缓慢注射戊巴比妥钠（30 mg/kg）。 通过睫毛反射消失确认麻醉生效。 手术过程中若出现麻醉恢复迹象，应追加戊巴比妥钠，剂量为10 mg/kg。
  2. 用粗绳将动物的四肢固定于手术台上，使其保持仰卧位。
  3. 剪除四肢末端和胸部的毛发。将肢体导联电极贴于四肢末端，胸导联电极置于胸壁六个指定位置。记录基线心电图（ECG）。
  4. 超声心动图评估
    1. 将超声心动图仪的导联电极贴附于动物的四肢。
    2. 进行标准的超声心动图检查。从常规的心尖四腔（A4C）和心尖二腔（A2C）切面，采用双平面Simpson法计算左心室舒张末期容积（LVEDV）、左心室收缩末期容积（LVESV）和左心室射血分数（LVEF）。
    3. 通过二维斑点追踪成像评估左心室纵向应变。在心尖四腔心切面（A4C）、心尖两腔心切面（A2C）及心尖长轴切面（APLAX）上进行斑点追踪分析。
    4. 从上述三个心尖切面（A4C：室间隔和侧壁；A2C：前壁和下壁；APLAX：前间隔和后壁）获取各室壁基底段、中段和心尖段的纵向应变曲线。软件将自动整合这些数据，生成包含17节段的极坐标图（bull's eye map），其中包括基底段6个节段（室间隔、侧壁、前壁、下壁、前间隔、后壁），中段6个节段（室间隔、侧壁、前壁、下壁、前间隔、后壁），心尖段4个节段（室间隔、侧壁、前壁、下壁）以及一个心尖帽段。
    5. 峰值应变时间（TTP）定义为从QRS波群起始到应变曲线最低点的时间间隔，该时间点对应最大纵向应变。计算17节段TTP的标准差（PSD），以评估左心室机械同步性。
    6. 在心尖五腔切面记录主动脉多普勒血流速度。测量并取3-4个连续心动周期的主动脉速度-时间积分（aVTI）平均值。
  5. 经口气管插管与机械通气
    1. 轻轻拉出舌头并保持其伸展状态，以备进行经口插管。将动物置于 "嗅探" 位置。
    2. 缓慢推进喉镜的弯曲镜片，直至镜片尖端位于舌根与会厌之间。向上抬起喉镜以暴露声带。将气管插管经口插入，并使导管通过声门。使用胶带将导管固定于动物头部。
    3. 听诊双肺，通过正压通气时双侧呼吸音对称来确认气管插管位置正确。
    4. 将气管插管的外端连接至容量控制型呼吸机。使用室内空气开始并维持辅助机械通气，呼吸频率设置为8–20次/分钟，潮气量设置为8–15 mL/kg。 根据 SpO 设置参数2 通过脉搏血氧仪测量。

2. 心外膜左心室起搏电极植入

  1. 将心脏除颤器/监护仪的导联线连接至贴在四肢上的皮肤电极。 预先给予动物 0.3 g 药物  左氧氟沙星静脉滴注滴剂。
  2. 剃除颈部和胸部毛发后，使用碘伏对胸部前区和左侧颈区进行消毒 并铺上无菌单。 
  3. 开胸术
    1. 在右侧卧位进行保肌开胸术。通过静脉持续输注芬太尼（0.01 mg/kg/hr）后，切开 从左侧胸骨旁线第四肋间隙横向切开皮肤。
    2. 在钝性分离三层胸肌（胸大肌、胸小肌、肋间肌）后，于第四肋间间隙（第4与第5肋骨之间）打开左侧胸膜腔th 和 5th 用锐性解剖法分离肋骨。将肋骨牵开器置入肋间间隙。用浸有0.9% NaCl的无菌纱布包裹肺叶，以保护肺组织并保持术野清晰。
    3. 使用电灼仔细切开侧心包，切开心包并用固定缝线（0号缝线）充分暴露左心室侧壁。
  4. 左心室起搏电极植入
    1. 用4-0缝线将单极左心室起搏电极以一针缝合固定于左心室侧壁心肌组织上。打结时动作应轻柔，以防撕裂心肌组织。
    2. 将起搏电极的末端金属针连接至桥接电缆，以测试电极参数。在起搏阈值达到满意的电极参数后 <2.0 V，0.48 ms，以及导线阻抗 <2,000 Ω，轻轻拉动电极引线以确保牢固固定。
  5. 移除固定缝线，并仔细检查手术区域，以排除活动性出血。
  6. 用2-0/T缝线缝合心包，共两针。 移除填塞的纱布和肋骨牵开器。
  7. 使用两条肋间缝线（0号缝线）对合4th 和 5th 肋骨。用数针缝合肋间筋膜 使用2-0/T缝线缝合。充分膨胀肺部 通过经口插管使用辅助气囊 在最后一针缝合前，通过肋间观察以确认肺部正常扩张。
  8. 将肌肉层复位，无需缝合。起搏电极经手术结之间的间隙，依次穿过心包、肋间筋膜和肌肉层。 
  9. 在左侧颈区切开皮肤，使用弯钳分离皮下组织，直至深筋膜。使用直钳从心前区至左侧颈区在深筋膜上方建立皮下隧道。
  10. 使用直钳将电极导线的末端插针穿过隧道至左侧颈部区域。用绝缘套管覆盖末端插针，并使用2-0/T缝线结扎固定。将导线在套管周围缝合固定于筋膜，并在颈部左侧局部埋置导线。
  11. 使用0号缝线缝合胸部和颈部切口的皮下组织和皮肤。
  12. 停止麻醉诱导，当动物开始自主呼吸时，将气管插管与呼吸机断开。在动物 从麻醉中恢复后，拔除气管插管和静脉导管。持续观察动物直至完全恢复。
  13. 术后每12小时肌肉注射800,000 U青霉素，持续2周。

3. 心房和心室起搏电极植入

  1. 在动物接受开胸手术恢复两周后，即左心室电极植入两周后，植入右心房和右心室起搏电极。手术应在配备有X线透视设备的心脏导管手术室内进行。
  2. 麻醉诱导方法同步骤1.1。将动物四肢固定于手术台，并保持仰卧位。 术前静脉滴注0.3 g 左氧氟沙星。
  3. 剪除四肢末端的毛发。将心电监护仪导联线连接至皮肤电极，并将皮肤电极粘贴于四肢末端。开启心电监护仪，并选择II导联用于术中监测。
  4. 剃除颈部毛发后，使用碘伏对左侧颈区进行消毒，并铺无菌巾。 整个手术过程中通过静脉持续输注芬太尼（0.01 mg/kg/hr）。  
  5. 静脉入路
    1. 在颈部左侧先前切口附近做一小的纵行切口。采用钝性分离法分开筋膜，暴露左侧颈外静脉。使用蚊式钳小心地将静脉从周围结缔组织中分离出来。
    2. 用弯钳轻轻提起静脉，并在静脉下方穿过两根2-0/T缝线。结扎远端缝线。
    3. 轻提远端缝线，用虹膜剪在两根缝线之间的中点处剪一小口。使用静脉钩引导被动J形右心房电极和主动右心室电极进入左侧颈外静脉。
  6. 右心室电极植入
    1. 在X线透视引导下将右心室电极推送至右心室低部或下腔静脉时，从右心室电极中撤出直导丝。将导丝远端弯成J形，再次经右心室电极插入。
    2. 借助弯曲导丝，将电极穿过三尖瓣并进入右心室流出道。缓慢回撤电极和导丝，使电极头端自然下垂至右心室心尖部。
    3. 将弯曲导丝更换为直导丝，继续将电极推送至心尖部。
    4. 在导丝撤出约一半时测试电极参数。理想参数包括起搏阈值<1.0 V（脉宽0.48 ms）、R波振幅>5.0 mV，以及电极阻抗<2,000 Ω。获得满意电学参数后，旋出主动螺旋，完全撤出导丝，并重新测量参数。
  7. 右心房电极植入
    1. 保持右心房电极朝向高位前壁心房方向，缓慢撤出直导丝，使预成形的J形电极回缩，其头端进入右心耳。可观察到电极随心房活动出现特征性的前后移动。
    2. 理想参数包括起搏阈值<1.0 V（脉宽0.48 ms）、P波振幅>2.0 mV，以及电极阻抗<2,000 Ω。当获得满意参数后，调整电极冗余长度，撤出导丝。
  8. 确认两根电极位置稳定后，结扎靠近静脉切口处的近端缝线。使用两到三根2-0/T缝线穿过电极套管，将两根电极固定于深筋膜层。缝合后在X线透视下重新检查两根电极的电学参数及位置。
  9. 在静脉入口附近、筋膜层上方与皮下脂肪层下方的平面制作脉冲发生器囊袋。使用弯钳钝性分离形成囊袋，其大小应恰好可容纳脉冲发生器及冗余电极。
  10. 清洁并干燥电极插针。用绝缘套管覆盖心房电极的终端插针，并将电极缝合固定于囊袋底部。将心室电极插入起搏器脉冲发生器，并通过拧紧远端连接插针至发生器的固定螺钉将其固定。
  11. 将脉冲发生器置入囊袋内，冗余电极盘绕于设备下方。通过发生器接头座上的固定孔，使用一根2-0/T缝线将发生器固定于筋膜层。对整个系统进行X线透视检查。
  12. 确认止血完全后，使用2-0/T缝线逐层缝合囊袋及浅筋膜层。最后用0号缝线对合皮肤切口边缘，并使用遥测编程仪将起搏器设置为OVO模式。
  13. 对于假手术组动物，以相同方式植入左心室、右心室和右心房电极，但不植入脉冲发生器。

4. LBB 消融

  1. 在右心室和右心房电极导线植入后，立即在X线透视引导下进行导管消融。剃除胸部、背部及右侧腹股沟区域的毛发。将动物保持仰卧位。
  2. 准备多通道电生理记录仪，用于同步记录体表和心内电图，滤波设置为30-400 kHz（双极）或0.05-500 kHz（单极），信号放大倍数为5,000倍。将无线回路电极贴于背部，标准12导联电极连接至四肢和胸部。将所有导联连接至电生理记录仪，并以100 mm/s的扫描速度记录电图。
  3. 静脉和动脉入路
    1. 在右侧腹股沟区域常规消毒并铺巾后，沿纵行方向做一皮肤小切口。采用钝性分离法分开筋膜，以辨认右侧股静脉和股动脉。
    2. 轻轻提起股静脉，并在静脉下方放置两根固定缝线（2-0/T 缝线）。结扎远端静脉。对股动脉执行相同操作。
    3. 轻轻提起股静脉，在两条缝线之间的部位将微穿刺针向近心端插入静脉。固定针头，将带有柔韧尖端（J形软头）的导丝经针内插入。
    4. 当导丝已充分进入静脉后，撤出穿刺针，并沿导丝将扩张器与鞘管组合（6-Fr）推进至股静脉内。移除导丝和扩张器，保留鞘管以备导管插入。在静脉切口近端、鞘管置入的情况下，于静脉周围结扎一根松散的缝线。
    5. 同样，将一根7-Fr鞘管插入股动脉。通过动脉鞘管推注100 U/kg的生理盐水稀释肝素，以防止凝血。
  4. 右心系统希氏束电位标测
    1. 通过静脉鞘将6-Fr可操控四极导管插入股静脉。通过导管输入模块，用导线将导管末端连接至多通道电生理记录仪。
    2. 将导管送入右心房，并通过三尖瓣，直至明确进入右心室。在右前斜位（RAO）30°的透视视野中，缓慢回撤导管，使其通过三尖瓣口，直至出现心房电位并逐渐增大。轻微顺时针扭转有助于使电极保持与室间隔接触。当心房和心室电位振幅大致相等时，两者之间会出现双相或三相偏转，代表右侧希氏束电位。
  5. 左束支电位（LBP）标测与消融
    1. 通过动脉鞘经股动脉置入一根7-Fr、4 mm头端的可操控消融导管。使用导线将消融导管末端连接至射频发生器和多通道电生理记录仪。
    2. 在右前斜30°投照位下，将动脉导管逆行通过主动脉瓣并推进至左心室。将导管头端弯向室间隔，保持电极与间隔部紧密接触。
    3. 在左前斜位（LAO）45° 透视视野中，沿室间隔缓慢回撤导管，直至在主动脉瓣下方、心房与心室电图之间记录到左侧希氏束电位。随后沿室间隔缓慢前送导管，并调整导管头端以识别清晰的左束支电位（LBP），该电位通常位于左侧希氏束记录部位下方1-1.5 cm处，记录于主动脉瓣下方。
    4. 当电位至心室电图间期比HV间期短约10毫秒，且A/V电图比值为 <观察到1:10时，即可确定LBP。通常LBP至最早心室电图的间期（LBP-V）短于20 ms，可最大限度降低完全性房室传导阻滞的风险。
    5. 当达到满意的LBP位置后，使用射频发生器开始导管消融，输送500 kHz的未调制正弦波能量（功率范围30–40 W）。调节功率，使电极-组织界面的温度达到目标值60 °C。若15秒内温度未升至50 °C以上，应停止能量输送，调整导管头端位置后重新开始。
    6. 在能量施加过程中持续监测阻抗。在能量输送期间，阻抗下降超过6-8 Ω被视为组织接触良好且加热充分的标志。
    7. 典型的左束支阻滞（LBBB）定义为：QRS波群时限延长；I、II、V5、V6导联QRS波群呈正向，伴有切迹R波，aVR和V1导联呈负向；以及左束支电位（LBP）电图消失。若持续10秒后QRS波形未发生变化，应停止能量释放，并调整导管以寻找新的LBP靶点。当体表心电图出现典型LBBB的QRS波形态时，继续能量消融60–90秒，或直至阻抗突然升高。
    8. 在出现完全（3rd 二度或三度房室传导阻滞或心室颤动（VF）。一旦发生VF，应立即实施电除颤。
    9. 当出现左束支阻滞（LBBB）的QRS波形态时，观察体表心电图30分钟以确认其稳定。如果正常的QRS波形态重新出现，则重复上述消融操作。
  6. 导管消融手术完成后，拔出两根导管。移除静脉和动脉鞘，并迅速在近端缝线上打紧结，以防止出血。
  7. 在仔细检查以排除活动性出血后，使用2-0/T缝线逐层缝合筋膜。最后用0号缝线缝合皮肤。
  8. 将所有电极从动物身上断开，并在麻醉恢复期间频繁监测动物，直至其完全清醒。术后每周每12小时肌肉注射800,000 U青霉素，持续1周。
  9. 假手术组不进行左束支消融。

5. 快速起搏诱导心力衰竭

  1. 当动物从手术中恢复后，再次记录体表心电图，以确认1周后永久性左束支阻滞（LBBB）的存在。然后使用遥测探头将起搏器程控为VVI模式，频率设置为260次/分钟（bpm）。
  2. 在快速起搏4周后，诱导麻醉（同步骤1.1），并将起搏器程控为OVO模式。
  3. 进行超声心动图检查以评估左心室射血分数（LVEF）（参考步骤1.4）。如果LVEF下降至低于35%，则准备对该动物实施心脏再同步化治疗（CRT）；如果LVEF仍高于35%，则通过将起搏器重新程控为VVI模式（260 bpm）再次进行快速右心室（RV）起搏。
  4. 每2周进行一次超声心动图检查，直至LVEF降至35%以下。一旦达到目标LVEF值，即终止快速右心室起搏，并准备实施CRT策略。
  5. 假手术组动物不接受快速起搏处理。

6. 心脏再同步化治疗效果评估

  1. 将心力衰竭（HF）动物随机分为对照组和心脏再同步化治疗（CRT）组。对于HF对照组，不进行任何干预，让动物继续存活8周。对于CRT组，通过双心室起搏开始CRT治疗。
  2. 诱导麻醉后（同步骤1.1），将动物仰卧位固定于手术台上。静脉滴注0.3 g 左氧氟沙星进行术前给药。剃除颈部毛发，消毒左侧颈区，并铺无菌巾。
  3. 静脉持续输注芬太尼（0.01 mg/kg/hr）后，在颈部左侧原切口旁做一小型纵行切口。采用钝性分离法，逐层分离筋膜，完整暴露脉冲发生器及起搏电极导线（包括右心室（RV）、左心室（LV）和右心房（RA）导线），避免损伤组织。
  4. 松开固定螺丝，将RV导线的末端插针从发生器接头中拔出。小心剪开固定LV和RA导线的缝线，取下插针保护帽。依次将所有导线插针浸入乙醇并用干纱布擦拭，进行清洁处理。
  5. 将RA、RV和LV导线正确插入CRT脉冲发生器的接头内，并拧紧固定螺丝。通过钝性分离扩大囊袋，以适配新的发生器。将发生器置入囊袋中，并使用2-0/T缝线将其缝合固定于囊袋底部。
  6. 检查囊袋内有无出血，确保止血彻底。使用2-0/T缝线逐层缝合囊袋及浅筋膜组织，随后用0号缝线缝合皮肤。
  7. 将起搏器程控为DDD模式，房室（AV）延迟设定为70 ms，室间（VV）延迟设定为0 ms。密切观察动物状态直至麻醉恢复。术后每12小时肌肉注射青霉素800,000 U，持续1周。
  8. CRT治疗8周后，对所有组别的动物再次进行经胸超声心动图检查（同步骤1.4）。

7. 处死动物并进行组织学分析

  1. 将动物四肢固定于手术台上 ，在全身麻醉下注射100 mg/kg静脉戊巴比妥以实施安乐死。通过确认无心跳及呼吸运动来确保动物死亡。
  2. 切开左侧颈部皮肤。结合锐性与钝性分离技术，游离起搏器及其导线。通过松开螺钉断开所有导线与起搏器的连接。
  3. 逐步从皮下组织中游离导线，并沿其走行追踪至静脉入口处。识别缝合套管，剪断所有固定缝线。回撤右心室导线的主动固定螺旋，以便取出。
  4. 从胸骨线至左侧锁骨中线的第四肋间处做一横向切口。使用直血管钳沿皮下隧道从心前区筋膜处游离左心室导线，直至左侧颈部区域。
  5. 钝性分离胸壁肌肉后，打开左侧胸膜腔。将肋骨牵开器置入肋间隙，充分切开心包膜。
  6. 剪断心外膜左心室导线电极处的缝线。通过切除包裹电极的一小块心肌组织，将电极与心脏分离。
  7. 沿室间隔切开右心腔室。使用锐性与钝性分离技术将右心房和右心室电极从心肌组织上剥离。通常电极尖端被纤维组织和心肌组织包裹。如有必要，剪除心脏周围粘连的组织。
  8. 通过导线末端插针插入直式导丝至每根导线尖端。从静脉入口处拔出右心室和右心房导线，并从皮下隧道中取出左心室导线。若因纤维粘连导致导线无法拔出，应沿导线走行以钝性分离方式剥离纤维粘连组织。
  9. 轻柔上提心脏，于靠近主动脉处剪断心脏组织以切除心脏。将心脏置于无菌容器中，用生理盐水反复冲洗数次。从左心室侧壁切取透壁心肌组织用于组织学分析。
  10. 用缓冲福尔马林固定心肌组织，随后进行脱水并包埋于石蜡中。切成5 µm厚切片后，脱蜡并进行苏木精-伊红（HE）染色和马松三色染色。
  11. 测量HE染色纵向切片中的心肌细胞直径。以马松三色染色切片中胶原染色面积占总组织面积的百分比表示心肌胶原容积分数（CVF）。每张切片随机选取五个高倍视野（400x）进行计数。拍摄数码照片，并使用高分辨率数字图像分析系统进行分析。

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结果

成功的左束支消融：

图2展示了导管消融过程中典型的体表和心内电图。测得的平均LBP-V间期为18.8 ±2.8 ms，比基础H-V间期（28.8 ±2.6 ms，p <0.01）缩短约10 ms。左束支消融后，QRS波时限从59.2 ±6.8 ms延长至94.2 ±8.6 ms（p <0.01）。左束支电位消失证实左束支消融成功。

通过超声心动图评估慢性不同步性充血性心力衰竭模型及心脏再同步治疗的益处：

基线超声心动图参数在假手术组、心力衰竭对照组和心脏再同步治疗组之间无显著差异。这与我们先前发表的数据一致

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讨论

扩张型心肌病是慢性心力衰竭（CHF）的主要病因之一，其特征为心室扩张、左心室射血分数（LVEF）降低所致的收缩功能障碍以及舒张充盈异常11。由于慢性心动过速介导的心力衰竭是一种公认的临床状态，因此对心房或心室进行至少3至4周的快速起搏，常被用作诱导CHF的动物模型11。快速起搏后24小时即可出现血流动力学改变，并在随后的3至5周内持续恶化。然而，起搏诱导的心力衰竭在停止起搏后可出现显著且独特的功能恢复，伴随神经激素激活状态的逆转，提示该心肌病具有可逆性。已有文献记载，起搏终止后1至2周内LVEF即表现出显著恢复，且几乎所有血流动力学指标在停止快速起搏后4周均基本恢复至正常水平12。因此，在这一具有吸引力的模型中，阻止起搏停止后心脏功能的恢复显得尤为重要。

左束支传导阻滞（LBBB）可能导致左心室（LV）激活延迟，进而引起左心室收缩期相应延迟。室间隔与左心室游离壁的非同步收缩会在两个区域产生不成比例的净心肌做功，且这些做功在两部分均被浪费。尽...

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作者声明不存在任何竞争性经济利益。

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本工作由国家自然科学基金（81671685）和上海市卫生和计划生育委员会（编号：201440538）资助

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材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
封闭式静脉留置针系统（0.9mm×25mm）Becton Dickinson Medical5264442用作静脉留置针
戊巴比妥钠Sigma-Aldrich Company130205用于麻醉
宠物电推剪武汉神宝宠物用品有限公司PGC-660用于剃毛
心电图机上海光电医用电子仪器有限公司ECG-6511用于心电图记录
超声心动图仪GE-Vingmed Ultrasound CompanyVIVID E9用于超声心动图评估
EchoPAC 软件GE healthcareVersion201离线分析
喉镜上海医疗器械有限公司经口气管插管
气管插管SIMS Portex Inc, UK274093经口气管插管
容量控制呼吸机Newport CorporationC100人工通气
HeartStart XL 除颤监护仪Philips Medical SystemsM4735A术中心电监护
苯扎溴铵酊上海云嘉制药有限公司H31022694用于皮肤消毒
肋骨牵开器上海医疗器械有限公司用于开胸手术
4-0 缝线上海浦东金环医疗用品有限公司24L1005左心室心外膜电极缝合
2-0/T 缝线上海浦东金环医疗用品有限公司11M0505起搏导线、筋膜、血管等缝合
0号缝线上海浦东金环医疗用品有限公司11P0501皮肤缝合
青霉素粉剂华北制药股份有限公司F6034105
DSA X射线机PhilipsAllura Xper FD10用于透视X射线成像
左心室起搏电极Medtronic, Inc.LBT 4965
右心室起搏电极St. Jude MedicalTendril 1888
右心房起搏电极St. Jude MedicalIsoFlex 1642T
起搏器脉冲发生器Medtronic, Inc.Enpulse E2DR01用于右心室快速起搏
CRT 脉冲发生器St. Jude MedicalAnthem PM 3212用于心脏再同步治疗
多通道电生理记录仪GE Medical Systems2003232-004用于体表及心内电图记录
导管输入模块GE Medical Systems301-00202-08用于刺激或记录的多极开关
射频发生器Johnson-Johnson CompanyST-4460用于射频电流输送
无线回路电极CovidienE7509用于电流回路形成
Cordis 6-Fr 导管鞘Johnson-Johnson Company504-606X用于标测导管的通路
Cordis 7-Fr 导管鞘Johnson-Johnson Company504-607X用于标测和消融导管的通路
6-Fr 四极导管Johnson-Johnson CompanyF6QRA005RT标测导管
7-Fr 4mm 头端可操控消融导管St. Jude Medical402823标测和消融导管
Prucka Cardio-Lab®2000GE Medical Systems6.9.00.000电图记录软件包
肝素海通制药有限公司160505导管消融术中抗凝
数字图像分析系统Leica MicrosystemsQwin V3用于组织学分析

参考文献

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