本方案首先描述永久性植入膀胱导管并结合外部尿道括约肌电极的手术步骤，其次描述在已植入导管的清醒动物中测量膀胱及外部尿道括约肌功能的方法。
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本文内容
摘要
摘要
下尿路功能的评估主要通过啮齿类动物的膀胱测压功能分析进行。传统的膀胱测压通常在尿烷麻醉下作为终末性分析进行。众所周知，麻醉药物会影响膀胱功能。因此，本技术的目的是在轻度束缚的清醒大鼠中进行膀胱和尿道外括约肌的膀胱测压测量。为此，将一根膀胱导管植入膀胱顶部。随后，在尿道外括约肌两侧植入两根电极，并将接地电极缝合至无反应性的骨骼肌上。膀胱导管和三根电极最终经皮下隧道引至颈部区域，并固定于背带装置上。利用该技术，可在同一只动物身上多个时间点重复测量下尿路功能，以评估其下尿路功能状态。该技术的主要应用是在清醒的健康大鼠中，以及在疾病或损伤诱导后，对膀胱和尿道外括约肌功能进行同步随访观察。此外，还可用于在疾病/损伤评估过程中进行后续的下尿路功能监测，并用于治疗效果的评估。
引言
为了分析尿液储存和排尿功能及其功能障碍，大多数研究采用了啮齿类动物模型。排尿是通过反射的顺序激活而产生的，这些反射的协调对于有效排尿至关重要1。膀胱压力测定记录技术为在神经调控下分析膀胱功能提供了有价值的工具1。
大鼠的传统膀胱测压大多在麻醉状态下进行，通常使用乌拉坦2，且仅作为终末的单次分析，主要关注膀胱本身。然而，在某些病理状态下，例如神经源性下尿路功能障碍（NLUTD），不仅膀胱功能异常，膀胱出口即尿道外括约肌也存在功能障碍3,4。如果仅通过单次膀胱测压检查膀胱，将难以对NLUTD进行有效的随访评估。为了获得可与人类研究相比较的可靠结果，准确测量膀胱与尿道外括约肌的功能及其相互作用至关重要2。此外，必须在清醒大鼠中进行功能分析，因为麻醉极有可能改变膀胱功能2,5,6。在清醒动物中获得良好的膀胱测压记录，是识别膀胱正常功能与功能障碍的基础7
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方案
本文所述所有实验程序均经奥地利政府动物研究伦理委员会（Bundesministerium für Wissenschaft, Forschung und Wirtschaft, WF / V /3b）批准，并符合实验室动物护理与使用协会（Association for Assessment of Laboratory Animal Care）关于动物使用的指南。本实验所用大鼠为12周龄雌性Lewis大鼠。整个实验过程中均需使用无菌器械。
1. 材料准备
- 导管的制备
- 根据动物体型，将导管（聚乙烯管 PE-50）剪成适当长度（20 至 25 cm）。
注意：预留额外长度，以便穿引和操作。 - 用打火机将一端加热扩口，形成圆滑的末端。检查导管末端是否已形成合适开口且端部钝化。
- 将一段2 mm长的硅胶管套在导管上，使其刚好位于扩口端下方。
- 根据动物体型，将导管（聚乙烯管 PE-50）剪成适当长度（20 至 25 cm）。
- 电极的制备
- 准备一根20–25 cm长的聚四氟乙烯涂层钢丝（长度根据动物体型适当调整）。
- 准备一段2 cm长的银丝，将其末端拧绞，留出一个小环。在一端去除2 mm的聚四氟乙烯绝缘层。将拧绞后的银丝末端焊接到去除了绝缘层的钢丝上。
- 在焊接区域涂上普通指甲油。在涂层区域....
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结果
显示清醒状态下膀胱压力测定过程的示意图如下所示 图1 膀胱导管植入的内部解剖结构如图所示 图2手术大约需要2小时。术后镇痛和抗生素治疗按照方案所述，可覆盖术后5天内的疼痛和感染预防。此后未观察到任何疼痛迹象。每日需对腹部、腹部缝线及颈部缝线进行两次仔细检查，以确保动物健康。术后前5天应每日检查背心情况（位置与松紧度），之后需定期检查。腹部缝线可在术后第10天拆除th 术后第几天
术后前10天使用柔软的非木质垫料，以避免发生炎症。垫料每周至少更换两次，以进一步降低炎症风险。动物采用单只饲养，因为群养会增加同笼动物咬伤套管、导管或电极线的风险。
导管应每周至少冲洗一次，可在进行尿动力学测量时进行，.......
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讨论
本方案描述了在清醒、轻度束缚的大鼠中进行永久性导管和尿道括约肌电极植入的手术步骤，以及膀胱压力测定记录技术，包括对膀胱和外尿道括约肌的同步分析。
手术过程中的关键步骤包括仔细植入膀胱导管，避免漏液和过度操作。此外，将电极精确地双侧植入尿道外括约肌周围，对于准确测量尿道外括约肌功能至关重要。植入后对术区进行仔细检查，对于维持动物健康同样必不可少。随访期间使用抗生素可有效预防导管相关感染以及尿路感染的发生。
在进行膀胱测压时，经过预先抓握适应的动物会比未经过处理的大鼠更为平静和放松，因此膀胱测压记录的结果可能会有所不同。此外，固定装置为大鼠提供了一个具有黑暗前端的封闭空间，使其感觉更舒适，从而降低应激水平。在其他已发表的清醒状态下膀胱测压研究中，大鼠可在测量笼内自由活动。然而，这种方法在测量过程中更容易产生伪迹，可能延长记录时间，并增加动物的应激程度。在健康大鼠中，理想的膀胱测压结果可在随访期间的多个时间点重复获得。在膀胱测压过程中，常见的问题包括导管扭曲或操作步骤未按顺序执行。如果出现技术或软件故障，强烈建议重新初始化膀胱测压系.......
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披露
作者无任何利益冲突需要披露。
致谢
作者没有需要致谢的内容。
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材料
| 姓名 | 公司 | 目录编号 | 评论 |
|---|---|---|---|
| 聚乙烯导管 PE 50 | Becton Dickinson | 427411 | 导管 |
| Prolene 6-0 (BV-1, 9.3 mm, 3/8c) | Ethicon | EH7403H | 缝合线 |
| 特氟龙涂层钢丝 | Cooner wire | AS631 | 电极材料 |
| 银丝 0.250 mm | World Precision Instruments | AGW1030 | 电极材料 |
| Rotilabo - PVC 管 | Carl Roth | 97241 | 固定装置 |
| Vicryl rapide 4-0 (P-3, 13 mm, 3/8c) | Ethicon | V4940H | 缝合线 |
| Quick Connect 单通道固定装置 | SAI Infusion Technologies | QCH-23CW | 固定装置 |
| 热缩管 | ChiliTec | 17894 | 电极焊接 |
| 焊锡丝 Pb60 Sn40 | Stannol | LD0029 | 电极焊接 |
| 助焊剂 157 | Castolin Eutectin | 157 0150 | 电极焊接 |
| Conn Unshrouded Header HDR 3 POS, 2.54mm Solder ST Thru-Hole Box | Preci-dip | 801-87-050-10-001101 | 电极焊接 |
| Conn Socket Strip SKT 50 POS 2.54mm, Solder ST Thru-Hole Box | Preci-dip | 890-18-003-10-001101 | 电极焊接 |
| 大鼠膀胱压力测定套装（包含泵、天平、压力传感器及膀胱压力分析硬件） | Catamount Research and Development Inc. | CAT-CYT-R | |
| 带主动前置放大器的差分放大器 | AD instruments | DP-311 | 肌电放大器 |
| 中号大鼠固定器（适用于 200–300 g 大鼠） | emka Technologies | HLD-RM | |
| Uro Dyn 软件 | Zürich of University | 基于 MTA | |
| 雌性大鼠（Lewis 品系），12 周龄 | Charles River, Sulzfeld, Germany | 实验动物 |
参考文献
- Andersson, K. E., Soler, R., Fullhase, C. Rodent models for urodynamic investigation. Neurourol Urodyn. 30, 636-646 (2011).
- Schneider, M. P., et al. A novel urodynamic model for lower urinary tract assessment in awake rats. BJU Int. 115, Suppl 6. 8-15 (2015). ....
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