重组蛋白工程水凝胶有利于3D 细胞培养, 因为它们允许完整的调谐的聚合物骨干, 因此, 细胞微环境。在这里, 我们描述了重组弹力蛋白样蛋白质纯化的过程及其在3D 水凝胶细胞封装中的应用。
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| 姓名 | 公司 | 目录编号 | 评论 |
|---|---|---|---|
| 弹性蛋白样蛋白表达和纯化 | |||
| 10 cm 培养皿 | Thermo Fisher Scientific | FB0875713 | |
| 70% 乙醇 | RICCA 化学 | 2546.70-1 | |
| 硫酸铵 | Sigma-Aldrich | A3920-500G | |
| 氨苄青霉素 | Thermo Fisher Scientific | BP1760-25G | |
| Bacto 琼脂 | Thermo Fisher Scientific | 9002-18-0 | |
| BL21(DE3)pLysS 感受态细胞 | Invitrogen | C606003 | |
| 氯霉素 | Amresco | 0230-100G | |
| 来自牛胰腺的脱氧核糖核酸酶 | I Sigma-Aldrich | DN25 | |
| EDTA 二钠盐,二水合 | Thermo Fisher Scientific | O2793-500 | |
| 甘油 | Thermo Fisher Scientific | BP229-4 | |
| 异丙醇 | Thermo Fisher Scientific | A451-4 | |
| 异丙基&β;-D-1-硫代吡喃半乳糖苷 (IPTG) | Thermo Fisher Scientific | BP1755-10G | |
| Luria 肉汤 | EMD Millipore | 1.10285.5007 | |
| 石蜡膜 | VWR | 52858-000 | |
| 苯基甲磺酰氟 (PMSF) | MP 生物医学 | 195381 | |
| 氯化钠 | Thermo Fisher Scientific | BP358-212 | |
| 氢氧化钠 | Sigma-Aldrich | S 8045-1KG | |
| 针头过滤器装置 (0.22 &μ;m) | Millipore | SLGP033RB | |
| 极好的肉汤 | Millipore | 71754-4 | |
| Tris Base | Thermo Fisher Scientific | BP152-1 | |
| Cell 封装在 3D ELP 水凝胶中 | |||
| 0.22 μm 针式过滤器 | Millipore | SLGV004SL | |
| 0.5 mm 厚的硅胶片 | 电子显微镜科学 | 70338-05 | |
| 24 孔组织培养板 | 康宁 | 353047 | |
| 一次性穿刺活检打孔器 (2 mm) | Integra Miltex | 33-31 | |
| 一次性穿刺针 (4 mm) | Integra Miltex | 33-34 | |
| 一次性穿刺针 (5 mm) | Integra Miltex | 33-35 | |
| Dulbecco'磷酸盐缓冲盐水 (DPBS) | 康宁 | 21-031-CM | |
| No. 1 12 mm 玻璃盖玻片 | Thermo Fisher Scientific | 12-545-80 | |
| 四羟甲基氯化膦 (THPC) | Sigma-Aldrich | 404861-100ML | |
| 0.5% Tryspin/EDTA | Thermo Fisher | 15400054 | |
| <强>3D ELP水凝胶中细胞的免疫细胞化学 | |||
| 16% (w/v) 多聚甲醛(PFA) | 电子显微镜科学 | 15701 | |
| 牛血清白蛋白 (BSA) | 罗氏 | 3116956001 | |
| DAPI(4',6-二脒基-2-苯基吲哚,二盐酸盐) | 分子探针 | D1306 | |
| 驴血清 | Lampire Biological Labs | 7332100 | |
| 山羊抗小鼠二抗 (AF488) | Molecular Probes | A-11017 | |
| 山羊抗兔二抗 (AF546) | Molecular Probes | A-11071 | |
| 山羊血清 | Gibco | 16210-072 | |
| 小鼠巢蛋白一抗 | BD Pharmingen | 556309 | |
| 小鼠 Sox2 一抗 | 细胞信号传输技术 | 23064S | |
| 指甲油 | 电子显微镜科学 | 72180 | |
| Triton X-100 | Sigma-Aldrich | X100-100ML | |
| Vectashield 硬质封固剂 | Vector Labs | H-1400 |
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