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方法文章

一种用于研究父系抑制与母体忽视条件下哺乳障碍母婴干预的普通狨猴模型

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DOI:

10.3791/64232

2023年9月22日

本文内容

摘要

本文介绍了一种非人灵长类动物母-婴干预模型,用于研究在父系抑制和母体忽视存在情况下的哺乳障碍。该配偶模型视频可作为教育补充材料,帮助灵长类及人类照护者应对婴儿哺乳困难(如疼痛等问题)。

摘要

在出生率下降、人口老龄化和家庭规模缩小的环境中,父母在围产期和新生儿期的心理压力持续增加。由缺乏经验且育儿知识不足的父母导致的儿童虐待和忽视案例增多,使得护理和助产培训中亟需开展育儿教育及干预技术的培训。特别是母亲与婴儿在生命早期形成的依恋关系至关重要。为了准确传授关于母婴依恋形成干预技术的敏感且全面的信息,需要使用逼真的视频和教学材料。尽管目前已有一些准教育材料,但它们在解释复杂的真实情境方面可能存在局限,尤其是在支持涉及父母双方与婴儿共同参与、并促进亲子互动的母乳喂养方面。

在一项针对普通狨猴(Callithrix jacchus)模型的前期研究中,我们通过24小时持续监测对婴儿的喂养和抚育行为进行了实验性控制,并收集了为期一个月的关于可能反映心理发育的心理学指标的定量数据。通过多变量分析对这些数据进行年龄依赖性的动态可视化,推断出早期亲代喂养与心理生理节律形成之间的因果关系。在相同的灵长类动物模型中,我们发现了一例自发性的母乳喂养失败案例:父亲阻碍其新生婴儿进食,而母亲则表现出放弃抚育行为,导致婴儿出现临床显著的体重下降。

因此,我们探索了促进母婴互动的干预技术。对母亲进行指导,使其允许婴儿自发地探索乳房。最初,母亲因乳房胀痛可能带来的疼痛而拒绝摆出哺乳姿势。通过按摩使乳房变软后,重新开始哺乳。我们假设,通过鼓励父母与婴儿各自的自发性,激活本能的依恋形成机制,是成功进行哺乳干预的关键。

引言

围产期和新生儿期对父母而言常常充满压力。这一问题在日本等国家尤为突出,由于这些国家出生率低、人口老龄化以及核心家庭模式普遍,人们直接接触育儿实践的机会十分有限。此外,缺乏制度化支持的育儿教育进一步加剧了这一状况1。在育儿经验不足以及年轻夫妇面临贫困等社会问题的背景下,父母因压力导致的虐待和忽视行为,可能引发与母乳喂养问题相关的新生儿生长发育迟缓,风险较高2

母亲在分娩后与婴儿分离的情况下建立母乳喂养,对于母婴依恋关系的形成至关重要,"母乳喂养与配方奶喂养的比较表明,前者对新生儿丰富情感的发展具有促进作用",提示母乳喂养与依恋关系形成之间存在强烈的因果关系3。然而,当婴儿或母亲存在医学问题时,为了改善早期母乳喂养的成功率以及产后生长发育,通常需要将婴儿与母亲暂时分离,以便对新生儿进行适当的营养管理。在新生儿情况稳定后,必须为母亲提供指导和支持,以成功建立母乳喂养。父亲、伴侣及其他支持人员也应参与这一过程,学习如何照顾婴儿并为母乳喂养提供适当支持4。目前大多数相关文献(例如,"从分娩后即刻至母乳喂养建立期间的环境与护理干预")主要关注对母亲的干预与支持措施5。未来应更好地向助产与护理专业学生传授相关意识和具体干预技能,以支持涵盖父母与婴儿双方、并促进双方互动的母乳喂养实践。

此前,我们建立了普通狨猴(Callithrix jacchus)作为小型非人灵长类动物模型,用于探索围产期和新生儿干预措施的心理生物学基础6。我们设计了一套系统,利用社会场景依赖性变化7,8,9 和生物分子活动10,11,12,定量识别不同环境中感觉(视觉、听觉、触觉、嗅觉)感知调控的发育变化。通过主成分分析(PCA),我们提取出多个可解释的行为因子,从而能够重建负责这些动物社会心理功能的复杂神经网络。该行为输出定量情绪状态转换(BOUQUET)方法的分析结果表明,在同一评估系统中,成年雄性和雌性之间的社会互动可根据依赖熟悉程度的特征进行定量可视化11。我们推测,普通狨猴行为的差异反映了每个个体过去的心理认知学习经历。

本研究比较了三种条件下的动物:在儿童相互交往的社会环境中成长的兄弟姐妹、仅与父母发生社会互动的独居儿童,以及类似于人类寄养照护的情况,即幼年个体被与其任何血缘家庭成员分离。BOUQUET 分析揭示了各组之间社会反应行为发展时间进程上的定量差异,表明发育期间的家庭互动(即父母与兄弟姐妹)会影响社会心理功能的形成13。此外,我们利用持续红外成像技术,在模拟寄养照护(由研究人员提供配方奶)的情境下,分析了狨猴从出生后第15天至第45天的心理社会发展。包括体表温度、活动水平和位置偏好的数据表明存在独特的年龄依赖性模式。进一步分析表明,早期喂养阶段的经历可能对发育一个月后的行为节律产生显著影响14。昼夜节律及其紊乱已知与人类适应日益复杂社会所需的心理功能密切相关,而这些节律的形成受到童年早期经历的影响。

本报告基于先前的研究结果11,13,14 ,旨在探讨在一对表现出类似虐待行为的父亲和类似忽视行为的母亲所组成的普通狨猴家庭中,针对哺乳失败情况进行干预的可行性。尽管狨猴通常产下多胎,并以其后代由母亲、父亲及年长同胞共同抚育而著称,但本研究采用的核心家庭模型仅包括父母及其唯一后代,旨在模拟当前人类社会的家庭状况。首次育幼的普通狨猴父母表现出行为失控,随后停止哺乳并遗弃幼崽,导致幼崽无法正常生长发育。本研究通过视频记录评估了这一社会性哺乳灵长类动物模型中依恋功能障碍的干预与恢复过程。症状及治疗效果以体重相对于生存阈值的增加或减少来表示,并参照已发表的标准15,16进行判断。本研究的更长远目标是评估人类临床干预措施在指导实施母乳喂养的母亲、父亲以及支持他们的助产士方面的有效性。尽管在自然选择过程中遗弃存在某些问题的弱势后代可能被视为普通狨猴的正常行为,但该临床模型旨在探索人类为维护所有生命尊严而支持健康与福祉的进化策略。

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方案

本研究方案已获得埼玉医科大学机构动物护理和使用委员会的批准(2476)。

1. 动物

  1. 将一对初次育幼的普通狨猴(Callithrix jacchus)亲本与其无任何育幼经验的婴儿共同饲养于密闭光照的恒温笼中,保持恒定温度(25–30 °C)和12小时光照/12小时黑暗的光周期。光照期间,每个笼子的光照强度设定为750–930 lx,黑暗期间为0 lx。确保亲本在进食和清洁行为方面健康正常。
    注:笼具尺寸依据日本环境省《关于实验动物的饲养管理及减轻疼痛的规范》设定。

2. 体重不足的诊断与父母育儿异常

  1. 参见 图1 所示的一般诊断与干预流程(A:婴儿,B:母亲)。当发现婴儿体重不足时,应根据婴儿是否存在五种行为(啼哭、紧贴母亲、头控能力、觅食反射、吸吮动作)来选择针对婴儿的干预方法;同时根据母亲是否存在五种行为(哺乳意愿、乳房增大、接受婴儿吸吮、乳汁分泌、疼痛表情)来选择针对母亲的干预方法。
    ​注意:操作过程中需始终避免动物气味之间的交叉污染。

3. 动物特征

  1. 出生时的胎龄
    1. 记录普通狨猴约140-150天的足月妊娠期。这与人类的标准足月进行比较17
  2. 出生及发育过程中的体重
    1. 年龄与性别定义
      1. 以出生后第一天为记,将出生日定义为出生后第0天(PD 0)。通过检查外部生殖器确定幼崽性别。
    2. 先天性畸形或疾病的识别
      1. 检查幼崽是否存在任何先天性畸形或疾病,特别注意可能引起喂养困难的情况(例如腭裂)。
    3. 体重测量
      1. 使用精度为0.1 g的电子天平每日称量幼崽体重,以评估其摄乳量。准备一个干净的塑料盒或容器,并内衬柔软的纸巾,用于放置幼崽并在称重过程中维持其体温。先将准备好的容器置于天平上归零,再将幼崽放入容器中,记录体重数值。每天尽量在同一时间进行称重,以便与标准值进行比较15,16
        注意:称重时需采取预防措施,防止幼崽逃脱或在秤上受到伤害。
    4. 每日体重增长图
      1. 绘制每日体重增长曲线图。根据新生幼崽存活所需体重的群体记录,出生时及出生第二天的体重应超过27 g,之后每日体重约增加1 g(图2)。
    5. 乳汁摄入量评估
      1. 通过在喂乳前后分别称量幼崽体重来评估乳汁摄入量。但需注意,将幼崽与亲代分离进行称重本身可能造成应激,干扰哺育行为。若预计哺乳和生长正常,可在第一周内将称重频率减少至每日一次。
    6. 头臀长测量(CRL)
      1. 轻柔且迅速地将幼崽从亲代身边分离,将其俯卧平放于直尺旁,测量从头部顶端至尾基部的长度以获得头臀长(CRL)(补充图S1)。测量完成后,立即将幼崽归还亲代。
  3. 幼崽的哺乳行为
    1. 确认幼崽表现出四种行为模式(图1A)。
      1. 判断幼崽是否能够充分依附于母体身体。
      2. 观察幼崽是否通过全身肌肉张力使头部向前弯曲贴近母体。
      3. 注意幼崽是否在亲代一定程度协助下,自主探索并寻找母体乳头,类似于人类吸吮时的“觅乳”反射"rooting"。
      4. 当与亲代分离时,是否会大声发出“phee”叫声11,12
  4. 母体哺乳行为与功能
    1. 确认母体具备以下行为模式与功能(图1B)。
      1. 确认母体是否合作接受新生幼崽进行哺乳。
      2. 确认当母体乳房充盈变紧时,母体会鼓励幼崽吸吮,随后乳房张力减小,乳头突出。
      3. 通过手指轻压乳房侧面来促进母体乳汁分泌(图3A)。检查乳房张力不应过强,且无乳汁淤积现象。
        注意:应佩戴柔软厚实的牛皮手套以防母体咬伤,并用非优势手固定母体。
      4. 观察母体表情,注意是否存在疼痛迹象,如眼中含泪、上下牙齿闭合并外露,这些可能是其拒绝幼崽吸吮的原因。
  5. 父体育幼行为
    1. 观察父体的育幼行为。注意父体是否过度携带幼崽,以致干扰母体充分哺乳,从而影响正常哺育。父体协助携带幼崽的行为通常较为有限。
  6. 针对母体与幼崽的干预措施以恢复自主哺乳
    1. 当发现体重不足的幼崽(小于27 g)时,应观察家庭关系,并排查是否存在异常的亲代育幼行为。潜在的亲代异常行为可能对幼崽造成伤害或干扰喂养(虐待),或导致喂养被放弃(忽视)。
    2. 当幼崽过于虚弱,无法自主探索或依附母体并启动哺乳时,应将其与母体分离,并根据体重情况,必要时使用口服注射器给予少量配方奶(例如,Wakodo牌Lebens Haihai,按三分之二浓度配制0.5 mL)(图1A,B)。
    3. 作为针对母体的首次干预步骤,用手指从乳晕基部向乳头方向分三步按压和按摩,软化硬化乳头区域,以打开乳腺导管(图3B)。轻微挤出少量乳汁,利用气味刺激幼崽进行探索。
    4. 接着,轻柔固定母体身体,将幼崽放置于母体乳房附近,鼓励其寻找乳头(图1C)。引导母体抬高双臂,以改善幼崽接触乳头的条件。当幼崽找到乳头后,继续进行乳房按摩以促进乳汁分泌。确认母体乳房压力得以缓解,疼痛减轻,乳头突出。
    5. 在干预过程中,应适时接触并建立与该家庭的信任关系。
    6. 每日可重复此干预一次或多次,直至母体自愿允许哺乳且幼崽学会自主吸吮为止。若父体行为阻碍幼崽进食,应将其暂时移出家庭,直至幼崽发育状况改善。

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结果

低体重诊断及父母育儿异常
一对来自埼玉医科大学猴群的五岁普通狨猴(Callithrix jacchus)于2019年5月夜间自然分娩产下第一胎(双胞胎)。此次为自然阴道分娩。初生检查时仅发现一只后代(雄性)存活,并紧抱母体。另一只同胞死亡数小时后才被发现,出生体重(低于25 g)及性别均不明确。围产期首次检查时,尚无法确定母体与后代之间是否存在哺乳行为。

每天在大致相同的时间对婴儿进行称重。出生当天的体重为26 g,低于标准值15,16。我们猴群中新生儿存活体重的记录显示,最低体重为27 g(图2)。冠臀长(CRL)为9 cm。自出生第1天起,经常观察到父亲持续舔舐婴儿。这种父代行为在我们常见的狨猴群体中从未被发现过。到第2天,婴儿体重下降(图4,PD2(1)),达到我们繁殖记录中最低的2...

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讨论

不同物种中亲代对婴儿的照料需要相互协调的生理和心理因素7,9,10,12,13,14,18,19,20,21,22,23,24。缺乏经验的亲代状况可能模拟了在出生率...

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披露

作者声明不存在任何经济或其他方面的利益冲突。

致谢

感谢埼玉医科大学实验动物科所有成员。感谢山口大学和东北大学为本研究提供的支持。本研究由日本学术振兴会(JSPS)科学研究费补助金(KAKENHI)资助,资助编号为 JP 16K10106、17K18648 和 19K08305。

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材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
      规格
普通狨猴    自繁
      母亲
5岁
数量:1
      父亲
5岁
数量:1
      婴儿
0–13日龄
数量:1
配方奶粉    乐贝思 海海,和光堂
数量:1
      蒸馏水
塑料手套    无粉
注射器    1 mL
数量:1
摄像机    Sony Handycam
数量:1
      iPhone摄像头
数量:1
电子天平    0.1 g 增量
数量:1

参考文献

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