勘误:利用细胞外通量分析探索单个三维微组织球体的线粒体能量代谢

DOI:

10.3791/6495

2022年3月11日

本文内容

摘要

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已发布更正:  利用细胞外通量分析探索单个三维微组织球体的线粒体能量代谢。代表性结果 部分已 更新。

摘要

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已发布更正:针对利用细胞外通量分析探索单个三维微组织球体的线粒体能量代谢。已更新“代表性结果”部分。

图5已从以下内容更新:

A549、HepG2/C3A、MCF-7、SK-OV-3 细胞中寡霉素对氧消耗率(OCR)的影响图。
图 5:线粒体呼吸化合物的单次或顺序注射。 将 MCF-7、HEPG2/C3A、SK-OV-3 和 A549 来源的癌细胞球体置于 XFe96 球体微孔板的孔中,使用 XF RPMI 培养基,并利用安捷伦 Seahorse XFe96 分析仪检测其氧消耗率(OCR)。OCR 每隔一定时间测量一次,共测量 5 次,随后加入 2 µg/mL 寡霉素(注射口 A:绿色曲线)或 5 µM BAM15(注射口 A:蓝色曲线或注射口 B:绿色曲线),分别用于抑制线粒体 ATP 合酶并测定最大呼吸能力。动力学 OCR 数据以基础值的百分比表示(A-D)。最大呼吸能力(OCRmax)通过公式计算为基础 OCR 的倍数:OCRmax = OCRBAM15 / OCRbasal。OCRmax 取 BAM15 注射后第 8–10 次测量周期的 OCR 平均值,包含(绿色柱)和不包含(蓝色柱)寡霉素处理组。数据为 3–8 个独立孔重复实验的平均值 ± 标准误(SEM),来自球体检测微孔板上的结果。缩写:OCR = 氧消耗率。 请点击此处查看该图的放大版本。

至:

寡霉素对癌细胞系OCR的影响;比较图;代谢活性分析。
图 5:线粒体呼吸化合物的单次或顺序注射。 将MCF-7、HEPG2/C3A、SK-OV-3和A549来源的肿瘤球体置于XFe96球体微孔板的孔中,使用XF RPMI培养基,并利用Agilent Seahorse XFe96分析仪检测其氧耗率(OCR)。在完成5次OCR测量后,通过注射端口A加入2 µg/mL寡霉素(绿色曲线)或5 µM BAM15(注射端口A:蓝色曲线,或注射端口B:绿色曲线),分别用于抑制线粒体ATP合酶并测定最大呼吸能力。动力学OCR数据以基础值的百分比表示(A-D)。最大呼吸能力(OCRmax)通过公式计算为基础OCR的倍数:OCRmax = OCRBAM15 / OCRbasal。OCRmax取BAM15注射后第8-10个测量周期的OCR平均值,包含(绿色柱)和不包含(蓝色柱)寡霉素处理组。数据为3-8个独立孔重复实验的平均值±标准误(SEM),来自整个球体检测微孔板。缩写:OCR = 氧耗率。 请点击此处查看该图的放大版本。

方案

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

已发布更正: 利用细胞外通量分析探索单个三维微组织球体的线粒体能量代谢。代表性结果部分已更新。

图5已从以下内容更新:

A549、HepG2/C3A、MCF-7、SK-OV-3 细胞中寡霉素对氧消耗率(OCR)的影响图。
图 5:线粒体呼吸化合物的单次或顺序注射。 将 MCF-7、HEPG2/C3A、SK-OV-3 和 A549 来源的癌细胞球体置于 XFe96 球体微孔板的孔中,使用 XF RPMI 培养基,并利用安捷伦 Seahorse XFe96 分析仪检测其氧消耗率(OCR)。OCR 每隔一定时间测量一次,共测量 5 次,随后加入 2 µg/mL 寡霉素(注射口 A:绿色曲线)或 5 µM BAM15(注射口 A:蓝色曲线,或注射口 B:绿色曲线),分别用于抑制线粒体 ATP 合酶并测定最大呼吸能力。动力学 OCR 数据以基础值的百分比表示(A-D)。最大呼吸能力(OCRmax)通过公式计算为基础 OCR 的倍数:OCRmax = OCRBAM15 / OCRbasal。OCRmax 取 BAM15 注射后第 8–10 次测量周期的 OCR 平均值,包含(绿色柱)和不包含(蓝色柱)寡霉素处理组。数据为 3–8 个独立孔重复实验的平均值 ± 标准误(SEM),来自整个球体测定微孔板。缩写:OCR = 氧消耗率。 请点击此处查看该图的放大版本。

至:

寡霉素对癌细胞系OCR的影响;比较图;代谢活性分析。
图 5:线粒体呼吸化合物的单次或顺序注射。 将MCF-7、HEPG2/C3A、SK-OV-3和A549来源的癌细胞球体置于XFe96球体微孔板的孔中,使用XF RPMI培养基,并利用Agilent Seahorse XFe96分析仪检测其氧耗率(OCR)。共测量5次OCR后,加入2 µg/mL寡霉素(注射口A:绿色曲线)或5 µM BAM15(注射口A:蓝色曲线或注射口B:绿色曲线),分别用于抑制线粒体ATP合酶并测定最大呼吸能力。动力学OCR数据以基础值的百分比表示(A-D)。最大呼吸能力(OCRmax)通过以下公式计算为基础OCR的倍数:OCRmax = OCRBAM15 / OCRbasal。OCRmax由BAM15注射后第8-10个测量周期的OCR平均值得出,包含(绿色柱)和不包含(蓝色柱)寡霉素处理组。数据为3-8个独立孔重复的平均值±标准误(SEM),来自球体检测微孔板。缩写:OCR = 氧耗率。 请点击此处查看该图的放大版本。

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Agilent Seahorse XFe96 BAM15 OCR