方法文章

富氏皮下针刺法对坐骨神经痛疗效的研究:慢性缩窄性损伤大鼠模型中的行为学与电生理学变化

DOI:

10.3791/65406

2023年6月30日

* These authors contributed equally

本文内容

摘要

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我们介绍了一种在坐骨神经慢性压迫损伤模型中应用付氏皮下针刺法诱导大鼠坐骨神经痛的实验方案。

摘要

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富氏皮下针刺法(FSN)是一种源自中医的创新针灸技术,目前在全球范围内用于缓解疼痛。然而,其作用机制尚未被完全阐明。在 FSN 治疗过程中,FSN 针被插入皮下组织并长时间留置,同时进行摆动摇动操作。但在动物模型(如大鼠)中实施 FSN 操作时,研究人员面临维持特定姿势的困难。不舒适的治疗过程可能导致动物对 FSN 针产生恐惧和抗拒,增加受伤风险,甚至可能影响研究数据的准确性。使用麻醉也可能干扰实验结果。因此,亟需建立一种在动物实验中实施 FSN 治疗的策略,以最大程度减少干预过程中的损伤。本研究采用 Sprague-Dawley 大鼠的慢性缩窄性损伤模型来诱导神经病理性疼痛。该模型通过对外周神经进行手术结扎,模拟人类神经损伤所引发的疼痛,重现了诸如神经卡压综合征和周围神经病变等疾病中常见的神经压迫或嵌压状态。我们介绍了一种适用于将 FSN 针顺利插入动物皮下层的操作方法,包括进针方向与位置、留针方式以及摆动摇动手法。通过减轻大鼠的不适感,可避免其因紧张导致肌肉收缩,从而阻碍针具进入,并有助于提高研究效率。

引言

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神经病理性疼痛是指由神经损伤引起的疼痛,估计影响全球6.9%–10%的人口,报告的终生患病率为49%–70%1,2。它也被认为是最难治疗的疼痛综合征之一。目前使用药物治疗神经病理性疼痛的效果有限,因为常用的止痛药物如非甾体抗炎药和阿片类药物在缓解此类疼痛方面疗效甚微3,4。因此,迫切需要探索新的治疗方法,尤其是非药物治疗手段。针灸作为一种非药物干预方式,可能通过作用于躯体感觉系统产生镇痛效应,从而缓解神经病理性疼痛。临床和临床前研究均表明,针灸在缓解神经病理性疼痛症状方面有效,且无明显副作用5,6,7。然而,针灸治疗神经病理性疼痛的中枢机制仍有待进一步研究。

近年来,浮针疗法(Fu's subcutaneous needling, FSN)在治疗与疼痛相关的神经系统疾病方面逐渐受到关注8。FSN起源于传统中医针灸,由中医师傅中華于1996年首次提出9,

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方案

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所有涉及动物受试者的实验程序均于2022年10月获得中国台湾彰化县彰滨秀传纪念医院机构动物照护及使用委员会(IACUC)的批准(111031)(图1)。

1. 动物准备

  1. 购买48只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠(年龄:8–10周,体重:250–300 g)。
  2. 将大鼠单独饲养于通风笼具中,环境温度为24 ± 2 °C,光照周期为12小时明暗循环。
  3. 给予大鼠标准颗粒饲料,并提供可随时饮用的无菌饮水,同时铺设柔软垫料。

2. 动物分组

  1. 将48只SD大鼠随机分为六组(每组n = 8):假手术组、CCI组、CCI+FSN组、CCI+TENS组、单独FSN组和单独TENS组,分组方法参照Chan等24先前的研究。
    ​注:六组的具体情况如下:(1)假手术组:不进行手术且不接受治疗;(2)CCI组:进行手术但不接受治疗;(3)CCI+FSN治疗组:在成功建立CCI模型后接受FSN治疗;(4)CCI+TENS治疗组:在成功建立CCI模型后接受TENS治疗;(5)单独FSN治疗组:仅接受FSN治疗,不进行手术;(6)单独TENS治疗组:仅接受T....

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结果

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足印分析及坐骨神经功能指数(SFI)的测定
我们观察了仅CCI组、CCI+FSN组和CCI+TENS组中SFI的演变情况(图7)。在CCI手术后第7天接受4次FSN和TENS治疗后,CCI+FSN组(-15.85 ± 3.46)和CCI+TENS组(-29.58 ± 9.19)的SFI显著优于仅CCI组(-87.40 ± 14.22)。其中,CCI+FSN组的改善程度显著优于CCI+TENS组(图7A)。

我们还研究了假手术组(0.02 ± 0.52)、仅行FSN治疗组(0.06 ± 1.75)和仅行TENS治疗组(-2.36 ± 1.22)的SFI值。结果显示,最后两个治疗组与假手术组之间均无显著差异(图7B)。这表明FSN和TENS是安全的治疗方法,不会对健康状态的大鼠造成任何损害(Table 1)。

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讨论

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本研究观察了浮针疗法(FSN)对坐骨神经慢性压迫损伤(CCI)大鼠模型神经病理性疼痛的影响。本研究提供了一种用于评估FSN或经皮神经电刺激(TENS)治疗后疗效的坐骨神经功能指数(SFI)和电生理检测方案。此外,还阐述了如何通过无创行为学测试和生理学测量来评估损伤神经的功能恢复情况。结果表明,在CCI诱导的坐骨神经痛后,FSN治疗组在所有预后指标上的改善均显著优于TENS治疗组。该研究在以FSN疗法为核心的动物实验中具有广阔的应用前景,有助于弥合基础研究与临床应用之间的鸿沟。本研究将通过更深入地理解疾病机制,从而改善患者的治疗效果。

针灸在中国已有3000多年的应用历史,通常被认为是一种在人类和实验动物中缓解疼痛的安全有效方法34,35。既往临床研究已证实,针灸可减轻CCI模型中的疼痛行为36。浮针疗法(FSN)是一种源于传统中医针灸的技术37,广泛用于治疗多种与疼痛相关.......

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披露

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作者声明不存在任何竞争性利益冲突。

致谢

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本研究得到了彰化基督教彰滨秀传纪念医院动物中心资助项目的资助。作者谨此感谢彰化基督教秀传纪念医院IRCAD TAIWAN在本研究项目期间提供的宝贵支持与协助。

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材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
镊子World Precision Instruments14098
傅’皮下穿刺南京派夫医学科技有限公司 FSN针具为一次性使用设计。FSN针由三部分组成:实心钢制针芯(底部)、软质套管(中部)和保护鞘(顶部)。
Medelec Synergy 肌电图仪Oxford Instrument Medical Ltd.034W003 肌电图(EMG)可用于辅助诊断和管理神经病变等疾病。包含便携式双通道肌电图/神经传导速度系统。
生理盐水(0.9%)20 mL中国台湾生物技术有限公司4711916010323批号:1TKB2022
POLYSORB 4-0 紫色 30" CV-25美国外科公司,泰科医疗旗下部门GL-181
牵开器COOPERSURGICAL, INC.(美国)3311-8G
Rompun礼来动保韩国有限公司27668
SCISSORS CVD 90MMBBRUANXG-LBB-BC101R
经皮神经电刺激Well-Life Healthcare Co.型号 2205A提供经皮神经电刺激(TENS)功能的数字装置。配备患者导联线、自粘电极片、3节AAA电池、使用说明书,收纳于柔软便携袋中。间歇模式开启时间1–30 秒。间隔关闭时间 1–30 s
Zoletil VIRRBAC8V8HA

参考文献

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  1. van Hecke, O., Austin, S. K., Khan, R. A., Smith, B. H., Torrance, N. Neuropathic pain in the general population: a systematic review of epidemiological studies. Pain. 155 (4), 654-662 (2014).
  2. Younes, M., et al. Prevalence and risk fa....

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