需要JoVE订阅才能观看此内容。 请登录或开始免费试用

方法文章

建立子宫内膜异位囊肿小鼠实验模型以研究其相关不孕症

2.2K 次观看

⸱

DOI：

10.3791/66240

⸱

2024年4月5日

 ,  ,  , 
1Department of Obstetrics and Gynaecology, Faculty of Medicine, The Chinese University of Hong Kong, 2Reproduction and Development, Li Ka Shing Institute of Health Sciences, The Chinese University of Hong Kong, 3School of Biomedical Sciences, Faculty of Medicine, The Chinese University of Hong Kong, 4Chinese University of Hong Kong-Sichuan University Joint Laboratory in Reproductive Medicine, The Chinese University of Hong Kong

本文内容

摘要

本研究介绍了一种专门设计用于模拟子宫内膜异位囊肿（一种具有重要临床意义的子宫内膜异位症亚型）的新型小鼠模型。该模型采用C57BL/6J小鼠，旨在阐明与子宫内膜异位囊肿相关不孕的病理生理机制，为填补生殖医学领域当前的知识空白提供一种优化的研究工具。

摘要

子宫内膜异位囊肿（OMA）是子宫内膜异位症的一种亚型，其特征是在卵巢中形成子宫内膜异位囊肿，影响约17%-44%被诊断为子宫内膜异位症的患者。患有OMA的女性常伴有生育力下降，但OMA相关不孕的具体机制尚不明确。值得注意的是，现有的动物模型主要模拟腹膜浅层子宫内膜异位症（SUP）和深部浸润型子宫内膜异位症（DIE），在针对OMA的研究方面存在显著空白。为弥补这一知识缺口，本文介绍了一种开创性的模拟OMA的小鼠模型，并全面描述了该模型所采用的技术与操作流程。该模型成功率高达83%，且具有卵巢病变特异性，在深化对OMA尤其是其不孕机制的理解方面具有重要意义。该模型为开展针对OMA相关生育障碍的定向研究提供了有价值的平台，有望推动生殖医学领域在诊断和治疗策略方面的进步。

引言

子宫内膜异位囊肿（OMA）是子宫内膜异位症中最主要的亚型，在约17-44%的子宫内膜异位症患者中可观察到1,2。其特征是在卵巢内形成子宫内膜异位囊肿。这些囊肿俗称"巧克力囊肿"，因其特有的深棕色、焦油样质地而得名3。除OMA外，子宫内膜异位症还可表现为腹膜表浅型子宫内膜异位症（SUP）和深部浸润型子宫内膜异位症（DIE）。SUP指发生于腹膜表面的病灶，而DIE指病灶浸润深度超过腹膜表面下5 mm的类型4。这些子宫内膜异位症亚型在病灶位置、形态和浸润深度上的异质性，导致了临床症状的多样性及疾病严重程度的差异5,6。OMA尤其与更严重的子宫内膜异位症分期相关，并且与不孕、盆腔粘连以及卵巢癌风险升高有关1,7,8,9。

子宫内膜异位症，尤其是卵巢子宫内膜异位囊肿（OMA），与不孕症的关联是一个备受关注的临床问题。在不孕女性中，子宫内膜异位症的患病率为25-50%，而被诊断为子宫内膜异位症的女性中有30-50%存在不孕问题10,11,12,13,14。尽管与OMA相关的不孕机制尚不明确，但已有若干假说提出。一种观点认为，子宫内膜异位症可导致慢性炎症状态，从而干扰正常的卵巢功能并损害卵母细胞质量15,16；另一种观点则提出，卵巢卵泡液中存在异常的铁过载，这可能与卵母细胞成熟障碍相关14。其他研究还涉及激素调节紊乱17、卵母细胞质量下降18以及胚胎发育异常19等问题。

从历史上看，啮齿类动物模型在加深我们对子宫内膜异位症的理解方面发挥了关键作用，尤其是在研究其病理学特征、对生育力的影响以及疼痛机制方面20,21,22,23。啮齿类动物，特别是大鼠和小鼠，已被广泛用作动物模型，以探索该疾病的因果关系、潜在机制、可能的诊断技术以及治疗干预手段22,24,25,26。需要认识到的是，所有动物模型都有其特定的用途和局限性。选择何种模型取决于所要测量或研究的具体结果或方面27。例如，一项大鼠模型研究表明，压力可能加剧子宫内膜异位症的表现，并影响炎症相关参数，从而为了解该疾病的潜在诱因提供了线索28。

在子宫内膜异位症研究中，有多种啮齿类动物模型被采用。其中一种常用的方法是同源模型，即将啮齿类动物的子宫组织移植到同种动物的腹腔或肠系膜血管中29。该模型在免疫功能完整性和适用于长期研究方面具有优势30。然而，由于移植的异位小鼠子宫组织与人类子宫内膜异位病灶的特征存在部分差异，该模型也存在局限性31。另一种方法是异源模型，即将人类子宫内膜活检组织植入免疫抑制的小鼠体内32。该模型可利用人类异位子宫内膜作为供体组织来形成病灶，具有良好的建构效度32。然而，该模型依赖于免疫抑制小鼠作为受体，因而难以全面评估疾病发病机制中涉及的免疫反应33。尽管如此，必须指出的是，现有模型主要侧重于模拟泛化的子宫内膜异位症（SUP），未能充分反映卵巢型子宫内膜异位囊肿（OMA）和深部浸润型子宫内膜异位症（DIE）的独特特征34。目前，针对DIE的特异性模型极为缺乏，仅有少数模型存在，其中包括Yan等人近期建立的一种啮齿类动物模型35。这种稀缺性凸显了进一步研究和开发能够准确再现DIE特有特征的动物模型的迫切需求。此外，我们对OMA的理解，尤其是其与生育力之间复杂关系的认识，仍然十分有限26，36。

针对现有挑战，本文提出了一种新型的同源小鼠模型，旨在特异性模拟卵巢子宫内膜异位症（OMA）。该模型旨在深入揭示OMA相关不孕症的病理机制，从而填补生殖医学这一关键领域中的知识空白。简言之，本研究选用C57BL/6J小鼠，因其具有类似人类的生殖特征。在完成动情周期同步后，将供体小鼠的子宫组织剪碎，并以1:2的比例移植至受体小鼠的卵巢囊中。经过4周的观察期后，通过形态学和组织学检查对卵巢病灶进行评估，以确认OMA的存在并分析相关的卵泡闭锁情况。该模型的成功率达83%，为OMA研究提供了可靠的实验平台，尤其强调卵巢局部病灶的形成，便于开展针对性研究。

访问受限。请登录或开始试用以查看此内容。

方案

本研究中进行的所有实验程序均经香港中文大学伦理委员会批准，并根据编号为21-203-MIS_[C]的协议进行监管。

1. 动物适应性饲养与筛选

  1. 小鼠准备
    1. 从可靠的供应商处获取18只C57BL/6J小鼠（初产雌性，8-9周龄：6只为供体，12只为受体），并核实其健康证明文件。
    2. 将所有小鼠饲养在受控环境中：温度22-24 °C，湿度40%-60%，12小时光照/12小时黑暗循环。如有条件，使用高效颗粒空气（HEPA）过滤器净化空气。
    3. 让小鼠适应环境72小时，期间自由获取食物和饮水，尽量减少人为干扰以降低应激反应。
  2. 动情周期同步化
    1. 收集含有雄性信息素的垫料，并将其引入雌性小鼠笼中，持续48小时。
  3. 阴道细胞学检测
    1. 于次日早晨进行阴道细胞学检查。
      注：必须在每天的相同时间进行涂片，通常为上午9:00。
      1. 提前准备好双头棉签、经高压灭菌的PBS、35 mm培养皿和已预先标记的载玻片。在培养皿中加入10 mL PBS，将棉签一端浸入PBS中使其充分吸收液体。
      2. 轻柔地从笼中取出一只小鼠，将其放置在一个空笼的盖子上。
      3. 用一只手的拇指和食指抓住小鼠尾巴，另一只手持湿润的棉签，轻柔地插入小鼠阴道。将棉签尖端以约45°角对准动物体长轴方向，小心插入约1.0 cm深度。在插入过程中缓慢旋转棉签。
        注：插入时缓慢旋转棉签有助于操作更顺畅，并减少对宫颈的刺激。
      4. 通过持续旋转棉签，轻柔地采集阴道腔及阴道壁上的细胞，然后小心地将棉签抽出。
        注：此过程中应确保棉签持续旋转，同时注意避免接触周围毛发。操作完成后，小心取出棉签，防止污染样本。
      5. 通过轻轻滚动棉签尖端，将采集到的细胞转移至干净且已预标记的载玻片上。
        注：每次转移细胞后应丢弃使用过的棉签，每只动物均需使用新的棉签。
      6. 在显微镜下观察载玻片，检测角化上皮细胞。若阴道细胞学涂片中均匀存在角化上皮细胞，则表明小鼠处于动情期。拍摄图像并记录观察结果。
        注：具备适当经验的操作者通常无需染色即可判读涂片。然而，若实验人员无法在未染色情况下准确"读取"涂片结果，则必须进行染色处理。

2. 子宫内膜异位囊肿模型的建立

注意：在模型建立过程中，仅选择处于动情期的小鼠作为供体和受体小鼠。对一只小鼠进行实验时，应确保其不在其他小鼠的视线范围内，并且在其完全恢复之前不得重新放回其他动物群体中。模型构建的示意图见图1。

  1. 供体组织准备
    1. 使用氯胺酮（75 mg/kg）和赛拉嗪（10 mg/kg）联合麻醉供体小鼠。在麻醉状态下通过颈椎脱位法处死供体小鼠。
    2. 用70%乙醇棉片对腹部区域进行消毒。
    3. 使用无菌手术剪沿腹膜正中线做1 cm切口，暴露肌层。另取一把手术剪剪开肌层，暴露盆腔。
    4. 将镊子尖端闭合，用钝性中央部分轻轻提起肠道。
    5. 定位子宫和卵巢组织。无菌分离整个子宫角，包括双侧子宫角，确保切除组织的长度约为1.5 cm。将切除的组织置于含有PBS的培养皿中，并去除多余的脂肪组织。
    6. 使用无菌手术刀将组织精细切割成1 mm³大小的组织块。定期添加PBS以保持组织湿润。
  2. 移植手术操作
    1. 使用氯胺酮（75 mg/kg）和赛拉嗪（10 mg/kg）混合物麻醉受体小鼠。
    2. 涂抹眼用软膏以防止手术期间眼睛干燥。将小鼠仰卧位固定于无菌手术板上。
    3. 通过轻柔移动小鼠后肢确定手术部位，皮下可触及骨性突起。该突起在皮肤下清晰可见，可作为手术过程中受体小鼠卵巢的可靠解剖标志。
    4. 剃除手术区域毛发，确保周围150%区域均无毛发残留。随后使用碘伏和70%酒精交替消毒至少3次。使用无菌手术巾防止组织、无菌器械和缝线与残留毛发接触。最后，在预定手术部位做精确的侧向切口（3–5 mm）。
    5. 用非优势手的镊子固定卵巢。向卵巢囊内缓慢注射100 µL PBS，观察轻微分离现象。
    6. 在囊上制造一个微小切口。使用显微镊子移植子宫组织碎片（1 mm³）。
      注意：避免过度填充，以防对周围组织造成压力。
    7. 对于假手术组，除步骤2.2.6外，其余步骤均相同。
  3. 术后护理
    1. 使用可吸收缝线（如5-0 Vicryl）缝合肌层，使用不可吸收缝线（如5-0尼龙）缝合皮肤。
    2. 将小鼠置于设定为37 °C的加热垫上，直至完全恢复意识。监测呼吸，并等待四肢转为粉红色。
    3. 每12小时皮下注射一次布托啡诺（0.1 mg/kg）以缓解疼痛，持续48小时。术后前24小时内每8小时检查一次疼痛、感染或不适迹象，之后3天内每日检查3次。
      注意：在动物恢复至能够维持胸卧位意识水平之前，不得无人看护。

3. 模型验证

  1. 大体验证
    1. 4 周后，使用氯胺酮（75 mg/kg）和赛拉嗪（10 mg/kg）联合麻醉受体小鼠。随后在深度麻醉状态下，通过颈椎脱位法处死小鼠。
    2. 行正中切口，暴露腹腔以进行器官检查。
    3. 取出带有可见病灶的卵巢，并拍照记录。
    4. 仔细检查是否存在卵巢外的子宫内膜异位病灶。
  2. 组织学验证
    注意：由于组织学实验中可能使用具有刺激性气味的溶剂，操作应在通风橱中进行。
    1. 将卵巢连同病灶一起置于10%中性缓冲福尔马林中固定。
    2. 按照 Adeniran 等人37所述的方法进行组织处理，包括组织取材、固定和包埋。
    3. 连续切片，厚度为 4–5 µm，漂浮于 45 °C 水浴中，贴附于载玻片上。用小鼠编号、卵巢侧别和切片编号清晰标记载玻片，并在 37 °C 下过夜干燥。
    4. PAS-苏木精染色
      1. 脱蜡：将切片置于二甲苯或二甲苯替代剂中，以去除石蜡。
        注意：此步骤可能需要重复数次。
      2. 复水：将切片依次浸入浓度递减的乙醇溶液（100%、95%、80%、70%）中，逐步复水。
      3. 高碘酸处理：用1%高碘酸溶液覆盖组织切片，在室温下作用5–10分钟。
        注意：该步骤将组织中的糖类基团氧化为醛基，使其可与希夫试剂反应，生成紫红色沉淀，以显示卵巢结构。
      4. 用蒸馏水充分冲洗切片，去除残留的高碘酸。
      5. 用希夫试剂染色15分钟。
      6. 先用热水流水冲洗切片以去除多余染料，再用蒸馏水冲洗。
      7. 用1 g/L迈耶苏木精对切片进行复染，时间为2–3分钟。
      8. 用流水冲洗切片2–3分钟。
      9. 加入蓝化试剂，作用30秒。
      10. 用蒸馏水冲洗切片。
      11. 将切片依次浸入浓度递增的乙醇溶液（70%、80%、95%、100%）中逐步脱水。
      12. 将切片浸入透明剂（如二甲苯）中使其透明。
      13. 在载玻片上的切片处滴加封片介质，轻轻盖上盖玻片，确保无气泡产生。将载玻片置于通风橱中自然干燥，以促进封片介质固化。
    5. 在光学显微镜下观察，记录卵巢中子宫内膜腺体、间质及出血性囊肿的存在，以确认子宫内膜异位症。

访问受限。请登录或开始试用以查看此内容。

结果

OMA 成功建立
在接受移植方案的 12 只小鼠中，有 10 只在大体解剖和组织学水平上均表现出典型的 OMA 病变，成功率为 83%。大体检查发现卵巢表面附着充满液体的病灶，类似于临床 OMA 的表现形式（图 2）。如 图 3 所示，组织病理学观察证实异位子宫内膜组织已成功植入。此外，子宫内膜异位病灶的浸润导致邻近植入部位的卵泡发生广泛闭锁，表明其对卵巢微环境产生了干扰。

模型特异性
该模型对卵巢子宫内膜异位症具有特异性，这是其有效性的重要基础。经过全面检查，在任何其他盆腔或腹腔器官中均未发现额外的子宫内膜异位病灶，这凸显了该模型的精确性及其作为研究子宫内膜异位囊肿及相关不孕症的可靠工具的潜力。

访问受限。请登录或开始试用以查看此内容。

讨论

卵巢子宫内膜异位症（OMA）在全球女性中的高发率凸显了一个重要的健康问题38。除了子宫内膜异位症的一般症状外，OMA 还带来额外的生育挑战，包括严重的盆腔疼痛、卵巢扭转的风险以及其他显著的临床影响39,40。尽管目前对 OMA 的发病机制和疾病进展的认识仍 largely 不明确，这一知识空白不仅阻碍了靶向治疗策略的制定，也导致许多女性持续接受疗效欠佳的治疗并反复出现症状。现代许多女性选择推迟生育，进一步加剧了与 OMA 相关的生育力担忧，因此更迫切需要全面理解并深入应对该病的病理生理机制。

从历史上看，阻碍我们深入理解卵巢子宫内膜异位症（OMA）的最重要障碍之一，是缺乏一个坚定且准确的动物模型。尽管过去已探索过多种模型，但这些模型往往难以准确再现OMA的特异性，或因在卵巢以外的器官中形成病灶而引入额外的混杂因素41。为此，我们开发了一种小鼠模型，以模拟OMA并加深对该疾...

访问受限。请登录或开始试用以查看此内容。

披露

作者声明无利益冲突。

致谢

本研究由香港特别行政区政府研究资助局资助的主题研究计划（T13-602/21-N）资助。

访问受限。请登录或开始试用以查看此内容。

材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
1 cc 注射器配 25 G 针头BD Biosciences301320
10 mm 细胞培养皿FALCON353001
10% 缓冲福尔马林Fisher ScientificSF100-4
10x 磷酸盐缓冲液 (PBS) 缓冲液Fisher ScientificAM9625
30 G 针头BD Biosciences305107
5-0 黑色编织丝线不可吸收缝线Ethicon Inc.W500H
70% 乙醇
粘附性显微镜载玻片Marienfeld810401
布托啡诺注射液 Med-Vet InternationalRXBUPRENOR5
双头棉签SANYO Co., LTD.HUBY-340
精细镊子Fine Science Tools11254-20
氯胺酮Alfasan International b.v2203095-08
微量离心管Corning MCT-150-C
持针器Excelta Corporation2827-NH-35-SE-ND
眼科软膏Major Pharmaceuticals10033691
过碘酸希夫 (PAS) 染色试剂盒 AbcamAb150680
无粉无菌手套Fisher Scientific19020558
组织处理/包埋盒Fisher Scientific15-197-700A
3 号手术刀片Fisher Scientific22-079-657
小型锯齿状半弯镊Roboz Surgical Instruments Co.RS-5135
小型手术剪Roboz Surgical Instruments Co.RS-5850
标准光学显微镜用于评估阴道细胞学涂片和组织学分析。
10 号钢制手术刀片B.BraunBB510
无菌纱布MEDICOMHMWS 077
灭菌耐热玻璃培养皿Corning70160-101
温控电热垫 
VICRYL RAPIDE（聚乳酸-乙醇酸共聚物910）可吸收缝线Ethicon Inc.W9918
赛拉嗪 Alfasan International b.v2110333-10

参考文献

  1. Khan, K. N., et al. Pelvic pain in women with ovarian endometrioma is mostly associated with coexisting peritoneal lesions. Hum Reprod. 28 (1), 109-118 (2013).
  2. Gałczyński, K., Jóźwik, M., Lewkowicz, D., Semczuk-Sikora, A., Semczuk, A. Ovarian endometrioma - a possible finding in adolescent girls and young women: A mini-review. J Ovarian Res. 12 (1), 104(2019).
  3. Tan, Z., et al. Impacts of endometrioma on ovarian aging from basic science to clinical management. Front Endocrinol (Lausanne). 13, 1073261(2022).
  4. Khan, K. S., et al. Mri versus laparoscopy to diagnose the main causes of chronic pelvic pain in women: A test-accuracy study and economic evaluation. Health Technol Assess. 22 (40), 1-92 (2018).
  5. Nisenblat, V., et al. Blood biomarkers for the non-invasive diagnosis of endometriosis. Cochrane Database Syst Rev. 2016 (5), 012179(2016).
  6. Harirchian, P., et al. Lesion kinetics in a non-human primate model of endometriosis. Hum Reprod. 27 (8), 2341-2351 (2012).
  7. Santulli, P., et al. Endometriosis-related infertility: Ovarian endometrioma per se is not associated with presentation for infertility. Hum Reprod. 31 (8), 1765-1775 (2016).
  8. Dai, Y., Li, X., Shi, J., Leng, J. A review of the risk factors, genetics and treatment of endometriosis in chinese women: A comparative update. Reprod Health. 15 (1), 82(2018).
  9. Younis, J. S. Endometriosis-associated ovarian cancer: What are the implications for women with intact endometrioma planning for a future pregnancy? A reproductive clinical outlook. Biomolecules. 12 (11), 1721(2022).
  10. Bonavina, G., Taylor, H. S. Endometriosis-associated infertility: From pathophysiology to tailored treatment. Front Endocrinol (Lausanne). 13, 1020827(2022).
  11. Filip, L., et al. Endometriosis associated infertility: A critical review and analysis on etiopathogenesis and therapeutic approaches. Medicina (Kaunas). 56 (9), 460(2020).
  12. Tanbo, T., Fedorcsak, P. Endometriosis-associated infertility: Aspects of pathophysiological mechanisms and treatment options. Acta Obstet Gynecol Scand. 96 (6), 659-667 (2017).
  13. Bulletti, C., Coccia, M. E., Battistoni, S., Borini, A. Endometriosis and infertility. J Assist Reprod Genet. 27 (8), 441-447 (2010).
  14. Ni, Z., et al. Iron-overloaded follicular fluid increases the risk of endometriosis-related infertility by triggering granulosa cell ferroptosis and oocyte dysmaturity. Cell Death Dis. 13 (7), 579(2022).
  15. Mohammed Rasheed, H. A., Hamid, P. Inflammation to infertility: Panoramic view on endometriosis. Cureus. 12 (11), e11516(2020).
  16. Jing, X., et al. Systemic inflammatory response markers associated with infertility and endometrioma or uterine leiomyoma in endometriosis. Ther Clin Risk Manag. 16, 403-412 (2020).
  17. Marcellin, L., et al. Serum antimullerian hormone concentration increases with ovarian endometrioma size. Fertil Steril. 111 (5), 944-952 (2019).
  18. Deng, Y., et al. Does current ovarian endometrioma increase the time for dor patients to reach live birth in ivf. BMC Pregnancy Childbirth. 22 (1), 324(2022).
  19. Dongye, H., Tian, Y., Qi, D., Du, Y., Yan, L. The impact of endometrioma on embryo quality in in vitro fertilization: A retrospective cohort study. J Clin Med. 12 (6), 2416(2023).
  20. He, Y., et al. Re-evaluation of mouse models of endometriosis for pathological and immunological research. Front Immunol. 13, 986202(2022).
  21. Kanellopoulos, D., et al. The interplay between endometriosis and fertility in rats: A systematic review. J Med Life. 15 (6), 742-746 (2022).
  22. Tejada, M. A., et al. Rodent animal models of endometriosis-associated pain: Unmet needs and resources available for improving translational research in endometriosis. Int J Mol Sci. 24 (3), 2422(2023).
  23. Bruner-Tran, K. L., Mokshagundam, S., Herington, J. L., Ding, T., Osteen, K. G. Rodent models of experimental endometriosis: Identifying mechanisms of disease and therapeutic targets. Curr Womens Health Rev. 14 (2), 173-188 (2018).
  24. Buigues, A., et al. Evaluation of pai-1 in endometriosis using a homologous immunocompetent mouse model. Biol Reprod. 99 (2), 326-335 (2018).
  25. Tirado-Gonzalez, I., et al. Endometriosis research: Animal models for the study of a complex disease. J Reprod Immunol. 86 (2), 141-147 (2010).
  26. Lagana, A. S., et al. Translational animal models for endometriosis research: A long and windy road. Ann Transl Med. 6 (22), 431(2018).
  27. Mukherjee, P., Roy, S., Ghosh, D., Nandi, S. K. Role of animal models in biomedical research: A review. Lab Anim Res. 38 (1), 18(2022).
  28. Cuevas, M., et al. Stress exacerbates endometriosis manifestations and inflammatory parameters in an animal model. Reprod Sci. 19 (8), 851-862 (2012).
  29. Nunez-Badinez, P., et al. Preclinical models of endometriosis and interstitial cystitis/bladder pain syndrome: An innovative medicines initiative-paincare initiative to improve their value for translational research in pelvic pain. Pain. 162 (9), 2349-2365 (2021).
  30. Umezawa, M., et al. Expression profile of extracellular matrix and adhesion molecules in the development of endometriosis in a mouse model. Reprod Sci. 19 (12), 1365-1372 (2012).
  31. Grummer, R. Animal models in endometriosis research. Hum Reprod Update. 12 (5), 641-649 (2006).
  32. Tejada, M. A., et al. Identification of altered evoked and non-evoked responses in a heterologous mouse model of endometriosis-associated pain. Biomedicines. 10 (2), 501(2022).
  33. Bruner-Tran, K. L., Carvalho-Macedo, A. C., Duleba, A. J., Crispens, M. A., Osteen, K. G. Experimental endometriosis in immunocompromised mice after adoptive transfer of human leukocytes. Fertil Steril. 93 (8), 2519-2524 (2010).
  34. Malvezzi, H., Marengo, E. B., Podgaec, S., Piccinato, C. A. Endometriosis: Current challenges in modeling a multifactorial disease of unknown etiology. J Transl Med. 18 (1), 311(2020).
  35. Yan, D., Liu, X., Guo, S. -W. The establishment of a mouse model of deep endometriosis. Human Reproduction. 34 (2), 235-247 (2018).
  36. Santulli, P., et al. Protein oxidative stress markers in peritoneal fluids of women with deep infiltrating endometriosis are increased. Hum Reprod. 30 (1), 49-60 (2015).
  37. Adeniran, B. V., Bjarkadottir, B. D., Appeltant, R., Lane, S., Williams, S. A. Improved preservation of ovarian tissue morphology that is compatible with antigen detection using a fixative mixture of formalin and acetic acid. Hum Reprod. 36 (7), 1871-1890 (2021).
  38. Sima, R. M., et al. Novel diagnosis of mesenteric endometrioma: Case report. Medicine (Baltimore). 98 (29), e16432(2019).
  39. Eskenazi, B., Warner, M. L. Epidemiology of endometriosis). Obstet Gynecol Clin North Am. 24 (2), 235-258 (1997).
  40. Laufer, M. R., Goitein, L., Bush, M., Cramer, D. W., Emans, S. J. Prevalence of endometriosis in adolescent girls with chronic pelvic pain not responding to conventional therapy. J Pediatr Adolesc Gynecol. 10 (4), 199-202 (1997).
  41. Tan, Z., et al. What we have learned from animal models to understand the etiology and pathology of endometrioma-related infertility. Biomedicines. 10 (7), 1483(2022).
  42. Meyerholz, D. K., et al. Glycogen depletion can increase the specificity of mucin detection in airway tissues. BMC Research Notes. 11 (1), 763(2018).
  43. Fang, E., et al. Cpeb3 deficiency in mice affect ovarian follicle development and causes premature ovarian insufficiency. Cell Death Dis. 13 (1), 21(2021).
  44. Zhou, J., Peng, X., Mei, S. Autophagy in ovarian follicular development and atresia. Int J Biol Sci. 15 (4), 726-737 (2019).
  45. Kitajima, M., et al. Enhanced follicular recruitment and atresia in cortex derived from ovaries with endometriomas. Fertil Steril. 101 (4), 1031-1037 (2014).
  46. Hayashi, S., et al. Novel ovarian endometriosis model causes infertility via iron-mediated oxidative stress in mice. Redox Biol. 37, 101726(2020).
  47. Yildiz, S., et al. The pain symptoms and mass recurrence rates after ovarian cystectomy or uni/bilateral oophorectomy procedures in patients over 40 years old with endometriosis. Ginekol Pol. 91 (6), 295-300 (2020).
  48. Guney, G., et al. Neutrophil gelatinase-associated lipocalin serum level: A potential noninvasive biomarker of endometriosis. Medicine (Baltimore). 102 (41), e35539(2023).
  49. Kaya, C., et al. The role of serum caspase 3 levels in prediction of endometriosis severity. Gynecol Obstet Invest. 83 (6), 576-585 (2018).

访问受限。请登录或开始试用以查看此内容。

重印与许可

探索更多文章

子宫内膜异位囊肿小鼠模型卵巢子宫内膜异位囊肿子宫内膜异位症不孕卵巢子宫内膜异位囊肿相关性不孕生殖医学子宫内膜异位症动物模型卵巢病变生育力研究卵巢子宫内膜异位囊肿模拟
建立子宫内膜异位囊肿小鼠实验模型以研究其相关不孕症
联系我们
向图书馆推荐

隐私政策

使用条款

政策

版权所有 © 2026 MyJoVE Corporation。保留所有权利。