本研究建立了一种基于双抗体的夹心检测法，用于快速检测感染幽门螺杆菌（Helicobacter pylori）的粪便抗原。
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方法文章
粪便抗原的快速检测 幽门螺杆菌 基于双抗体夹心检测技术的感染检测
* These authors contributed equally
本文内容
摘要
摘要
Helicobacter pylori 可寄生于胃黏膜，感染后可引发一系列胃肠道疾病，与胃炎、胃溃疡及胃癌密切相关。在医疗基础设施薄弱和卫生条件不足的地区，H. pylori 感染的高发病率仍是重要的公共卫生问题。因此，在资源有限的环境中，开发快速、简便且经济高效的 H. pylori 检测筛查方法至关重要。
本研究在广东省石潭村开展了一项基于社区的筛查工作。石潭村地处偏远、经济欠发达，常住人口约300人，居民整体教育水平较低。我们采用双抗体夹心法检测 H. pylori 粪便抗原检测，该方法因其在资源有限环境中的潜在适用性而被选用。共招募了来自该村庄的261名参与者，并使用该技术分析了他们的粪便样本。为了进行比较验证，对同一批样本进行了定量聚合酶链式反应（qPCR）分析。与qPCR结果相比，该检测方法在识别目标物时的敏感性和特异性分别为 H. pylori 粪便中抗原的检出率分别为60.24%和80.08%。结果表明，粪便抗原检测方法与qPCR之间具有高度一致性（Kappa = 0.630。 本研究系统阐明了粪便抗原检测的原理、流程、方法学及临床应用 H. pylori 感染，旨在探索基于乳胶的双抗体夹心技术，并建立其辅助诊断的新策略与实用指南。
引言
幽门螺杆菌（H. pylori，Hp）是一种微需氧、螺旋状、革兰氏阴性细菌1。由于其能够在人体胃部定植并引起慢性感染2，该病原体已被确认为胃腺癌发生的主要病因之一3,4。2015年，全球约有44亿人感染H. pylori5。H. pylori感染的流行率存在显著的地理差异，发展中国家的感染率明显高于发达国家。值得注意的是，在低收入国家以及某些脆弱人群中，感染率可高达75%6。
尽管胃镜等传统检测方法具有较高的准确性，但由于其具有侵入性、成本较高且患者接受度低，限制了其在大规模筛查和常规随访中的应用7。因此，寻找非侵入性、简便且快速的诊断方法已成为现代临床医学研究的重要方向。H. pylori 非侵入性诊断的主要目的是在无需内镜检查的情况下，准确、安全、便捷地检测患者是否感染 H. pylori。尿素呼气试验（UBT）、H. pylori 粪便抗原检测（FAT）8
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方案
本横断面研究已获得广东省人民医院伦理委员会批准（批准号：KY2024-445-01），研究过程中所有受试者的个人信息均严格保密。所有参与者在实验前均签署了书面知情同意书。研究对象为2024年广东省清远市石潭村的常住居民，年龄和性别不限。下述双抗体夹心法（定性实验）由专业医学技术人员严格按照说明书操作。本研究纳入该村全部常住人口，无论其健康状况、是否存在胃肠道相关症状或已知胃肠道疾病。
1. 患者选择
- 若患者在近1个月内使用过质子泵抑制剂、铋剂、H2受体阻滞剂或抗生素，则予以排除。
- 要求所有参与者匿名填写问卷。问卷内容包括五个问题：您是否规律进食三餐？您是否饮酒？您是否知晓H. pylori？您是否认为有必要进行H. pylori检测？您是否了解H. pylori感染的不良后果？
2. 粪便中幽门螺杆菌（H. pylori）感染抗原检测的操作步骤
注意：幽门螺杆菌（H. pylori）粪便抗原检测的算法设计旨在确保结果的准确性和可靠性，同时兼顾操作的简便性与卫生性。整个流程分为五个步骤：样本采集、样本处理、样本保存、检测和结果判读。样本检....
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结果
问卷调查
本研究共纳入261名参与者，包括144名女性和117名男性，年龄范围为4至99岁，平均年龄为48.30 ± 17.61岁。其中未成年人（0-17岁）17人，成年人（18-64岁）202人，老年人（>64岁）42人。问卷调查结果见表1。大多数参与者（90.8%）认为有必要开展H. pylori筛查。
本村粪便H. pylori抗原检测筛查结果
在接受粪便H. pylori抗原检测的261名参与者中，52人（19.92%）结果为阳性，209人为阴性。在52例阳性病例中，女性32人，占所有女性参与者的22.22%；男性20人，占所有男性参与者的17.09%。按年龄分层分析，阳性率分别为：未成年人（0–17岁）2例阳性（11.76%），成年人（18–64岁）41例阳性（20.30%），老年人（>64岁）9例阳性（21.43%）。
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讨论
H. pylori 是全球范围内最常见的细菌感染之一15。问卷调查结果显示，55.2%的人群对H. pylori缺乏认知，而90.8%的人认为H. pylori筛查是必要的。这些发现凸显了在经济欠发达和偏远地区推行H. pylori筛查项目的重要性16。尽管尿素呼气试验（UBT）是一种常用的诊断方法，但其高昂的成本以及对儿童和孕妇的不适用性限制了其广泛应用17,18。血清H. pylori抗体检测可检测患者血清中的抗体19。然而，由于抗体在细菌被清除后仍可长期存在，该检测不适用于治疗后的评估20。相比之下，粪便抗原检测是一种无创方法，无需进入胃腔，仅需采集粪便样本即可进行分析。该方法显著减轻了患者的不适感和潜在风险，更便于筛查和随访。此外，其无.......
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披露
作者声明无任何利益冲突。
材料
| 姓名 | 公司 | 目录编号 | 评论 |
|---|---|---|---|
| DNA提取试剂盒 | Jiangsu mole biotechnology co., ltd | 20230223 | 无 |
| H. pylori粪便抗原检测试剂盒 | 杭州诺辉健康科技有限公司 | 20213401126 | 无 |
| H. pylori 核酸检测试剂盒 | Jiangsu mole biotechnology co., ltd | 20230226 | 无 |
| 实时荧光定量PCR | 上海宏石医疗科技有限公司 | 20183221659 | 无 |
| 统计产品与服务解决方案 | IBM公司 | 无 | 无 |
参考文献
- Ali, A., AlHussaini, K. I. Helicobacter pylori: A contemporary perspective on pathogenesis, diagnosis and treatment strategies. Microorganisms. 12 (1), 222(2024).
- Kusters, J. G., van Vliet, A. H., Kuipers, E. J. Pathogenesis of Helicobacter pylori infection.
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重印与许可
