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方法文章

脊髓损伤后认知功能障碍的电针治疗

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DOI:

10.3791/69346

2025年11月21日

* These authors contributed equally

本文内容

摘要

本研究建立了一种标准化的电针治疗程序,旨在治疗脊髓损伤后的认知功能障碍。此外,详细描述了进行Y迷宫和新物体识别实验的方案,以评估电针对改善认知缺陷的疗效。

摘要

脊髓损伤(SCI)是一种致残性极强且破坏性严重的中枢神经系统(CNS)疾病,不仅会导致肢体运动和感觉功能障碍,还会破坏海马和皮层的结构与功能,引发认知功能障碍,严重影响患者的生活质量。因此,探索有效的治疗手段和评估方法至关重要。电针(EA)是一种将传统针灸与现代电疗技术相结合的新型疗法,具有安全性高、不良反应少的优点,已广泛应用于脊髓损伤的治疗。根据中医理论,督脉连接脑与脊髓,因此对督脉上的穴位进行电针刺激可有效恢复脑和脊髓的功能。在本实验方案中,我们采用Allen法构建脊髓损伤模型,介绍了一种用于治疗SCI大鼠认知功能障碍的电针干预方法,并详细描述了Y迷宫和新物体识别(NOR)实验的操作流程,以评估电针对改善大鼠认知缺陷的疗效。本研究不仅为脊髓损伤后认知障碍的治疗提供了可参考的干预方案,也为该病症治疗策略的验证及后续研究探索提供了初步的实验依据。

引言

脊髓损伤(SCI)是一种常见的中枢神经系统(CNS)疾病,通常由外力导致脊髓或其周围结构受损引起。该病症可造成损伤平面以下的感觉、运动及自主神经功能障碍1。更为严重的是,SCI 还可能引发焦虑、抑郁和认知功能障碍等继发性并发症2,3,这些并发症会严重影响患者的康复进程,并显著降低其生活质量。多项流行病学研究发现,SCI 患者患阿尔茨海默病(AD)的风险明显高于普通人群4,5,6。另有研究证实,SCI 患者认知功能障碍的发生率可能高达 60%5,7。SCI 不仅会导致运动皮层萎缩,还会降低与认知功能相关脑区的神经活动8。SCI 后海马、丘脑和皮层区域的炎症反应增强被认为是导致认知功能障碍的重要因素9,10,11。改善 SCI 相关的并发症....

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方案

所有实验操作均严格遵守美国国立卫生研究院《实验动物护理和使用指南》,并经北京中医药大学动物伦理委员会批准(批准编号:BUCM-2024042505-2065)。

1. 动物准备

  1. 选择体重为220.0 g ± 20.0 g的成年雄性Sprague Dawley(SD)大鼠用于实验。
  2. 将动物饲养于北京中医药大学实验动物中心,环境温度控制在(24 ± 2)°C,12小时明暗循环,自由摄取无菌饮水和标准颗粒饲料。 随意摄取.
  3. 实验前将所有动物在环境中适应7天。
  4. 将24只SD大鼠随机分为三组(每组n = 8):假手术组(Sham组)、脊髓损伤模型组(Model组)和电针组(EA组)。实验设计的时间轴示意图如下所示 图1.

2. 脊髓损伤模型的建立

注意:大鼠在手术前禁食禁水 8 小时,手术器械经高温蒸汽灭菌。脊髓损伤(SCI)模型采用 Allen 法的改良方法建立24

  1. 将大鼠放入麻醉诱导箱中,使用含4%异氟烷(1 L/min)的氧气进行诱导麻醉,直至大鼠完全麻醉。....

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结果

EA 改善脊髓损伤大鼠的运动功能
第1天st 脊髓损伤(SCI)手术后一天,模型组的BBB评分记录为0,表明SCI模型成功建立。在整个1st, 7th, 14th, 21st,以及28th 术后第几天,模型组的BBB评分显著低于假手术组(< 0.01)。值得注意的是,在第7天th, 14th,以及28th 术后数天,电针组的BBB评分显著高于模型组(< 0.01; 图4).

电针增强脊髓损伤大鼠的认知功能
Y迷宫实验结果(图5A)显示,与假手术组相比,模型组大鼠在新臂中的探索时间比例和探索频率比例均显著降低(&.......

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讨论

脊髓损伤(SCI)是一种应激性事件,会对患者的生理和心理造成严重创伤,不仅导致运动和感觉功能障碍,还会引发认知功能障碍3。据报道4,脊髓损伤后认知功能下降的风险是健康个体的13倍。与未经历脊髓损伤的同龄人相比,中老年脊髓损伤患者更易罹患阿尔茨海默病(AD)6。受伤后,脊髓损伤患者必须适应新的生活方式并重新融入社会。然而,认知功能障碍可能阻碍这一过程,对康复产生负面影响。因此,探索有效的治疗方法以促进脊髓损伤患者的康复至关重要。电针(EA)是中医(TCM)中一种独特的疗法,通过在特定穴位施加电刺激,可增强器官功能,从而有效缓解神经精神类疾病相关症状26,27。本研究旨在介绍一种用于治疗脊髓损伤大鼠认知功能障碍的电针干预方法,并通过行为学评估手段验证电针疗法的有效性。

中医强调整体观念,将人体视为一个有机整体。经络是气血运行的通.......

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披露

所有作者均已声明不存在潜在的利益冲突。

致谢

本研究受到国家自然科学基金(编号:82374593、82305381)、深圳市高水平医院建设基金(编号:24275G1001)、常熟市医疗卫生科技计划支持项目(编号:CSWSQ202302)以及北京中医药大学研究生自主研究项目(编号:ZJKT2025016)的资助。

....

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材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
0.9% 生理盐水北京索莱宝科技有限公司IN9000, P1022-10
4% 多聚甲醛碧云天P0099
75% 医用酒精、碘伏北京欧贝生物科技有限公司OB40126-1, HX0098A用于消毒
针灸针中研泰和有限公司ZY500
小动物麻醉机上海玉研仪器有限公司ABM
动物行为分析系统北京中实迪创科技有限公司ZS-XWT-II
离心机Eppendorf, 德国5811FR080384
电针仪汕头市医用仪器厂有限公司6805-D用于 电针治疗
ELISA 试剂盒江莱生物科技有限公司JL18365, JL20896用于检测 IL-1、IL-6 水平
明胶海绵江西祥恩医疗科技发展有限公司24092901
苏木精溶液、伊红溶液Sigma-Aldrich03971用于 HE 染色
Infinite Horizon 撞击器Lexington, KY, 美国IH-0400用于构建脊髓损伤模型
异氟烷深圳瑞沃德生命科学有限公司R510-22-10
显微镜OLYMPUS
青霉素钠CoolaberCP8271-5g
苯巴比妥钠Sigma-AldrichP3761
SD 大鼠斯贝福(北京)生物技术有限公司SCXK2019-0010
SPSSIBMVersion 26.0统计学软件
蔗糖北京索莱宝科技有限公司S8271
二甲苯上海阿拉丁生化科技股份有限公司X112050

参考文献

  1. Kirshblum, S., Snider, B., Eren, F., Guest, J. Characterizing natural recovery after traumatic spinal cord injury. J Neurotrauma. 38 (9), 1267-1284 (2021).
  2. Lim, S. W., et al. Anxiety and depression in patients with traumatic spinal ....

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