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方法文章

溃疡性结肠炎的中药灌肠疗法：基于系统评价与荟萃分析的作用机制及最佳疗程

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⸱

DOI：

10.3791/69567

⸱

2026年5月29日

 ,  , 
1The Affiliated Hospital of Nanjing University of Chinese Medicine

本文内容

摘要

这项针对20项动物研究（共980只受试动物）的荟萃分析表明，复方中药灌肠可通过抗炎、增强肠道屏障功能及调节肠道菌群，显著改善溃疡性结肠炎的各项指标。最佳治疗持续时间为10至28天。尽管结果令人鼓舞，但研究间异质性高且现有研究质量偏低，需谨慎解读；仍需高质量的临床试验加以验证。

摘要

本系统综述与荟萃分析旨在阐明中药灌肠制剂在溃疡性结肠炎（UC）动物模型中发挥疗效的作用机制，并为其潜在的临床应用提供科学依据。通过全面检索PubMed、Web of Science、Cochrane图书馆、Elton B. Stephens Company（EBSCO）和ScienceDirect数据库，纳入截至2024年12月发表的相关动物实验研究。采用SYRCLE偏倚风险评估工具评价方法学质量，使用RevMan 5.3和Stata 15进行统计分析。

共纳入20项研究，包含980只动物，研究质量评分范围为2至6分。中药灌肠显著降低了组织学结肠炎评分、疾病活动指数、脾脏指数、结肠损伤评分以及包括IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-8、COX-2 mRNA和髓过氧化物酶在内的炎症介质水平。同时，中药灌肠还改善了体重变化、结肠长度、肠道紧密连接蛋白（ZO-1、Occludin）、IL-10表达和调节性T细胞水平（CD4⁺CD25⁺FOXP3⁺），并调节了肠道菌群组成，特别是厚壁菌门（Firmicutes）和拟杆菌属（Bacteroides）。

这些发现表明，中药灌肠的治疗益处可能源于其抗炎活性、对肠道屏障完整性的增强作用以及对肠道菌群的调节作用。然而，由于动物种类、性别和干预时间等方面的差异，研究间存在显著的异质性，且总体方法学质量较低，限制了证据的强度。有必要开展更多设计严谨、高质量的临床前和临床研究，以证实其疗效，优化治疗方案，并评估其在人体应用中的安全性。

引言

炎症性肠病（IBD）主要包括两种类型：溃疡性结肠炎（UC）和克罗恩病（CD）。研究表明，遗传因素、环境因素、微生物相互作用以及免疫调节异常均参与了IBD的发病机制1。新兴证据显示，发展中国家IBD的发病率呈上升趋势2。UC的特征是反复发作的腹痛、腹泻和直肠出血3。改善UC患者的临床症状并降低复发率是临床管理中的关键目标4。

传统的炎症性肠病（IBD）治疗手段，包括皮质类固醇、免疫抑制剂和生物制剂，旨在调控免疫反应；然而，长期使用会伴随显著的不良反应5。近年来出现了多种新的治疗选择。研究表明，局部治疗具有高效、安全且副作用较少的优势。与口服治疗相比，其优点包括起效更快、给药频率更低以及全身吸收有限。然而，接受局部治疗的患者数量仍低于接受口服治疗的患者6。

中医（TCM）被广泛用作炎症性肠病（IBD）的有效补充和替代疗法，尤其适用于对常规治疗产生不良反应的患者。尽管中医具有显著的治疗潜力，但其临床应用仍受限于对其作用机制研究的不足7。

尽管大量动物实验已报道复方中药灌肠剂对溃疡性结肠炎（UC）的治疗作用，但目前尚无系统评价对临床前研究的疗效证据进行整合。系统评价已成为循证医学中确立干预措施有效性和安全性的关键工具8。因此，本研究系统回顾了动物实验，以评估复方中药灌肠剂的治疗效果，重点关注其对UC动物模型中结肠组织学评分（HCS）、疾病活动指数（DAI）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及肠道菌群的影响，旨在为未来的临床试验和产品开发提供依据。本研究旨在为复方中药灌肠剂的临床应用提供坚实的循证支持。

本项荟萃分析主要关注采用葡聚糖硫酸钠或2,4,6-三硝基苯磺酸溶液诱导的啮齿类动物模型（主要是Sprague-Dawley大鼠和C57BL/6小鼠），干预时间为3至28天，评估的关键指标包括组织学评分（组织学评分/疾病活动指数）、炎症性细胞因子（IL-6/TNF-α）、屏障蛋白（ZO-1/闭锁蛋白）以及肠道微生物群。尽管该分析为中药灌肠的应用提供了机制性见解，但在讨论部分也指出了研究间的异质性和方法学质量偏低（SYRCLE评分2–6分）等局限性，以指导临床转化时需谨慎对待。本文所用缩略语的详细术语表见补充文件1（数据1）。

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方案

所有纳入的动物研究均遵循ARRIVE指南，并已获得各自主管机构伦理委员会的批准。盲法和随机化操作依据SYRCLE指南进行。本综述符合PRISMA报告标准（编号：CRD42024527636）。所有操作均在伦理许可下进行，以最大限度减少偏倚和动物伤害。

1. 软件安装与准备

  1.  安装 RevMan（版本 5.3，Cochrane 协作网，https://revman.cochrane.org）。
    1. 访问 RevMan 官方网站（参见材料表）。
    2. 下载与操作系统兼容的安装文件（Windows .exe 或 Mac .pkg）。
    3. 双击安装程序并按照提示操作：下一步 >选择安装路径 >下一步 >完成。
    4. 启动 RevMan，选择文件 > 新建综述 > 干预性综述 > 完整综述。
  2.  Stata 软件
    1. 前往 Stata 官方网站（参见材料表），进入下载页面。
    2. 下载与您操作系统兼容的安装包。
    3. 双击安装程序并按照提示操作：下一步 > 接受许可协议 >选择安装路径 >安装 > 完成。
    4. 启动 Stata，输入序列号、授权码和认证信息以激活许可证。
  3.  EndNote X9 参考文献管理软件
    1. 访问 EndNote 官方网站（参见材料表）。
    2. 下载适用于您操作系统的 EndNote X9 安装程序。
    3. 双击安装程序，接受许可协议 >选择典型安装 >选择安装路径 >安装 >完成。
    4. 启动 EndNote，并使用产品密钥或机构凭据进行激活。
  4.  GetData 图表数字化工具
    1. 访问 GetData Graph Digitizer 官方网站（参见材料表）。
    2. 下载安装程序。
    3. 双击安装程序，接受许可协议 >选择安装路径 > 安装 >完成。
    4. 在原始数据不可获得时，启动该软件以从图表中提取数值数据。
      1. 将图表图像导入软件中。
      2. 利用图表中提供的标尺对 X 轴和 Y 轴进行校准。
      3. 手动标记每个数据点，以获取其坐标值。
      4. 导出提取的数值数据。
      5. 由两名独立研究人员交叉验证提取的数据；差异超过 5% 的数据需重新检查并修正。
        注：所有软件的安装与激活应在文献处理步骤之前完成，以确保工作流程顺畅。

2. 文献检索

  1. 制定检索策略。
    1. 通过首先审阅研究目的和关键结局来确定检索词。明确与溃疡性结肠炎、中药灌肠及动物模型相关的核心概念。
      1. 针对溃疡性结肠炎，使用诸如 "ulcerative colitis"、"IBD" 和 "inflammatory bowel disease" 等术语。
      2. 针对中药灌肠，包括如 "Chinese medicine enema"、"traditional Chinese medicine enema"、"compound prescription enema" 等关键词及相关同义词。
      3. 针对动物模型，使用如 "rat"、"mouse"、"rodent" 和 "animal study" 等术语。使用布尔运算符（AND、OR）组合这些术语。例如，将“ulcerative colitis” AND “Chinese medicine enema” AND “animal model”组合，以检索满足所有条件的研究。根据所使用的数据库调整检索词，并利用各数据库的受控词表。
      4. 通过包含同义词或替代短语来优化检索，以提高检索的敏感性。
    2. 各数据库的具体检索策略详见 补充文件1（数据2）。
  2. 在五个数据库中进行文献检索：PubMed、Web of Science、Cochrane Library、EBSCO 和 ScienceDirect。
    1. 对于每个数据库，访问其官方网站（例如，PubMed 的网址为 https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov）。在检索界面中，将预定义的检索策略输入 高级检索 字段。对于 PubMed，点击 Advanced > Add Query Builder，然后按如下方式填写检索框：
      字段1：“ulcerative colitis” [Title/Abstract]
      字段2：“Chinese medicine enema” OR “traditional Chinese medicine enema” [Title/Abstract]
      字段3：“animal experiment” OR “rat” OR “mouse” [All Fields]
    2. 使用布尔运算符 AND 组合这些字段，以确保满足所有条件。将时间范围设定为从数据库建库至 2024年12月1日，并将语言限定为英文。点击 Search，然后在适用情况下使用 Filters > Article type > Preclinical Studies 进行筛选。
    3. 通过选择 Send to > File > Format: MEDLINE（适用于 PubMed）或 Export > RIS/BibTeX（适用于其他数据库）导出所有检出记录。将文件保存以便导入 EndNote X9，用于后续筛选和去重。
      注：两名独立评审员使用相同标准执行检索，分歧通过协商解决（见 材料表）。以 PubMed 为例：
      1. 打开 PubMed 数据库网站。
      2. 根据 PubMed 语法规则输入预定义的检索策略（详见 补充文件1 中的数据2，获取完整细节）。

        注：AND 运算符要求所有连接的关键词均出现在记录中；OR 运算符表示所列关键词中至少有一个必须存在；括号 () 用于定义逻辑运算顺序。将检索时间范围设定为从数据库建库至 2024年12月1日。
      3. 下载所有检出文献：Save > PubMed > Create file。

3. 文献筛选

注意：以使用 EndNote X9 管理的 PubMed 检索数据为例。

  1.  将检索到的文献导入 EndNote： 文件 > 导入 > 选项 > 导入选项 > 选择 PubMed（NLM） > 导入 （数据2在 补充文件 1).
  2.  在 EndNote 中创建纳入和排除分组： 我的群组 > 创建组集或创建组 （数据4在 补充文件 1).
    排除组可能包括：
    不恰当的干预（非中药灌肠）
    不合适的主题（非溃疡性结肠炎模型，或临床/体外研究）
    重复发表
    非英语语言
  3. 去除重复项 转至所有参考文献 > 参考文献 > 查找重复项 > 取消。 在结果列表中选中所有重复条目，将其拖动至左侧的“回收站”文件夹以删除。自动去重后，需再次手动检查，确保无任何重复条目残留（Data 5 in 补充文件 1).
  4.  筛选流程：第一轮，阅读标题和摘要，排除不符合纳入标准的研究。第二轮，查阅剩余研究的全文，确认其最终是否符合纳入资格。
  5.  手动检索与作者联系：对所纳入研究中引用的参考文献进行手动检索。当相关数据缺失或不明确时，通过电子邮件联系通讯作者，以提高纳入率并减少不确定性。
  6.  研究人员参与：由两名独立研究人员共同进行文献检索与筛选。通过讨论解决分歧；若无法达成一致，由第三名研究人员提供最终决定。
  7. 记录过程：使用 Microsoft Word 或相关软件创建 PRISMA 2020 流程图，记录各阶段检索到和排除的研究数量，并注明排除原因（参见 补充文件 2).

4. 数据提取

  1. 准备一个包含以下变量的电子表格：
    研究信息：作者、发表年份。
    动物信息：物种、品系、性别、体重范围和样本量。
    模型诱导方法：明确使用DSS、TNBS或其他方法。
    干预措施详情：剂量或浓度、给药频率和持续时间。
    测量结局指标：包括组织学结肠炎评分（HCS）、疾病活动指数（DAI）、结肠长度（CL）、体重变化（BWC）、脾脏指数、炎症细胞因子、肠道屏障蛋白及菌群组成等。标准化的数据提取格式详见补充文件1中的数据6。
  2. 对于多个干预剂量，通过在每项纳入研究中识别接受最高剂量中药灌肠剂的实验亚组，提取高剂量组数据。
    1. 当报告了多个剂量水平时，记录原始文章方法或结果部分中所述的最高浓度或剂量对应的数据。
    2. 若单位或浓度不明确，根据作者描述或表格内容核实剂量层级。由两名独立的研究人员交叉核对提取的数据，任何分歧均通过讨论解决。
  3. 对于在多个时间点测量的结局指标，通过在每项纳入研究中识别干预后最后一次评估结局的时间点，记录最终测量值。
    1. 当报告了多个时间点时，提取治疗后最终观察时间点的数据，以反映整体治疗效果。
    2. 若表格或图表中呈现了多个终点数据，采用对应最后报告测量周期的数值。两名独立研究人员核对提取的时间点，以确保准确性和一致性。
  4. 在新单元格中输入公式 =SEM_value × SQRT(样本量)，将平均值的标准误（SEM）转换为标准差（SD）。将计算得到的SD值复制到RevMan数据表中。通过重新计算一项代表性研究的转换结果来验证准确性9。
  5. 根据需要将中位数和四分位数转换为均值和标准差10,11。
  6. 由两名研究人员独立提取数据；通过讨论解决任何分歧。
    注意：当未提供原始数值时，使用GetData Graph Digitizer对图表中的数据进行数字化处理。

5. 偏倚风险评估

  1. 使用 SYRCLE 偏倚风险评估工具12，从随机化、分配隐藏、盲法、结果报告等十个领域对研究质量进行评估。
  2. 将每一项评定为低风险、高风险或风险不明确，并在 RevMan 中汇总结果。针对每个领域，审查方法部分——若明确描述了随机化，则评定为低风险；若未描述，则评定为高风险；若描述模糊，则评定为不明确。在 RevMan 表格中统计得分（0–10 分）。

6. 统计分析

  1. 在 RevMan 5.3 中启动荟萃分析。
    1. 在 主菜单 中，进入 数据与分析 > 添加比较。
    2. 输入实验组（例如，“灌肠”）和对照组（例如，“溃疡性结肠炎”）的名称 > 点击完成（见补充文件1中的数据7）。
    3. 为添加结局指标，选择添加结局，选择变量类型（连续变量选择连续型，二分类变量选择二分类），点击下一步，输入结局指标名称（例如，“组织病理学评分 (HCS)”、“疾病活动指数 (DAI)”、“结肠长度 (CL)”、“体重变化 (BWC)”），然后点击完成（见补充文件1中的数据8）。
    4.  添加研究数据：添加研究数据 > 从纳入的文献列表中选择参考文献 > 完成（见补充文件1中的数据9和数据10）。
    5. 对于每个结局，将提取的数据（各组的均值、标准差 (SD) 和样本量）手动输入数据表中。
  2. 进行统计模型选择。
    1. 对于连续型结局，当所有纳入研究的测量单位相同时，使用均数差 (MD)；当测量单位不同时，使用标准化均数差 (SMD)。
    2. 所有效应量估计值均设定 95% 置信区间 (CI)。统计模型选择如下：若异质性较低（I2 ≤ 50%），采用固定效应 (FE) 模型；若异质性较高（I2 > 50%），采用随机效应 (RE) 模型。
      注意： 本分析因涉及不同物种、建模方法和干预方案，故采用随机效应模型。
  3. 生成森林图。
    1. 在 RevMan 中输入所有相关数据后，点击统计模型（根据上述确定选择 FE 或 RE）> 森林图。
    2. 查看效应量估计值、异质性统计量（I2、χ2 检验）及总体 P 值（见补充文件1中的数据11）。
  4. 在 Stata 15.0 中进行高级分析和发表偏倚评估。
    1. 将汇总的效应量及其标准误（或方差）导入 Stata。
    2. 评估发表偏倚时，使用命令运行 Egger 回归检验：metabias effect_size se_effect, egger
    3. 使用以下命令生成漏斗图：metafunnel effect_size se_effect
    4. 为评估可能缺失的研究，在Stata 15.0中使用剪补法，输入命令：metatrim effect_size se_effect, egger。该功能可估计因发表偏倚可能导致的缺失研究数量，对漏斗图进行对称填充，并重新计算合并效应量，提供校正后的估计值。
    5. 如需进行元回归或亚组分析：metareg effect_size var1 var2
  5. 进行亚组分析和敏感性分析。
    1. 在RevMan 5.3中，选择数据与分析 > 添加亚组分析，创建亚组，并根据动物种类（小鼠、大鼠）、性别（雄性、雌性、未知）、干预时长（≤7 天、>7 天）定义亚组类别。
    2. 将相应的研究数据输入各亚组，以比较合并效应量并评估异质性是否降低。进行敏感性分析时，逐项排除一项研究后重新运行荟萃分析。
  6. 进行发表偏倚评估。
    1. 对包含 ≥10 项研究的数据集进行 Egger 回归检验。
    2. 应用剪补法估计可能缺失的研究数量，并校正合并估计值。
  7. 进行时长-效应分析。
    1. 根据干预时长（天）对纳入研究进行分类。
    2. 针对每个关键结局指标（HCS、DAI、CL、BWC、MPO、TNF-α、IL-6 等），绘制时长-反应雷达图。
    3. 确定中药灌肠在中国台湾动物模型中治疗溃疡性结肠炎的最佳治疗时间窗。
      注意：所有分析完成后，将结果整理为 RevMan 森林图和 Stata 输出结果。提取的数据已输入 RevMan 5.3 以生成森林图。该软件在固定效应或随机效应模型下自动计算合并效应量（MD/SMD）和置信区间（95% CI），并为每个结局生成可视化森林图。对于 Stata，已导入效应量和标准误，完成发表偏倚评估和高级分析。接下来按照 PRISMA 指南撰写论文，确保符合伦理要求并完成偏倚检查。至此，完成针对中药灌肠治疗溃疡性结肠炎的荟萃分析方案。

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结果

从五个数据库共检索到1,146篇可能相关的文章，其中包括来自PubMed的65篇、Web of Science的92篇、EBSCO的56篇、Cochrane图书馆的0篇，以及Science Direct的933篇。在剔除91篇重复记录后，剩余1,055篇文章。

随后，对这些文章的全文进行了审阅，根据预先设定的排除标准剔除了1,035篇文章。最终，共有二十项研究符合纳入标准，并被纳入最终分析13。近年来，关于中药灌肠对溃疡性结肠炎（UC）治疗作用的研究已开展较多，所有纳入的研究均发表于2004年至2024年之间即可证明这一点。筛选过程的详细信息见图1。

纳入研究的特征
本综述共纳入20篇文章，涉及980只动物，其中实验组209只，模型组206只。动物种类包括Wistar小鼠（20%，196/980）、C57BL/6小鼠（21.2%，208/980）、昆明大鼠（14.1%，138/9...

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讨论

本研究旨在探讨复方中药灌肠剂在溃疡性结肠炎动物模型中的保护作用及其潜在机制。共纳入20篇涉及980只动物的文献。复方中药灌肠剂可改善多种溃疡性结肠炎的临床症状，包括结肠长度、疾病活动指数、结肠组织学评分、体重变化、脾脏指数及结肠损伤评分。此外，该灌肠剂还显示出对多种炎症标志物的调节作用，如白细胞介素6、肿瘤坏死因子-α、髓过氧化物酶及其他相关指标。肠道菌群指标（如拟杆菌属Bacteroides）以及肠屏障完整性标志物（如闭合蛋白occludin和紧密连接蛋白-1 zonula occludens-1）也呈现积极变化。这些结果表明，中药灌肠剂在实验性溃疡性结肠炎模型中具有显著的保护作用，其机制可能与调节炎症反应、修复肠屏障功能及调控肠道菌群有关。

亚组分析表明，物种和性别因素导致了结肠长度和白细胞介素1β（mRNA）结果的异质性，而组织学评分的异质性主要归因于物种差异。对于体重变化、白细胞介素10、白细胞介素1β蛋白水平及疾病活动指数，未发现显著的异质性来源。敏感性分析证实了多个指标结果的稳定性，逐一剔除研究的方法显示，在剔除一项研究后，白细胞介素1β的异质性显著降...

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披露

所有作者声明，他们与本工作无任何利益冲突。

致谢

本工作得到国家自然科学基金（项目编号：82341229、82174379、82174372 和 82405401）、中医优势病种治疗（临床循证能力提升）基金（编号：k2023BZ02）、江苏省高校优势学科建设工程优先发展项目（PAPD）、江苏省科技教育提升能力项目、江苏省中医药学会科研项目（编号：PDJH2026013）以及江苏省中医院高水平学术人才培育项目（编号：k2026yrc71）的资助。

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材料

本文使用的材料清单
姓名公司目录编号评论
考科蓝图书馆考科蓝图书馆https://www.cochranelibrary.com/
EBSCOEBSCO Industrieshttps://www.ebsco.com/
Endnote X9Cochrane https://support.clarivate.com/Endnote/s/
GetDataGetData Graph Digitizerhttps://getdata-graph-digitizer.com/
PROSPERO国家健康与护理研究所https://www.crd.york.ac.uk/PROSPERO/
PubMed国家医学图书馆https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/
RevManCochrane https://revman.cochrane.org/
ScienceDirectElsevierhttps://www.sciencedirect.com/
STATAStataCorphttps://www.stata.com/
Web of ScienceClarivate Analyticshttps://www.webofscience.com/

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