2009年9月2日
一种新型的微流控系统已利用被动泵送现象及用户可控的流体输送系统开发而成。鉴于其成本低、操作简便、体积精确、速度快、可重复性和自动化等优势,该微流控系统有望广泛应用于多种生物学领域。
被动泵送需要在出口处放置一个大液滴,在入口处放置一个小液滴。这将产生驱动流动所需的压力差。交替加入不同流体的液滴会导致液滴在通道中流动,最终在出口处被收集。
通过以足够高的频率输送低体积液滴,可在入口处形成稳定的流体壳层,从而实现高流速。大家好,我是来自威斯康星大学麦迪逊分校医学院生物医学工程系Justin Williams实验室的Pedro Reto。我是Brian Mogan,也来自Williams实验室。
我是Aaron Burier,来自W医学院生物医学工程系S教授的实验室。今天我们将向您展示一种在微流控装置中进行被动泵送的实验方法。在我们的实验室中,该方法用于研究微通道内的流动特性,以及生物应用中通道内的流体交换过程。
那么,让我们开始吧。首先,使用软光刻技术,采用聚甲基亚砜制作微流控装置。接着,将装置裁切下来,然后可逆地。
通过将PDMS装置按压到载玻片上并挤出其中的气泡,将其固定在载玻片上。这种可逆性连接使得装置能够多次重复使用。现在向装置中加入液体。
我们使用添加了食用色素的水。如果液体不能自行进入通道,可在入口处滴加一滴液体,并用移液枪在另一端抽吸,使液体流经通道。充满液体后,在入口处放置一小滴液体,在出口处放置一大滴液体。
通过观察入口处的小液滴收缩而出口处的液滴变大,确保液体正在流动。在继续之前,让我们先解释被动泵送的基本关系。被泵送液滴的动态行为取决于多个因素,包括通道的尺寸(高度和长度),以及放置在入口处液滴的大小。
为了更好地说明这些因素如何影响流体流动,我们将给出几个示例。首先考虑两条相似的通道,它们的宽度和高度相同,但其中一条比另一条更长。
现在我们在每个通道的入口处放置大小相同的液滴。观察到较短通道入口处的液滴比长通道的液滴更快塌陷。这是因为较长的通道具有更大的流体阻力,其内部流动更慢。
接下来,让我们探索另外两个具有相同长度和高度但宽度不同的通道。我们在每个通道的入口处放置相同的液滴,观察它们的塌陷过程。注意到较窄的通道使入口处液滴塌陷所需的时间更长了吗?
这是因为较窄的通道比宽的通道具有更大的流体阻力。最后,让我们取两个相同的通道,并在每个通道的入口处放置不同大小的液滴。注意观察较大的入口液滴比小的入口液滴需要更长的时间才能塌缩。
这是因为较小的液滴比大液滴体积更小,内部压力更高。已知较小的液滴优于较大的液滴,且已观察到这些小液滴的坍塌速度非常快,现在我们提出问题:如何以体积精确的方式将液滴递送至通道入口,从而能够开展生物学实验。
使用 Lee 公司的微量分配起始套件,组装一个或多个由 vol 阀、孔径为 0.0100 英寸的喷嘴以及软管接头组成的阀门。如图所示,此处我们将阀门通过管阀连接件与控制盒相连,这一步骤已在前文完成。然后我们连接一个尖峰电压源,即此处的这个接口。
然后连接控制电压源,接着是保持电压源。最后连接至接地端,以便在对准入口时将阀门固定到位。使用生物科学工具和微型固定装置。
这些装置可用于精确定位并固定阀门在某一位置。在实验过程中,使用三又四分之三盎司的注射器,构建一个储液系统,并将其放置在PDMS装置上方几英尺处。该储液系统可提供压力差,以驱动喷嘴工作。
将注射器针头连接到注射器上。然后将注射器针头连接至内径为1.14毫米的导管,再将该导管连接至内径为1.58毫米的导管。使用PDMS作为密封剂。
现在将内径为1.58毫米的管路连接到阀门的软管接头上。由于注射器针头与阀门之间已建立通路,向注射器储液腔中注入液体,以冲洗阀门并使管路充满水。将磁铁放置在阀门一侧,观察液体从储液腔流经阀门,并从直径0.01英寸的喷嘴流出。
我们使用计算机结合 LabVIEW 以及 Lee 公司的脉冲保持控制盒来控制该系统。为校准系统,将其中一个阀门对准培养皿或用于称重的浮舟。然后打开阀门,持续任意选定的时间,称量从喷嘴流出的水的总体积。
将该体积除以系统的总开启时间。此校准可使用户确定在任意给定时间内从喷嘴射出的水的体积。完成系统校准后,根据先前的校准结果,将喷嘴对准通道入口,使喷射出的水量恰好形成一滴液体进入通道入口,既不能过大而造成溢出,也不能过小而难以察觉。
请记得在每次实验之间去除气泡。现在我们已经了解了被动泵送的基本原理,并解释了系统的校准方法,接下来让我们看看当一切正常时用户应观察到的现象。以下视频展示的是微流控通道中的流体流动情况,从低频时的较大体积流量到高频时的较小体积流量的变化过程。
这将使用户了解先前的泵送技术以及自动流体输送系统的功能。以下视频中所使用的装置尺寸为:宽度 2.22 毫米,长度 10 毫米,高度 260 微米。入口和出口的直径分别为 1.78 毫米和 5.11 毫米。
需要两个或更多阀门才能产生如上所示的交替流动。接下来的视频展示了当前所用设备能够达到的最大流速。在此情况下,使用单个阀门来输送液体。
为了维持系统平衡,应从入口正上方直接对准阀门。注意液滴在入口处形成的液膜。这表示通过以设备被动泵送速度相等的速率向入口供水,从而维持了恒定的压力。
此外,请注意进样液滴在某一时刻会发生溢出。这很可能是由于对出样液滴造成扰动所致。通过清除进样端的溢出,系统可重新恢复平衡,流动得以继续进行。
通常情况下,我们刚刚向您展示了如何使用市售的微喷嘴建立、校准和操作被动泵送系统。在进行这些实验时,务必始终记住使用稳定的压力源,以避免气泡进入通道;了解通道几何形状、液滴尺寸之间的权衡关系,以实现所需的流体流动和交换;不要让出口处的液滴过大,否则会造成混乱或回流至入口;并保持您的PDMS装置清洁且干燥。
以上就是全部内容。感谢观看,祝您的实验顺利成功。
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已开发出一种新型微流控系统,该系统采用被动泵送和用户可控的流体输送装置。由于其成本低、操作简便且精度高,该系统适用于多种生物应用。
这种基于液滴的微流控系统通过结合被动泵送与自动液滴生成,实现了对生物应用的精确、高频液体输送。该系统支持在微通道中进行可重复的试剂定量和动态液体交换,解决了检测开发和靶点验证工作流程中的关键挑战。该技术通过提供可控的流体动力学环境,用于药物-细胞相互作用研究和机制筛选,从而提高了早期发现中的预测可靠性。
该系统通过实现精确的流体操控以进行靶点验证和检测准备,将基于液滴的递送与被动泵送相结合,实现连续的微流控操作,从而整合到早期发现工作流程中。