微流体探针：操作及其在局部表面处理中的应用

本实验流程展示了如何组装和使用微流控探针（MFP）。MFP的微流控组件包括气密性注射器、玻璃毛细管、Upchurch公司的微紧固接头以及MFP探针头。本视频将介绍组装和对准过程中的关键步骤。

组装完成后，MFP 可与多种基底和试剂联用，用于表面图案化与加工。大家好，我是 Cecil Perot。我是加拿大蒙特利尔麦吉尔大学生物医学工程系 David Yaker 实验室的一名博士后研究员。

大家好，我是Mohammad Kasime，我在麦吉尔大学生物医学工程系David Y的实验室攻读博士学位。大家好，我是David Yoker。

我是生物医学工程系的一名助理教授，今天很高兴向您介绍微流控探针的演示。我们将向您展示微流控探针的操作与使用流程。在我们的实验室中，该流程用于表面处理与图案化。

现在开始本实验方案。使用塑料注射器和针头将试剂注入气密型玻璃注射器中，并确保其中无气泡存在。通常，我们使用1至10微升的注射器进行进样，而用体积大5至10倍的注射器进行抽吸。

接下来，使用低死体积的纳米紧固接头将注射器连接至毛细管。然后在显微镜下检查毛细管是否充满液体并观察是否存在气泡。在连接毛细管之前，需预先用缓冲液充满MFP芯片，以防止气泡滞留。

最后，将毛细管插入微加工制成的探头头部的PDMS连接部件中。多功能探针（MFP）组装完成后，即可开始进行设置。将基底插入自制的夹持装置中。

固定在显微镜载物台上。微流体探针（MFP）与基底之间的间隙对于表面图案化过程至关重要。通过微米调节螺钉形成的三点支撑，以微米级精度调节水平对准。

这是必要的，因为基底需要在MFP下方扫描进行处理。开始设置MFP时，先将探针头夹紧在探针支架中，并安装在倒置显微镜上方的探针台上。然后将注射器放入高精度注射泵中。

接下来，使用一对测角仪，通过观察牛顿环（也称为干涉条纹）来调整微针探针（MFP）的台面与基底的对准情况。当MFP与基底接触时会出现这些条纹，接触点及条纹的频率可反映倾斜程度。当MFP与表面完全对准时，会形成一个覆盖整个表面的单一干涉环。

该步骤还可用于校准微流体探针（MFP）与基底之间的间距。完成MFP的设置后，我们即可进入MFP的操作阶段。在MFP运行过程中， dispensing操作由LabVIEW软件控制。

通过肉眼和CCD相机观察设备运行情况。在开始正式抽吸之前，先注入少量液体，以确保抽吸注射器方向正确且无气泡。然后将MFP浸入缓冲液中。

现在可以开始注入液体，同时监测微珠的流动限制情况。注入与吸液的比例根据试剂在周围缓冲液中的扩散性以及所需的几何流动模式，从1:3到1:10不等。最后，该探针现在可用于多种应用。

此处所示的表面图案是通过MFP在链霉亲和素包被的水凝胶玻璃载片上使用荧光素标记的生物素实现的。注射流速为每秒一纳升，抽吸流速为每秒十纳升，分别使用10微升和50微升的注射器。表面与探针之间的间距为五微米。

微流探针（MFP）还可用于细胞和组织的局部染色与处理。流动限制可防止试剂扩散，从而实现对细胞的精确化学染色。如下图所示，使用浓度为100微克/毫升的dai对一层成纤维细胞进行了染色。

我们已经向您展示了如何操作微流控探针。在进行此操作时，您必须确保系统中避免产生任何气泡，并确保微流控探针表面与基底平行。就这些。

感谢观看，祝您的实验顺利。