Name: 克里斯托弗休斯:在体外血管生成的研究模型（面试） (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-04-28T00:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 29 s
Description: 了解体外血管生成研究模型，探索成纤维细胞分泌的可溶性因子如何支持内皮细胞形成复杂血管结构。该优化培养系统为血管疾病治疗策略提供重要见解。

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作者无任何利益冲突需要披露。

christopher hughes：血管生成研究的体外模型（访谈）

Christopher Hughes:  An in vitro model for the Study of Angiogenesis (Interview)

Christopher C.W. Hughes 描述了其培养系统在体外研究血管生成中的应用价值。他解释了成纤维细胞的重要性，这些细胞分泌一种关键但尚未明确的可溶性因子，能够促使内皮细胞在培养中形成具有分支、正常管腔并能进行吻合的血管结构。

Christopher C.W. Hughes 描述了其培养系统在体外研究血管生成中的应用价值。他解释了成纤维细胞的重要性，这些细胞分泌一种关键但尚未明确的可溶性因子，能够使内皮细胞在培养中形成具有分支、正常管腔并能进行吻合的血管结构。

Christopher Hughes：血管生成研究的体外模型（访谈）

Christopher C.W. Hughes 描述了其培养系统在体外研究血管生成中的应用价值。他解释了成纤维细胞的重要性，这些细胞……

您好，我叫Dr.Christopher Hughes。我是加州大学欧文分校的教授，我的实验室致力于研究血管生成。我们尤其关注调控血管生成过程的基因。我们基于Nelson的研究优化了一种体外实验方法，在该实验中可以观察血管生成过程中发生的所有不同步骤：我们将内皮细胞包被在Tedex微珠（即微小珠粒）上，然后将这些微珠嵌入纤维蛋白凝胶中，并添加生长因子。在数天内，内皮细胞从微珠上出芽，迁移、排列、增殖，形成管状结构，产生分支并建立吻合。因此，大约在第10天时，我们在体外培养中即可获得一个完整的类似毛细血管的网络结构。然而，体内和血管生成实验存在一些问题，例如在小鼠中进行的实验，其难点在于对系统的操控非常困难。当过程发生在动物体内时，很难进行可视化观察，你实际上无法看到血管生成的发生过程。而如果我们采用体外培养系统，则可以非常方便地对内皮细胞进行遗传学操作，开启或关闭特定基因，并研究这些操作对出芽型血管生成的影响。而在整个动物体内实现这一点要困难得多。你必须进行基因敲除或基因敲入。因此，这两者是主要优势。它易于操作，也易于观察。因此多年来，人们开发出了多种不同的体外血管生成检测方法，每种方法都有其各自的优缺点。其中一种广为人知的方法是基质凝胶检测法，即将内皮细胞接种在一种名为Matrigel的细胞外基质上。而问题在于，内皮细胞会形成类似管状的结构，但始终无法形成真正具有管腔的血管。你不会观察到出芽现象，也看不到吻合结构。也有胶原凝胶模型，这些模型可能效果较好。在这些情况下，你不会看到内皮细胞的增殖，也通常不会观察到吻合现象。我们所开发的纤维蛋白凝胶实验，是基于 Nelson Kar 在二十世纪九十年代中期发表的一个模型。现在我们已对此进行了显著改进，能够观察到血管生成的所有阶段。我们可以看到最初的出芽、细胞迁移，观察到细胞增殖、管腔形成，出现分支，最终实现吻合，在体外形成完整的血管网络。因此，我们认为该检测方法确实是目前可用于观察血管生成各个不同阶段的最佳体外体系。这种体外检测的另一个优势在于，我们可以进行激光显微切割。通过离心收集培养物使其变得非常扁平，然后使用激光显微切割显微镜，能够精确分离单个细胞，而我们尤其关注的是顶端细胞。因此，我们将这些区域切割出来，观察基因表达，特别是顶端细胞与主干细胞之间的差异，即实际形成管腔的细胞。我们的假设是，这两群细胞之间存在差异性基因表达。我们可以对此进行分析，而在体内系统中几乎不可能实现这一目标。因此，我们认为这是采用该体外实验方法的另一个主要优势。正如我之前提到的，Nelson Recon 在早期研究中使用了微血管内皮细胞。目前普遍认为，微血管内皮细胞是此类实验的理想选择，因为在体内正是微血管内皮细胞负责形成新的血管。我们决定尝试使用血管内皮细胞来完成这项工作。这些是人脐静脉内皮细胞，选择它们出于几个原因，其中之一是这些

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克里斯托弗休斯:在体外血管生成的研究模型（面试）

本视频展示了体外血管生成实验的方案，该实验可重现血管生成的多个阶段。展示了出芽、管腔形成、分支和吻合——血管生成的关键特征——的时间推移图像。...

优化的纤维蛋白凝胶珠管形成实验用于血管生成研究

新生小鼠视网膜为血管生成提供了一个特征明确的生理学模型，可在体内环境中研究不同基因或药物对血管生成的调控作用。准确可视化血管丛的免疫荧光染色对于此类研究的成功至关重要。...

对新生小鼠视网膜进行整体免疫荧光染色以研究血管生成 在体内的

本方案描述了在小鼠中建立的角膜微囊实验方法。...

角膜微囊实验：小鼠眼部血管生成模型

我们描述了一种显微外科手术方法，用于构建动静脉（AV）回路，作为血管化研究的模型 体内...

小型动物模型中的动静脉环（AV环）用于研究血管生成与带血管组织工程

本文介绍了一种全面的评估流程 体外...

全面评估的综合流程 体外 使用球体出芽实验评估假定性血管母细胞瘤新生血管形成能力

冠状血管生成的体外模型可用于揭示冠状血管生成的细胞和分子机制。静脉窦和心内膜组织的体外植块培养在VEGF-A刺激下表现出显著的生长，并显示出与体内相似的COUP-TFII表达模式。...

冠状动脉血管生成的体外模型

该实验利用小鼠胚胎干细胞分化形成的类胚体，将其培养在三维胶原凝胶中，以在体外分析调控出芽型血管生成的生物学过程。in...

体外 利用小鼠胚胎干细胞进行血管生成的三维出芽实验，用于血管疾病建模与药物筛选

本文所述方法可用于评估试剂对血管生成或血管通透性的影响 体内...

已修改 体内 用于血管生成研究的基质凝胶栓塞实验

本方案介绍了一种具有生理相关性的“器官芯片”肿瘤模型，可用于高效开展基础性和转化性人类癌症研究，推动药物筛选、疾病建模及个体化医学的发展，并详细描述了该模型的加载、维持和评估操作流程。...

建立一种用于癌症研究的生理性人源血管化微肿瘤模型

本研究介绍了二维（2D）划痕伤口迁移实验和三维（3D）球状体出芽实验，以及相应的下游分析方法，包括RNA提取和免疫细胞化学，这些实验是研究血管生成的适宜方法 体外.

利用划痕伤口迁移实验和球体出芽实验在功能和分子水平上研究血管生成

了解体外血管生成研究模型，探索成纤维细胞分泌的可溶性因子如何支持内皮细胞形成复杂血管结构。该优化培养系统为血管疾病治疗策略提供重要见解。

Christopher Hughes：血管生成研究的体外模型（访谈）

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