原位主动脉移植：一种研究慢性血管病变发生的大鼠模型

本实验的总体目标是建立一种准确且易于实施的模型和方法，用于研究移植性血管病变的发展过程。该目标通过采用PVG至CI品系组合来实现。实验的第二步是获取供体主动脉。

该操作的第三步是准备受体。操作的最后一步是将供体的主动脉与受体的主动脉进行吻合。最终，可通过病理组织学方法获得显示新生内膜形成的结果。

大家好，我是索尼娅·施韦费尔（Sonya Schwefel），德国汉堡大学心脏中心Thet Eye实验室的移植免疫学教授。我是马尼什·杜博夫（Manish Duboff），同样来自TS Eye实验室。

我们的实验室致力于移植免疫学研究。在本视频中，我们将向您介绍原位主动脉移植模型，这是一种简便且有效的模型，用于研究移植血管病变在小鼠中的发生发展。我们实验室利用该手术方法探究心血管移植后的慢性排斥反应问题。

在原位主动脉移植模型中，主动脉可方便地进行组织学评估。此外，PVG至CI的模型特别适用于移植性血管病变研究，因为急性血管排斥反应不是主要的混杂因素，且血管病变的发展过程与临床观察结果相似。

下面我们开始。本原位主动脉移植手术所用的供体为一只体重约250至300克的PVG大鼠。动物麻醉后，剃除其腹部和胸部的毛发。

将大鼠仰卧放置，并在其口鼻部覆盖面罩。为维持麻醉状态，先用聚维酮碘广泛消毒腹部和胸部区域，随后使用80%乙醇。接着，通过轻捏大鼠后肢足部检查其反射反应。

确认其已充分麻醉后，通过打开腹腔并在腹主动脉上剪开一个小孔来放血处死大鼠。小心打开胸腔以暴露胸降主动脉。

从周围组织（如脂肪、神经和食管）中分离胸主动脉。使用手术剪在不损伤主动脉组织的情况下，截取一段1.5厘米长的主动脉。用冷生理盐水充分灌洗主动脉移植物，并将移植物置于4°C保存。

该原位主动脉移植手术的受体为一只体重约250至300克的ACI大鼠。开始手术前，剃除麻醉大鼠腹部区域的毛发，并涂抹眼膏以防止麻醉期间眼睛干涩。将大鼠仰卧位放置，并在其口鼻部覆盖面罩以维持麻醉状态。

接着，使用聚维酮碘对腹部区域进行消毒，随后使用80%乙醇。通过夹住后肢脚部以确认大鼠已充分麻醉后，沿腹壁正中线做切口，依次切开皮肤和肌肉，打开腹腔。共两步。

打开腹腔后，将肠管置于盛有生理盐水的手套中。将手套折叠包裹肠管，以防止水分流失。清除覆盖在腹主动脉上的脂肪组织。

从肾下区域开始解剖腹主动脉至其分叉处，注意避免损伤血管的分支。如有必要，在解剖腹主动脉后结扎其分支。首先，在腹主动脉的肾下段使用显微外科夹闭合血管，以阻断血流。

接下来，在主动脉分叉处附近放置第二个止血钳。在血流阻断后，切除一段较短的主动脉。然后取用先前保存在冰上0.9%生理盐水中的供体主动脉移植物。

将其修剪至适当长度，并置于主动脉的缺损处。使用连续的8-0聚丙烯缝线将供体主动脉与受体主动脉吻合，从近端端对端吻合处开始缝合。完成远端端对端吻合后，小心打开远端血管夹。

接下来，小心打开颅部夹具。此时应在主动脉的远端可见搏动。现在将肠管复位至腹腔内，并用预热的无菌生理盐水冲洗腹腔。

使用6-0普理灵缝线连续缝合腹壁的肌层。然后在大鼠仍处于麻醉状态下，使用5-0普理灵缝线连续缝合皮肤。皮下注射每千克4至5毫克的卡洛芬。

将动物放回笼中。移植后，在饮水中加入甲巯咪唑作为镇痛药物，持续三天。

120天后的组织病理学结果将在我们的组织学显微镜上展示。图片将清晰显示移植血管病变的发展情况。计算机动画将重点突出管腔狭窄的形成过程。

我们刚刚向您展示了如何在大鼠中进行主动脉异位移植。我们还通过组织病理学证实了移植后120天成功诱导出移植血管病变。该方法可用于研究药物对慢性同种异体移植物血管病变早期作用的影响。