在实验室老鼠研究求可卡因电击诱导恢复原状的程序

该视频演示了一种系统研究压力与寻求可卡因复发之间关系的程序。在实验室大鼠中，首先训练大鼠在 12 小时光明黑暗周期的黑暗或活跃阶段进行多次每日多次杠杆按压反应，从而静脉注射可卡因。接下来，通过拒绝反应或有强化，在多个会话中消除可卡因强化杠杆按压反应。

然后，通过在接触先前的可卡因增强杠杆之前立即将动物暴露于间歇性足部电击来恢复熄灭的杠杆按压行为。尽管足部休克诱导恢复可卡因寻求是几个研究小组已经可靠地实现的效果，但它可能对某些寄生金属变量敏感。我们将描述的协议反映了我们优化这些参数的成功努力，以实现可靠和稳健的足部电击诱导的大鼠可卡因寻找恢复。

我们今天在这里描述的方法及其变体可用于研究药物成瘾领域的关键问题，特别是，它可用于研究介导压力与吸毒复发之间关系的基本行为和神经生物学机制。用于研究足部休克诱导的可卡因寻求恢复的设备包括一组标准作室，每个作室都包含在一个消声外壳内。所有设备均由 Med Associates Incorporated 提供。

每个作室都配有两个可伸缩的杠杆，这两个杠杆都高出不锈钢杆地板 6.5 厘米。白色刺激灯位于一个控制杆的正上方。所谓的主动杠杆和该杠杆上的响应导致同时点亮刺激光，并激活位于上端腔室外架上的输液泵。

在消声外壳内，另一个杠杆，即所谓的非活动杠杆，在腔室中保持伸展。在所有实验程序中，对这个杠杆做出反应是没有后果的。最后，每个腔室都配备了通过扰乱器将恒流、间歇和可逃脱的电脚冲击输送到钢棒地板。

所有实验条件以及数据记录和整合都是通过测试室和中央计算机之间的接口完成的。作 mid associates 软件。在每次每日会议之前（发生在光暗周期的黑暗或活跃阶段），在饲养室中称重大鼠，然后将它们转移到作室。

在第一次可卡因自我给药前 24 小时，让大鼠在一次两小时的疗程中适应作室。在此训练期间，活动杆缩回，非活动杆在日常训练开始时伸出，将弹簧和管道组件连接到颅骨安装套管，并将大鼠放入作室。套管连接到一根钢片导管，该导管已手术植入右颈静脉，以允许静脉内给药。

让大鼠在每天 3 小时的疗程中自行服用可卡因，总共 8 到 10 天。在每次训练之前，要有 5 分钟的适应期，在此期间，将动物放置在作室中，同时将主动杠杆缩回。要开始训练，请将主动杆伸入腔室并点亮刺激灯 30 秒。

此外，此时激活室内灯，并使其在整个会话期间保持亮起。这些事件共同标志着会议期间可卡因的可用性。通过以固定比例输注 3 秒的可卡因来加强对主动杠杆的反应，与激活输注、泵和药物输送同时进行的强化计划是主动杠杆上方刺激光的第 22 次激活。

第 22 灯表示对应于一个超时时间，在此期间会记录额外的主动杠杆响应，但不会得到加强。在每 3 小时的疗程中，动物最多允许输注 50 次，以减少过量服用的可能性。在每次每日会议结束时，用 0.2 至 0.3 毫升肝素右旋溶液冲洗大鼠的导管，然后将它们放回笼子中。

在最后一次可卡因自我给药后，将大鼠留在家笼中至少 5 到 7 天。将大鼠转移到作室进行与训练条件一致的灭绝训练。在每天的灭绝训练之前，有 5 分钟的适应期，在此期间，将动物放置在作室中，同时活动杠杆缩回。

然后给大鼠四次 60 分钟的灭绝疗程，间隔 30 分钟。每个 60 分钟的训练由在整个训练期间训练开始时发生的相同事件启动。保持训练期间存在的所有条件，除了在每 60 分钟的消退训练间隔 30 分钟的间隔内，不再通过可卡因输注加强主动杠杆反应。

在最后 60 分钟的会话结束时收回主动杠杆并熄灭室内灯。将老鼠放回它们的家笼中。这些步骤将连续三天重复。

将大鼠转移到作室，就像在灭绝阶段所做的那样，符合训练和灭绝的条件。提供 5 分钟的适应期，在此期间将大鼠放置在作室中，同时活动杠杆缩回。然后给大鼠两次 60 分钟的消退疗程，间隔 30 分钟，间隔与消退阶段的间隔相同。

如果在第二个 60 分钟的疗程后，先前活动的杠杆的反应总数少于 15 个，请在再进行 30 分钟的间隔后对动物进行恢复测试，在此期间进行足部电击或假足部电击。在第二次 60 分钟的灭绝疗程后 10 分钟开始，让动物在作腔内接受 20 分钟的间歇性足部电击、应激或假足部电击。在主动杠杆缩回以及房屋和刺激灯熄灭期间进行足部电击。

足部电击疗程结束后，立即延长主动杠杆，并允许大鼠在消退条件下进行杠杆按压。这段时间定义为恢复测试会话，持续时间通常为 1 到 3 小时。在测试会话结束时，将大鼠从腔室中取出并将其放回其家笼中。

现在，我们将展示一些具有代表性的结果。此处显示的是典型的可卡因自我给药训练曲线，其中包括输注总数以及主动和非主动压肝的总数。大鼠通常在一到三个疗程内获得可卡因自我给药，一旦行为确立，在灭绝的第一天，在随后的疗程中保持稳定的药物摄入率。

当第一次没有强化反应时，主动杠杆上的反应总数最初非常高，但在灭绝第二天和第三天的四次消退过程中逐渐减少。可能会观察到一些反应的恢复，但是，反应通常比前一天灭绝开始时要少，并且灭绝通常在当天的四个时段中进展得更快。主动杠杆上的非加强响应。

在间歇性足部休克 20 分钟后，压力会引起相对于非活动杠杆对先前活动的杠杆的反应增加。足部休克也会导致相对于观察到的反应增加。在使用假足粉笔的情况下 一旦掌握，所描述的程序可以在大约六周内完成。

根据我们的经验，当程序由训练有素的人系统地执行时，成功是最好的。我们在这里描述的程序可以很容易地适应针对特定神经元底物的各种药理学或神经化学作。通过添加此类作，足部电击感应和陈述程序可以作为描述因压力而吸毒、消退和复发的神经生物学的有力工具。