利用微球递送系统评估生物打印骨骼肌结构中的神经突生长

获取生物打印的骨骼肌结构。

这些结构包含嵌入了肌纤维和微球的纤维蛋白水凝胶柱。

微球是一种多孔聚合物结构，包裹着神经营养因子。

取自鸡胚胎分离的背根神经节。

将一个神经节放置于每个构建物上并进行孵育。

神经营养因子以可控的生理浓度从微球中释放，促进神经元突起（称为神经突）的生长。

加入固定剂以固定构建物。

用缓冲液洗涤，并加入封闭液以防止非特异性抗体结合。

与一抗孵育，一抗可特异性结合神经突。

用缓冲液冲洗以去除未结合的抗体。

加入可与一抗结合的荧光标记二抗。

用缓冲液洗涤以去除过量的抗体。

使用含核染料的封片剂和盖玻片封片。

在共聚焦显微镜下观察神经突的生长。