评估测试化合物在大鼠胚胎神经元中对抗α-突触核蛋白毒性的神经保护作用

从表达突变型α-突触核蛋白的胚胎大鼠中脑原代培养物开始，其中含有多巴胺能神经元。

将处理孔中的培养基更换为含有测试化合物的新鲜培养基，对照孔中的培养基更换为不含化合物的普通培养基，然后进行孵育。

在对照组中，α-突触核蛋白在多巴胺能神经元中形成毒性聚集物，导致神经突回缩，并最终引发神经元死亡。

在治疗过程中，测试化合物与α-突触核蛋白相互作用，抑制其聚集，保护神经突结构，并提供神经保护作用。

固定并透化细胞，然后封闭非特异性结合位点。

使用一抗孵育以标记所有神经元，并对多巴胺能神经元进行额外标记。

洗涤细胞，并加入针对一抗的荧光标记二抗。

使用倒置荧光显微镜对不同标记的多巴胺能神经元进行计数，然后切换至共聚焦显微镜以测量神经突长度。

与对照组相比，治疗组中具有完整神经突的多巴胺能神经元数量更多，证实了受试化合物具有神经保护潜力。