向清醒雌性大鼠脑内注射河豚毒素以抑制排卵

0 次观看 • 3:20 分钟 • August 29th, 2025

取装有蒸馏水的显微注射器,并将其连接到与显微注射仪相连的管路上。

按压微量注射器的推杆,直至显微注射针尖端出现水滴,然后稍微回抽推杆,在管路中形成一个气泡。

放置浸有毒素灭活物质的垫片,并在其上方覆盖石蜡膜。

用移液器将河豚毒素滴加到石蜡膜上,并吸入显微注射器中。

将微量注射器安装到微注射泵上,推进活塞直至微注射针尖端出现液滴,弃去液滴。

握住一只清醒的雌性大鼠,其下丘脑已植入导管套管。

将微量注射器插入导管套管中。

进行显微注射。

河豚毒素可阻断下丘脑神经元中的钠通道,从而抑制神经元放电。

这种抑制作用会抑制分泌促性腺激素释放激素的神经元,从而抑制排卵。

保持微量注射器原位以防止回流。然后将其取出,并重新盖上导向套管的帽盖。

设置微量注射泵的输注速率和总注射时间。然后用两支10微升的Hamilton注射器吸取无菌蒸馏水,并将一段PTFE管插入每个微量注射器的管路连接件中,确保管路长度不会限制大鼠的活动。

将管路连接至汉密尔顿注射器,推动针栓直至微注射器尖端出现水滴。回拉针栓,在管路中形成一个2厘米长的空气间隙。放置一块浸有灭活物质的垫片,并在其上方覆盖一张2厘米×2厘米的石蜡膜。用移液器吸取足量的河豚毒素(TTX),使其充满注射针头及膜上方管路的1厘米长度部分。

通过轻轻回抽活塞来吸收河豚毒素(TTX)液滴。将注射器安装到微量注射泵上,并使用其控制装置调节活塞,直至每个微注射器尖端均可见一滴TTX。仅使用术后表现出至少三个连续动情周期的大鼠,并需考虑其动情周期所处阶段及一天中的具体时间。

牢固地抓住大鼠。取下套管的帽盖和堵塞物。将微量注射器插入导向套管中,并将动物放回笼内。打开泵,等待微量注射完成。注射完毕后,保持微量注射器在原位额外两分钟,以避免溶液反流,然后将其取出。重新装入堵塞物。盖上帽盖,并将动物送回动物饲养室。

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