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神经科学
0 次观看 • 2:30 分钟 • August 29th, 2025
将一只已麻醉的新生大鼠置于加热垫上，暴露其坐骨神经。
提起神经的远端部位，注射含有染料的质粒DNA溶液。该染料有助于追踪质粒的递送过程。
将镊子型电极放置在神经周围，保持电极臂之间有微小间隙。
向此间隙中注入生理盐水以实现电流导通。
施加一个围绕神经纤维的电脉冲，使施万细胞的细胞膜形成瞬时孔隙。然后反转电极位置并施加第二次电脉冲，以促进质粒DNA通过这些孔隙进入细胞。
电穿孔后，细胞膜重新封闭并将质粒截留在内。
清洁手术部位，缝合皮肤切口，进行消毒，并让大鼠恢复。
随后，质粒DNA转移至细胞核并整合到施万细胞的DNA中，从而实现成功的基因转移。
使用针轻轻牵拉神经远端，以抬起暴露的神经。将玻璃微移液管插入神经远端部位，并施加轻微正压注入DNA溶液，直至神经呈现绿色。接着，将镊子型铂电极放置在距离神经约一到两毫米的位置。
用0.9%氯化钠溶液填充电极与神经之间的间隙。使用电穿孔仪向注射部位施加电脉冲。第一组脉冲结束后，反转电极并施加另一组脉冲。
之后，用0.9%氯化钠溶液清洁电穿孔部位。电穿孔完成后，使用氰基丙烯酸酯胶水关闭切口。然后，用聚维酮碘清洁伤口。
取下动物的面罩，并将其置于电热保温板上至少一小时，以确保从麻醉中完全恢复