在大鼠模型中注射自组装肽和神经前体细胞进行脊髓修复

0 次观看4:18 分钟 • August 29th, 2025

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颈脊髓损伤的麻醉大鼠固定到立体定向框架上。

病变部位由受损的轴突和充满液体的空腔组成,周围环绕着浸润的免疫细胞、神经胶质细胞和成纤维细胞,阻碍轴突再生和功能恢复。

脊柱上方的皮肤进行消毒和切开。解剖肌肉以暴露硬脑膜,即脊髓的外层。

切除

硬脑膜的疤痕组织,露出脊髓病变部位。

含有自组装肽 (SAP) 的微量注射器放置在病灶上方,并

将它们注射到中线一侧的病灶核心中。

另一侧重复注射以均匀分布。

接下来,在病变周围部位注射神经前体细胞(NPC),避开发炎的病变核心,以提高鼻咽癌存活率。

注射

后,SAP 会自组装成一个支架,该支架模仿细胞外基质并桥接空腔。支架支持鼻咽癌存活和分化为神经细胞以进行组织重塑。

髓损伤后 14 天进行注射。在开始手术之前,在无菌水中制备浓度为每体积1%重量的SAP,并用溶液填充连接到汉密尔顿注射器的100微米玻璃毛细管。

汉密尔顿注射器连接到立体定位框架上。麻醉大鼠后,将头部固定在立体定向框架中,并像以前一样用聚维酮碘和70%酒精对手术部位进行消毒。再次,打开皮肤后,仔细解剖一对椎体肌肉并插入牵开器。

使用 15 号手术刀从硬脑膜上去除疤痕组织并重新暴露病变部位。然后用锋利的针尖小心地打开硬脑膜。最后,立体定向地将玻璃毛细管插入受创伤的脊髓两毫米深并注射 SAP。

注射SAP后,让毛细血管在注射部位停留一分钟,然后取出,以允许组织拉伸以容纳注射的溶液。然后在下一个部位重复注射。在这里,从成年DS红鼠的室旁区分离出鼻咽癌,并按照先前发表的程序进行培养。

就在显微注射之前,将生长培养基中的NPC稀释至每微升50倍10至第三个活细胞的浓度,用于细胞移植,并加载到汉密尔顿注射器上的玻璃毛细管中。NPC 在注射 SAP 后立即注射。为此,将汉密尔顿注射器的玻璃毛细管插入损伤部位的 0.2 毫米头部和脊髓背表面下方 1.5 毫米处。

以每分钟约0.5微升的速度注射两微升细胞悬液。第一次注射完成后,让毛细血管像以前一样在脊髓中停留一分钟。然后缩回毛细血管,将其移动到相邻部位并重复注射过程。等待一分钟后,像以前一样,缩回毛细血管并将其移动到受伤部位两毫米。

在此位置进行两次两微升注射。

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最后更新:1 八月 2026