通过小脑延髓池注射在小鼠模型中实现靶向药物递送

以一只表达荧光标记基因且固定于立体定位仪中的麻醉小鼠开始实验。

将头部向下倾斜，以便更方便地进入小脑延髓池，即位于小脑与脑干之间、充满脑脊液（CSF）的腔隙。

涂抹眼药膏，剃除颈部毛发，并进行消毒。

做正中切口以暴露覆盖小脑延髓池的膜。

使用分离器牵拉组织，以暴露小脑延髓池。

取一支装有诱导药物并配有弯针头的微量注射器。

插入针头并穿刺膜以到达小脑延髓池。

缓慢注射药物，以确保在脑脊液中均匀分散。

药物进入脑表面细胞，触发标记基因的表达，产生红色荧光蛋白。

脑脊液流动会阻碍药物向脑部更深层区域的扩散。

荧光成像证实了表面细胞的选择性标记，表明药物可靶向递送至脑脊液暴露区域。

在异氟烷麻醉舱中对动物进行麻醉。

然后调整小鼠头部固定器，使咬合器与手术台表面呈约30度角，并将动物头部固定在固定器上。为了更好地接触小脑延髓池，将动物身体置于与手术台表面约30度的位置，头部向下倾斜，使其与身体其余部分形成约120度的角度，并伸展颈部后侧以方便进入小脑延髓池。动物正确放置后，涂抹眼用软膏，剃除其颈部后方的毛发，并使用酒精棉片和碘伏溶液对该区域进行消毒。

使用手术剪从枕骨水平开始，沿中线向后作一纵向切口。用尖头镊子从中线向侧方轻轻牵拉，分离浅层结缔组织和颈部肌肉，从而暴露覆盖在小脑延髓池上方的硬脑膜。放置小型手术牵开器，以便在整个操作过程中清晰显露小脑延髓池。

确定枕骨的尾端，将预先弯曲的针头立即插入其下方。一旦刺破硬脑膜，轻柔地向上并沿动物身体方向平行拉动注射器，使弯曲的针尖进一步滑入表面下方，以确保更佳的稳定性。缓慢注射化合物，以避免干扰脑脊液的正常流动。

注射后，让针头在体内停留一分钟，然后借助尖头镊子小心将其取出。