神经细胞悬液立体定向移植到创伤性脑损伤小鼠体内

首先将预装注射器连接到立体定位注射泵。

器含有人诱导的多能干细胞来源的神经细胞悬液。

将针头放置在患有创伤性脑损伤的小鼠手术暴露的脑皮层上方。

放下注射器，用针尖接触硬脑膜，调整坐标以瞄准受伤部位，然后稍微缩回。现在，

创建一个小切口，为针头建立一个入口点。

接下来，降低柱塞以允许细胞悬液流动。

放下针头，穿透大脑，到达深层皮层的灰质-白质边界。

最后，慢慢注入细胞悬液，同时用生理盐水冲洗手术部位以保持水合作用。

完成后，拔出针头，重新冲洗，然后闭合切口。

，移植的细胞成熟，恢复神经回路，修复脑损伤。

颅骨切除术后大约 24 小时，将鼠标放回立体定位框架中。

用开窗手术单覆盖小鼠。用无菌盐水灌洗切口部位以清洁该部位并松开缝线。用70%乙醇浸湿的棉签轻轻消毒切口部位，用细镊子和眼科剪刀去除缝线。

然后用大量的无菌盐水冲洗手术和颅骨切除部位。在细胞培养生物安全罩中，轻轻旋转或敲击细胞管以确保细胞悬液均匀。使用微量移液器通过柱塞端将大约 7.5 微升细胞加载到 Hamilton 注射器中。

120 度角握住注射器，柱塞端朝下，插入柱塞，注意不要在悬架和柱塞尖端之间引入气泡。将垫圈组件连接到移液器针头上，然后将针头连接到注射器上。推动柱塞将细胞悬液移入移液器针头中，并将注射器连接到立体定位注射泵。

推进柱塞以确保注射泵组件正常工作，并将针头移入注射坐标。将针尖与 bregma 对齐，并将 x 和 y 坐标设置为零。将针尖越过颅骨切除术移动到前辙的外侧两毫米和后方负一毫米，并将针尖接触硬脑膜表面。

抬起针头，然后在针头接触的位置的硬脑膜上做一个小切口。将立体定位坐标设置为 z 等于零，然后推动柱塞以确认细胞悬液充分流动，然后再将针头引入大脑。将针头引入大脑，深度等于负 1.4 毫米，将移植物放置在深层皮层的灰质/白质边界处。

启动注射泵，在 15 分钟内注入细胞悬液。使用长工作距离显微镜监测细胞悬液流出，在注射过程中用无菌生理盐水冲洗手术部位以保持组织水合作用。当所有细胞都被输送后，慢慢拔出移植针并用额外的生理盐水冲洗手术部位，然后用新缝合线闭合切口。

然后按照演示提供术后护理。