利用透射电子显微镜观察蓝细菌胞外囊泡

0 次观看2:01 分钟 • August 29th, 2025

将覆有聚乙烯醇缩甲醛树脂涂层的透射电子显微镜(TEM)载网置于干净的塑料薄膜上。

将浓缩且纯化的细胞外囊泡(EVs)悬液——一种纳米级膜结合颗粒——加入载网上。

这些细胞外囊泡由蓝细菌分泌,并在其膜内携带大分子物质。

孵育载网,使细胞外囊泡吸附到其树脂涂层表面。

用干净的滤纸接触网格边缘,吸去多余的悬液。

将载网漂浮于醋酸铀酰上,以染色附着的囊泡。

醋酸铀酰包围着囊泡,形成深色轮廓,从而在成像过程中增强对比度。

移去网格,并用滤纸吸去多余的染色剂。

用超纯水冲洗载网,以去除任何残留的染色剂。重复冲洗一次,然后让其自然晾干。

最后,使用透射电子显微镜(TEM)观察EVs,以评估其形态、大小和纯度。

小心加入5微升囊泡溶液,静置5分钟。用干净的滤纸边缘接触载网边缘,吸去样品。

用移液器吸取 20 至 50 微升 2% 醋酸铀酰溶液,滴加到覆盖有塑料膜的平坦表面上。然后将载网漂浮于液滴表面染色 2 分钟。用滤纸吸去醋酸铀酰溶液,再将载网在超纯水液滴上短暂漂浮以洗涤。