利用不连续密度梯度根据荚膜含量分离细菌

从含有预设非连续密度梯度的离心管开始，该梯度使用涂覆有聚乙烯吡咯烷酮的无毒胶体二氧化硅颗粒制备而成。

该梯度由三层非重叠的液层组成，从上到下按密度递增的顺序排列。

取一种细菌转座子突变文库，即含有随机转座子诱导突变的细菌菌株混合悬液。

这些突变中的一部分会破坏调控荚膜的基因，荚膜是包围在细菌细胞壁外的一层多糖结构，导致菌株的荚膜含量各不相同。

将细菌文库缓慢加至梯度顶部，避免混合界面。

以中等速度离心试管。

该梯度可根据细菌的荚膜含量促进其差异性迁移。

由于水合多糖层的存在，高荚膜菌株密度较低，主要位于上层。

荚膜较弱的菌株沉降在中间，无荚膜且密度较大的菌株迁移至底部。

分离的细菌菌株已准备好进行下游分析。

将 600 微升制备好的细胞小心地加至离心管中梯度液的顶部。然后将离心管放入试管适配器中，并称重以确保平衡。随后将装有离心管的适配器放入台式离心机的固定角转子中，在 3,000 g 条件下离心 30 分钟。

最后，离心结束后小心取出离心管，放入试管架中，并拍摄结果照片。