0 次观看 • 3:26 分钟 • August 29th, 2025
Magnetospirillum 是一类在低氧环境中生长良好的运动性细菌。
它们能够产生作为磁偶极子的磁性纳米晶体,帮助其在地磁场中定向移动,以寻找最佳的氧气浓度。
培养Magnetospirillum时,取无氧液体培养基,注入可控体积的氧气以建立微需氧条件,加入细菌后进行培养。
随着时间推移,浊度增加,表明细菌生长。
制备半固体培养基时,应使用含有粉红色氧指示剂的培养基,该指示剂在低氧区域会变为无色,从而标记出氧化-缺氧界面(OAI),并达到最佳效果
氧浓度。
在OAI处接种细菌,密封试管,并进行培养。
细菌增殖形成菌带,随着氧气的消耗而向上迁移。
为评估趋磁行为,制备一滴悬滴培养的细菌,并将磁铁置于其附近。
在显微镜下,观察细菌朝向磁铁的定向游动,以及当磁铁翻转时运动方向的逆转。
将乙醇涂于氧气瓶和新鲜培养基瓶的瓶塞上,并用本生灯火焰灼烧瓶口,以对MSR-1、AMB-1和MS-1菌株进行液体培养基接种。
使用无菌注射器和针头,从氧气瓶中抽取一毫升氧气,并将其转移至新鲜培养基瓶中。若使用在玻璃瓶中培养的另一培养物作为接种物,则需对两个瓶子进行火焰灭菌,随后将一毫升的旧培养物接种到新鲜培养基中。
在 32 摄氏度下培养该菌液,并在 4 至 7 天后接种至新鲜培养基中。为在氧气浓度梯度半固体培养基中接种 MSR-1,需确认装有新鲜培养基的试管中存在清晰可辨的氧扩散界面(OAI),该界面表现为培养基液面下约 1 至 3 厘米处由粉红色至无色的交界区域。若接种物来源于另一氧气浓度梯度半固体培养物,可将无菌移液枪头置于细菌形成的条带处,吸取 50 µL 培养液以收集细菌。
将这些细菌缓慢接种到新鲜培养基的OAI界面,避免扰动界面。密封试管,并在25摄氏度至30摄氏度之间培养细菌。为确认细菌具有磁性且呈模式化排列,取一滴培养物置于显微镜盖玻片上观察。
将盖玻片翻转,安装在置于载玻片上的O形圈上。确保液滴不接触底部的载玻片。将悬滴置于显微镜下,聚焦于液滴的边缘。
将磁铁的南极靠近该边缘,观察细菌向边缘游动。翻转磁铁,使细菌向相反方向游动。