使用聚焦光照进行丝状蓝细菌趋光性实验

在暗室中，从一个培养皿开始，其中含有丝状蓝细菌培养物，培养皿放置在一个带有LED灯支架的小窗口上方。

LED 从下方照亮培养皿，形成一个微小的光照区域。

孵育期间，丝状蓝细菌向光照中心迁移，表现出趋光性。

随着时间推移，蓝细菌会迁移并聚集在光照中心，形成肉眼可见的致密菌区。

孵育后，在培养皿下方放置一张白纸以增强对比度。

拍摄照明区域的图像，并使用软件进行分析。

在培养皿上画一条穿过细菌区域中心的线，以生成像素强度分布图。

比较细菌区域外部与内部的平均像素强度。

接下来，在中心区域的最大强度处画一条线，以确定细菌区的直径，该直径代表蓝细菌的趋光性。

准备 LED 安装座，将直径 5 毫米的 LED 安装在其中，以便从下方至上方照射 20 毫米 × 20 毫米的区域。测量并调节 LED 的光强。确保整个装置置于暗室或密闭的暗盒中。

将含有P. lacuna的八毫升培养基放入一个六厘米的培养皿中，盖上皿盖，然后将其置于LED支架上，使LED位于培养皿的中心。通常两天后，使用智能手机摄像头直接对准光照处理位置拍摄培养皿的图像。使用支架并以白纸作为背景，以确保每次拍摄时距离和光照条件一致。

打开 ImageJ 软件，点击文件，选择打开，然后选择文件。接着按回车键。选择直线工具，按住鼠标左键，从培养皿的一端画一条线到另一端。

确保线条穿过丝状体圆圈的中心。点击“分析”并选择“测量”，以查看培养皿的长度。然后，在 ImageJ 菜单中点击“分析”并选择“绘制轮廓图”。

估算圆外像素强度的平均值，以及圆内像素强度的另一个平均值。将鼠标指针移至这两个值之间的 Y 位置，以估算圆两侧对应的 X 值。记录这两个数值并计算其差值。

然后选择直线工具，在像素强度的半最大值处画一条线。最后，点击分析，然后点击测量，以获得内层细胞圆的长度。