Pseudomonas aeruginosa 在抗生素胁迫下的群集行为

将琼脂平板放置在打印好的模板上，以对准中心及六个等间距的卫星点。

在培养皿中央观察健康的 Pseudomonas aeruginosa 菌落。

将含有抗生素的相同培养物混合液置于卫星点上。

用黑色盖子盖住培养板，以减少光线反射。

将其放置在培养箱内的扫描仪上，保持恒定的温度和湿度，以维持细菌生长。

位于中心的健康细菌在琼脂表面呈辐射状生长并以类似触须的群集模式向外扩散。

与抗生素混合的细菌会受到压力，并释放出在琼脂中扩散的化学信号。

当蜂群到达这些区域时，会感知到应激信号。

这会触发细菌的避让反应，使细菌的生长方向偏离暴露于抗生素的区域。

延时成像显示了在抗生素胁迫下细菌的生长及群集扩张的变化。

进行泳动琼脂平板接种时，取一支吸有5 µL过夜培养的P. aeruginosa菌液的P20移液器枪头，将其以10至45度的角度置于泳动平板中心上方2.5厘米处，将枪头推至第一档，仅使液滴接触琼脂表面。使用模板确保各泳动琼脂平板上的接种位置一致。

进行抗生素处理接种时，取30微升过夜培养的P. aeruginosa，与适当浓度和体积的待测抗生素混合，立即将6微升经抗生素处理的菌液接种到培养皿中心周围半径为2.8厘米的同心圆上等距分布的六个卫星位置。使用模板确保不同群游琼脂平板上的接种位置一致。

所有培养物接种完成后，将透明的培养皿盖替换为定制的黑色盖子。将群集生长琼脂平板小心地放置在已设定为37摄氏度且配备10升水浴以维持75%湿度的培养箱内的扫描仪上。