使用光图案水凝胶降解进行靶向细菌菌落分离

0 views • 3:07 min • September 26th, 2025

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取一个带有可光降解水凝胶层的盖玻片,其中包含捕获的细菌菌落,经过基因改造以发出荧光。

将盖玻片放入支架中。

添加培养基以防止样品脱水。

在明场显微镜下,聚焦于感兴趣的单个菌落。

使用适当的软件,设计一种用于在菌落外围提取细胞的光模式,以破坏水凝胶的结构键并最大限度地减少紫外线照射到细胞。

调整紫外线强度和曝光持续时间。

启动紫外线照射以破坏暴露区域水凝胶中的结构键,从而促进靶菌落的释放。

使用荧光滤光片,识别菌落。

将管尖放在该部位,另一端连接到注射器。

切换到明场模式,并使用注射器吸出释放的菌落。

将菌落转移到管中进行进一步分析。

将样品放入 PDMS 支架中,并在样品顶部添加定义的培养基,以防止样品脱水,并为释放的细胞提供载体溶液。将校准镜放置到位后,调整显微镜焦点以获得水凝胶或微孔阵列内菌落的清晰图像,并检查以识别感兴趣的菌落或孔。

在这里,设计光图案,同时相机视图显示样品内的菌落,以测试不同的细胞提取图案并保存定义的图案。然后选择会话控制部分,在标题为图案照明工具产品名称的选项卡下添加保存的序列。选择刺激图案的选项以查看和调整所需的曝光位置。

接下来,在 LED 控制选项卡下将光强度调整为 60%,将曝光时间调整为 40 秒,然后开始曝光过程。实时监测水凝胶降解和明场模式,以确保细胞释放。要收集释放的细胞,请将显微镜滤光片从明场更改为 TRITC,以通过肉眼可视化样品的暴露区域。

找到暴露区域后,将管子的末端放在照射点上,然后将显微镜滤光片更换回明场以实时监测细胞检索。使用连接到管道另一端的注射器小心地取出 200 微升含有释放细胞的溶液,并将溶液转移到 1.5 毫米离心管中进行 DNA 分析或电镀

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用于细胞培养应用光介导的形成和构图的水凝胶

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Last updated: 18 July 2026