建立小鼠阴道厌氧菌定植模型

取一只经激素处理的雌性小鼠，该激素可调节阴道环境，使其更易感染。

用一只手提起小鼠的尾巴，使其前肢抓住笼子，从而抬高后躯并暴露阴道开口。

用厌氧缓冲液冲洗阴道腔，以清除作为抵御病原体保护屏障的黏液、死亡的上皮细胞以及内源性阴道微生物。

立即向阴道接种厌氧细菌病原体悬液，同时固定小鼠以尽量减少液体流失。

对于共接种，使用与之前相同体积的另一种厌氧细菌病原体悬液进行接种。

将接种过的小鼠与未接种的小鼠单独饲养，以防止交叉污染。

接种后，细菌会黏附于阴道上皮，生长形成菌落，并发育出具有保护作用的生物膜层，该生物膜可作为抵御宿主免疫反应的屏障。

在厌氧环境中，用移液器将70微升无菌厌氧PBS加入已标记小鼠编号的1.5毫升微量离心管中，以准备阴道灌洗管。

将管子盖紧并从室中取出。进行阴道灌洗时，首先将一只小鼠放置在笼盖上方，使其前爪可以抓住笼盖。然后轻轻握住尾巴中段，将小鼠尾部提起，使其后躯略微抬高，暴露阴道开口。

从标记好的洗涤管中吸取50微升PBS后，将移液器吸头轻轻插入阴道腔内2至3毫米，通过吹打3到4次用PBS清洗阴道。然后，将洗涤液连同剩余的20微升未使用的PBS一起转移回原来的洗涤管中。完成阴道灌洗后，立即通过阴道给予每只小鼠20微升细菌悬液或载体对照物进行接种。

对于两种不同细菌菌株的共接种实验，应分别接种每种细菌悬液10微升，而不是预先混合菌株。为防止接种体积立即积聚在阴道口，继续将小鼠的后部抬起10至20秒。将接种后的小鼠转移至新笼子或与已接种的同伴小鼠放在一起，并对其他小鼠重复该操作。