由Sporosarcina pasteurii介导的微生物诱导碳酸钙沉淀

从富含营养的培养基中的Sporosarcina pasteurii液体培养物开始。

取含有尿素、氯化钙、氯化铵和碳酸氢钠的富集储备液。

向细菌培养管中加入一部分富集培养基。

涡旋混匀试管，使细菌细胞与营养物质均匀混合。

将富集培养物置于不振荡的培养箱中孵育。

Sporosarcina pasteurii 是一种革兰氏阳性土壤细菌，在尿素存在时可产生脲酶。

脲酶将尿素分解为铵离子和碳酸根离子。

氯化铵和碳酸氢钠有助于维持碱性pH，从而促进矿物沉淀。

碳酸根离子与氯化钙中的钙离子反应，生成不溶于水的碳酸钙。

这种沉淀物开始在细菌细胞周围形成，并结晶为方解石，一种稳定的晶体形态。

这些晶体以白色沉淀物的形式沉积在试管底部，表明发生了微生物诱导的碳酸钙沉淀（MICP）。

将9毫升制备好的液体培养物转移至数个已灭菌的10毫升离心管中。使用分析天平精确称取每升2克尿素、每升1克氯化铵、每升212毫克碳酸氢钠和每升280毫克氯化钙，配制100毫升外部富集储备液。

将除尿素外的所有成分加入盛有新鲜培养基的烧杯中，进行高压灭菌。灭菌后，将尿素与1毫升新鲜培养基混合，并通过装有0.2微米滤器的注射器过滤，然后加入富集培养基中。取1毫升含添加剂的富集培养基，加入已灭菌的离心管中，每管含有9毫升制备好的培养液。

涡旋混匀各管，并在30摄氏度的静置培养箱中孵育。定期监测所有样品，观察沉淀是否开始形成。