通过微阵列筛选高通量鉴定驱菌聚合物

0 次观看2:49 分钟 • September 26th, 2025

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将具有多个聚合物斑点的灭菌琼脂糖涂层微阵列载玻片放入多孔板中。琼脂糖最大限度地减少了非特异性细菌结合。

将混合细菌培养物添加到载玻片中,并在轻轻搅拌的情况下孵育。

细菌分泌不同的粘附蛋白,与有利的聚合物斑点结合,随着时间的推移,细菌附着和定植会更强。

相反,驱虫聚合物可以抵抗蛋白质吸附并减少细菌附着。

用磷酸盐缓冲盐水或PBS冲洗载玻片,以去除松散结合的细菌。

加入DAPI对表面附着细菌的DNA进行染色。

用 PBS 清洗载玻片,干燥,并用粘性盖玻片密封。

用乙醇对载玻片外表面进行消毒。

捕获明场图像以定位聚合物斑点。然后,切换到荧光模式以检测聚合物斑点上的荧光。

表现出降低荧光的聚合物斑点表明细菌附着最少,并被确定为驱菌聚合物。

培养和制备微阵列的接种物后,根据文本方案,将紫外线灭菌的聚合物微阵列放入矩形四孔板中,并加入六毫升混合细菌培养物。将板在37摄氏度下轻轻搅拌孵育五天。孵育后,使用 PBS 轻轻冲洗微阵列两次。

然后在PBS中加入每毫升DAPI一微克,孵育30分钟。接下来,将微阵列转移到新鲜的四孔板上,用PBS覆盖微阵列,然后轻轻旋转。然后更换PBS一次并重复洗涤。

冲洗后,在气流下干燥微阵列,然后贴上密封膜并将玻璃盖玻片贴在微阵列载玻片上。胶水干燥后,用70%乙醇对外表面进行消毒。使用配备 20 倍主观的荧光显微镜,捕获明场和 DAPI 通道中每个聚合物点的单个图像。

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最后更新:1 八月 2026