可视化细菌表面运动性的群集迁移实验

从含有表达绿色荧光蛋白的运动性细菌的试管开始。

使用针头将细菌点样到软营养琼脂平板上，以研究细菌的表面运动能力。

接下来，将平板倒置，以防止琼脂表面产生冷凝水。

孵育培养板，使细菌生长。

随着培养的进行，细菌利用其鞭毛从接种点向外迁移。

孵育完成后，打开盖子，将倒置的平板放入成像系统中，使琼脂面朝向光学检测器，以确保成像准确。

将装满水的盖子放在培养板上方。密封以维持湿润的环境。

关闭成像系统并启动延时图像采集。

随着时间的推移，细菌迁移会形成称为“卷须”的绿色指状突起。这些细菌结构从中心接种点向外延伸，证实了细菌具有表面运动能力。

用无菌牙签或接种针蘸取过夜培养物一至五微升，在干燥的群游琼脂平板表面点种，具体方法取决于细菌菌株。将群游实验平板转移至培养箱中，培养温度设置为30摄氏度、37摄氏度或42摄氏度。将平板倒置，使多余的水分凝结在平板盖上而非琼脂表面，在进行延时成像前，于菌株特异性温度下平衡两小时或四小时。

接下来，将培养皿转移至活体成像系统中，使琼脂表面的细菌朝下，正对系统的倒置相机。用少量水填充所有培养皿的皿盖。然后将每个皿盖的加水面向上，放置在倒置的琼脂培养皿顶部。

在成像装置内部，密封成像腔室以维持恒定的湿度水平，调整成像装置的成像参数，并开始对细菌群集运动进行延时成像。实时成像结束后，可使用标准图像分析软件（如 Image J）分析细菌的群集动力学行为。