用于可视化细菌表面运动的蜂群测定

从装有表达绿色荧光蛋白的运动细菌的试管开始。

使用针头将细菌定位到柔软的营养琼脂平板上，以研究细菌表面运动。

接下来，倒置板以防止琼脂表面凝结水。

孵育板以允许细菌生长。

随着孵化的进行，细菌利用鞭毛开始从接种点向外迁移。

孵育完成后，打开盖子，将倒置板放入成像系统中，琼脂侧朝向光学检测器，以确保成像准确。

将装满水的盖子放在盘子上方。密封以保持潮湿的环境。

关闭成像系统并启动延时图像采集。

随着时间的推移，细菌迁移会产生称为卷须的绿手指状突起。这些细菌结构从中央接种点向外延伸，证实了细菌表面运动。

根据细菌菌株，用无菌牙签或金属丝接种针戳琼脂表面，在干燥的群琼脂平板上接种一到五微升过夜培养物，将群测定板转移到温度设置为30摄氏度，37摄氏度或42摄氏度的培养箱中。倒置板，使多余的水分凝结在板盖上而不是琼脂上，在延时成像之前在菌株特定温度下平衡细菌两到四个小时。

接下来，将板转移到体内成像单元中，使琼脂表面的细菌朝下朝向该单元的倒置相机。用少量水填充所有培养皿盖。然后将每个盖子，水边朝上放在倒置的琼脂板的顶部。

在成像单元内部，密封成像外壳以保持恒定的湿度水平，调整成像单元的成像设置并开始对蜂群活动进行延时成像。实时成像后，可以使用图像 J 等标准图像分析来分析细菌的蜂群动力学。