建立共生细菌与宿主细菌的二元共培养体系

从含有宿主特异性培养基的无菌试管开始。加入过夜培养的宿主细菌菌液。

然后，加入含有Saccharibacteria（一种寄生性超小细菌）的滤液，以建立二元培养体系。

在适合宿主细菌生长的微需氧条件下孵育二元培养物。

培养基中的营养物质促进宿主细菌的生长和增殖，使培养物变得浑浊。

由于其专性寄生的特性，Saccharibacteria 会附着在宿主细菌细胞的表面。

这些细菌随后与宿主形成紧密的膜接触，并摄取其生存和增殖所必需的营养物质。

随着感染的进展，细菌宿主的生长速度减慢，导致浊度降低。

为支持持续生长，需定期将双元培养物转移至新鲜培养基中。

这可维持宿主的存活能力，并促进二元培养体系的长期稳定性。

将适量的培养基各取两毫升分装到培养管中，以准备培养管。

然后，向每支试管中加入200微升宿主生物的过夜培养物以及100至200微升重悬的过滤样品。在适合宿主生物生长的条件下培养混合样品。每隔两到三天，将200微升二元培养物转移至新试管中含2毫升新鲜培养基的试管内，进行细胞传代。

如果传代培养物在加入200微升未感染的宿主培养物后无生长迹象，则在传代细胞时，将接种后的试管放回培养箱。