0 次观看 • 1:28 分钟 • October 30th, 2025
在多孔板中取一培养物,该培养物为携带质粒的Corynebacterium glutamicum,该质粒在其核糖核酸抗终止子(RAT)序列下游带有荧光报告基因。
转录过程中,RAT-RNA 形成茎环结构,阻断 RNA 聚合酶,从而停止报告基因的表达。
该质粒还组成型表达 LicV,这是一种融合蛋白,由 RAT-RNA 结合蛋白 LicT 和对蓝光敏感的 VVD 结构域组成。
在黑暗条件下,LicV 保持单体状态,不能结合 RAT-RNA 发夹结构,从而阻断报告基因的转录。
用蓝光照射培养物,诱导VVD结构域发生构象变化,从而触发LicV二聚化。
二聚化的LicV结合到RAT-RNA上,使茎环结构解折叠,从而允许RNA聚合酶转录报告基因,产生荧光报告蛋白。
在荧光显微镜下观察培养物。
蓝光照射后出现强烈的报告荧光,而在黑暗条件下荧光极弱,表明光遗传学控制成功。