单细胞细菌相互作用的可视化

从一个接种了荧光标记的运动型细菌与未标记的非运动型细菌共培养物的玻璃盖玻片培养皿开始。

取出含有营养物质的琼脂糖垫片，并小心移除周围的硅胶模具。

倾斜培养皿，使用弯头刮勺从垫片边缘下方滑入，然后将其放置在培养皿盖上。

将垫片底面朝下转移至含有细菌细胞的培养皿中，以确保与细菌层充分接触。

轻轻按压垫片以排除任何气泡。

将预先润湿的擦拭巾放置在培养皿边缘，以维持湿度。

在倒置显微镜下，追踪细菌在一段时间内的行为。

随着细菌的生长，非运动型细菌会释放化学引诱物。运动型细菌感知到这些信号后，便会向非运动型细菌菌落移动。

随着时间推移，运动性细菌逐渐聚集并侵入非运动性细菌菌落，证实了细菌之间的相互作用。

待垫片干燥后，用移液器将一微升共培养液均匀地滴加到预热的无菌35毫米玻璃盖玻片培养皿底部。

使用无菌镊子从琼脂糖模具中取出硅胶切片，将其侧向倾斜，并将略微弯曲的刮刀插入琼脂糖垫边缘下方，使其滑落到无菌培养皿盖上。

用90度角的刮铲将带有细菌细胞的垫片底部朝下转移到培养皿中，将其放置在已接种的盖玻片上方。使用刮铲使垫片与盖玻片完全贴合，并轻轻按压排出任何气泡。

从湿润的擦拭巾上去除多余的水分，并将其放置在培养皿边缘，确保不接触样品垫。样品现在已准备好进行成像。