鼠伤寒沙门氏菌 培养物的制备

0 次观看 • 2:41 分钟 • October 30th, 2025

取一个含有鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)的培养皿,这是一种致病性细菌。

使用无菌细菌环,挑取一个单一且分离良好的菌落,以确保培养物的纯度,并将其接种于脑心浸出液肉汤中。

振荡培养以确保充分通气和营养物质均匀分布,促进细菌增殖。

将过夜培养物稀释至新鲜培养基中,以防止营养耗尽并维持指数生长期。

继续振荡孵育。

使用分光光度计测量光密度(OD)以监测细菌生长。

让培养物的OD值达到约1。这表示已进入对数生长期,此时细菌积极利用营养物质进行快速增殖。

将培养物转移至离心管中,离心以分离细菌。

弃去上清液,并将细菌重悬于缓冲液中以维持细菌完整性。

离心并去除残留培养基。

用新鲜缓冲液重悬细菌,以获得均匀且无污染的悬浮液。

开始培养Salmonella typhimurium时,使用细菌接种环将单个细菌菌落接种至5毫升脑心浸液肉汤中。然后将该悬浮液在37摄氏度摇床培养箱中过夜培养。次日,取1毫升该细菌悬浮液转移至锥形瓶中的19毫升BHI肉汤中。

再次放入37摄氏度摇床中孵育。当OD600达到1时,从摇床中取出锥形瓶,将菌液转移至50毫升离心管中。然后在4摄氏度条件下以5,400 g离心15分钟。

去除上清液后,将细菌沉淀重悬于10毫升无菌PBS中。再次离心一次后,将沉淀重悬于4.9毫升PBS中。

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