在小鼠模型中进行气管内细菌递送

取一只仰卧位且颈部已剃毛的麻醉小鼠开始操作。

对剃毛区域进行消毒。

在颈部做一切口，然后分离肌肉以暴露气管，即通向下呼吸道（包括肺）的气道。

取一支预先装有肺部致病菌的注射器，注射器内菌液位于两段小体积空气之间。

将针头插入气管，并注入第一份空气体积以清除气管。

接下来，输送细菌接种物，随后输送第二份空气体积，以促进细菌更深入地分散至下呼吸道。

将小鼠短暂地垂直握住，以促进细菌在下呼吸道内的均匀分布。

使用组织粘合剂封闭切口，并让小鼠恢复。

该方法可将病原体直接递送至下呼吸道，从而绕过上呼吸道屏障。

首先对小鼠进行麻醉，并通过脚趾夹捏法确认其麻醉程度是否充分。

然后，将小鼠仰卧位固定，并剃除颈部腹侧区域的毛发。对暴露的皮肤进行消毒。现在，用鼠齿镊提起颈部腹侧上部的皮肤，使用手术刀在胸腺上方做一长度为0.5至1厘米的切口。

然后，小心分离肌肉以暴露气管。向气管内缓慢注入 50 微升空气，随后注入 50 微升制备好的 NTHi，最后再注入 50 微升空气。

注射后，将动物保持垂直姿势约一分钟。然后，用组织粘合剂闭合切口，并将小鼠保持侧卧位，保温约10分钟。