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微生物学
0 次观看 • 2:15 分钟 • September 26th, 2025
质体小球是蓝细菌细胞质中富含脂质的颗粒。
它们将中性脂质储存在疏水性核心内,外周包裹着含有嵌入的结构蛋白和酶蛋白的两亲性脂质单层膜。在应激条件下,储存的脂质被动员以支持细胞功能。
为了分离它们,首先从蓝细菌中获得一个粗制的质体小球 fraction。该 fraction 富集了质体小球,并含有一些残留的污染物蛋白。
将此组分与密度更高的蔗糖溶液混合,然后转移至超速离心管中。
覆盖一层较轻的蔗糖溶液,以形成不连续的密度梯度。
在低温条件下高速离心,以防止质体小球的热降解。
梯度按密度分离组分:富含脂质、密度较低的质体小球上浮至顶部,而密度较高、富含蛋白质的杂质则下沉。
收集纯化的质体小球,并将其在冷冻介质中速冻,以保存其结构。
长期使用请于超低温条件下储存。
为了从蓝细菌中收获纯净的质体小球,使用500微升粗制质体小球、750微升R 0.7培养基和750微升R 0.2培养基制备蔗糖梯度(如前所述)。离心后,将纯化的质体小球收集至1.5毫升离心管中,并对纯化的质体小球进行分装。完成后,将分装的纯质体小球在液氮中速冻,然后直接于-80摄氏度保存,或冻干成干燥粉末。