利用微流控微液滴培养系统实时监测细菌生长

从一个微液滴培养室开始，该培养室包含带有泵控连接器的微流控芯片，用于控制液体流动和废物清除。

将装有覆盖有油层的细菌悬液的试剂瓶放入腔室内。

将瓶的顶部管路连接至泵端口，侧管连接至芯片连接器。关闭腔室。

设置生长曲线参数，然后启动液滴生成。

当油相与细菌悬浮液在T形 junction 处汇聚时，油相的剪切力将含细菌的水相破碎成均匀的、包裹细菌的微滴。

液滴生成后，取下瓶子，将芯片连接器连接至泵端口，并关闭腔室。

当每个液滴通过检测光路时，光纤探头会测量其光密度，以反映细菌浓度。

来回移动微滴以促进细菌生长。

随着时间推移，光纤测量液滴的光密度，生成一条生长曲线。

使用一个10毫升的无菌注射器，将3至5毫升的MMC油从注射器针头沿侧管注入试剂瓶中。然后缓慢倾斜并旋转试剂瓶，使油充分浸润瓶内壁。

将5毫升初始细菌溶液注入瓶中后，再注入5至7毫升MMC油以填满试剂瓶。拔出试剂瓶上的独立快接接头A，并将快接接头A插入瓶上的快接接头B，完成样品注入操作。操作完成后，打开操作室的门，将试剂瓶放入金属浴中。

拔出芯片的 C2 连接器和试剂瓶的快接接头 A。将试剂瓶的侧管连接器连接到 C2 连接器，顶部管路连接器连接到 O2 连接器。然后，关闭操作舱门。

选择生长曲线测量功能时，点击生长曲线。在参数设置界面中，将次数设置为15。然后，打开OD检测开关，并将波长设置为600纳米。点击开始选项卡以启动液滴生成。

该过程需要15分钟才能完成。

当主界面弹出提示消息的窗口时，打开操作室的门，取出试剂瓶，并连接 C2 和 O2 接头。关闭门后，单击弹出窗口中的确定按钮，系统将自动培养液滴并检测 OD 值。

当生长曲线进入稳定期时，点击数据导出按钮以导出OD数据。选择数据保存路径，并以点分CVS格式导出培养期间记录的OD值。绘制生长曲线时，可使用Excel或Origin 9.0等绘图软件。