磁铁矿嵌入的细菌纤维素膜的制备

取一片细菌纤维素膜，即一种由纤维素纤维构成的凝胶状片层。

将其放入含有铁盐溶液的三颈烧瓶中。

连接冷凝器，并通水以防止加热过程中溶液体积损失。然后，通过进气口向烧瓶中通入氮气，以防止铁被氧化。

将烧瓶置于硅油浴中加热并搅拌，以促进铁盐扩散进入菌膜。

缓慢加入碱以提高pH值，使铁盐在皮膜基质中形成磁铁矿纳米颗粒。

降低温度并继续搅拌，以确保纳米颗粒均匀分布。

冷却混合物，然后转移至洁净的容器中。

使用磁铁固定菌膜，倒出未结合的物质。

用脱氧水反复洗涤菌膜，直至 pH 值变为中性且上清液呈现澄清状态。

转移菌膜，通过紫外照射灭菌，然后将其浸入无菌脱氧水中以进行后续研究。

将1000毫升高纯水用氮气鼓泡，以去除水中溶解的氧气，并用氮气替代。

使用三颈圆底烧瓶配制氯化铁（III）六水合物与氯化铁（II）四水合物的溶液，二者摩尔比为2:1，并用脱氧高纯水稀释。将烧瓶的两个颈口用于持续通入和排出氮气：将氮气源连接至插入隔垫塞并固定在烧瓶颈口的针头。将一片BNC薄膜与反应物一同放入烧瓶中。

确保样品完全浸没在液体中。然后，将所有玻璃接口涂抹上真空润滑脂。将容器剩余的接口连接至冷凝管，冷凝管顶端接一个装有无水硫酸钙的干燥管。

将水通入冷凝管中。接着，使用搅拌加热板将溶液在硅油浴中加热至80摄氏度，并维持该温度。用一个小的磁力搅拌子以350转/分钟的速度搅拌反应物5分钟。

确保BNC已用亚铁溶液充分浸渍，并且反应物完全溶解。将搅拌速度提高至700 RPM。在五分钟的时间间隔内，使用已插入隔膜塞中的移液针，将5毫升氢氧化铵加入10毫升亚铁溶液中。加入氢氧化铵后，溶液颜色由黄橙色变为黑色。

将溶液在80摄氏度下继续搅拌五分钟。避免高速搅拌，以保持样品的完整性。使用搅拌加热板的温度控制底座将溶液温度降至30摄氏度，并继续搅拌五分钟。

然后，关闭电热板。此时，氧化铁纳米颗粒已嵌入细菌纤维素（BNC）网络中。接下来，将混合物冷却至室温，并转移至容器瓶中，利用强永磁体分离磁性纳米颗粒（MNPs）和BNC。

为此，将磁铁靠近容器以固定磁性纳米颗粒（MNPs）和细菌纳米纤维素（BNC），同时倾倒上清液。将 MNPs 和 BNC 重悬于 100 毫升水中。轻轻摇动溶液，以去除未牢固结合到 BNC 中的所有 MNPs。

然后，将磁铁置于一旁以固定磁性纳米颗粒（MNPs）和细菌纳米纤维素（BNC），再次倾去上清液。用去离子水反复洗涤 MNPs 和 BNC 多次，直至使用比色试纸测得上清液呈中性 pH。使用镊子将磁性功能化的 BNC（即 MBNC）与 MNPs 分离，并用去离子水反复冲洗 MBNC 多次，直至冲洗液清澈。

将MBNC置于紫外线下照射过夜以进行灭菌。将MBNC储存于20毫升已脱氧的高纯度水中，该水需经120摄氏度高压灭菌20分钟。在无菌条件下，将样品浸入1%的聚乙二醇（PEG）中，并在室温下搅拌2小时。PEG包覆可提高沉积于BNC中的氧化铁纳米颗粒的生物相容性和稳定性，因为其分布于MBNC的三维网络结构中。