微流控芯片中细菌细胞的制备

取一块微流控板，该板包含由微流控通道连接的输入孔和输出孔对，这些通道包括蛇形通道和实验通道。

为启动通道，需将培养基加入输出孔中。

将培养皿放入培养皿托架中，并用灭菌盖密封。

启动从输出孔到输入孔的培养基流动，以冲洗出通道内任何滞留的气泡。

取出培养板。弃去出液孔中的残留培养基，加入细菌培养物。

向进样孔中加入新鲜培养基，以防止空气倒流。将培养板放回载物台。

在显微镜下观察的同时，恢复流体流动，将细胞引入实验通道。

调节流速，避免细胞进入蛇形通道，以防堵塞。

停止流动并进行孵育，以促进细菌附着。

取出培养板并弃去残留的细菌培养物和培养基。

微流控板中的细菌现已准备好进行后续实验。

进行引液操作时，首先从包装中取出48孔微流控板，注意不要触碰板底部的玻璃表面，并用镜头纸清洁板底部的玻片。为引液微流控通道，用移液器将200微升37摄氏度的最低培养基加入输出孔中，注意避免产生气泡。然后将微流控板放置到板载平台上。

用乙醇擦拭接口，并在乙醇干燥后将其密封到板架上。在控制模块的手动模式下，将流体设置为37摄氏度的LB肉汤，最大剪切力设置为5 dyne/cm²。点击输出孔以启动从输出孔到输入孔的流动，从而对通道进行引液。

五分钟后，暂停流动以准备接种，并小心地将培养板从载物台上取下。随后，吸出输出孔道中的残余培养基，但不要吸出内圈通向微流控通道的培养基。为接种实验通道，先向输入孔道加入300微升的最低培养基，然后向输出孔道加入300微升的细菌培养物。

将培养板放回成像台，放置前务必用乙醇擦拭接口，然后使用实时相机画面聚焦到单个通道。在视觉监控实时画面的同时，以每平方厘米1至2达因的流速恢复流动约2至4秒，使细胞进入实验通道但不进入蛇形通道，并将培养板留在温度控制台上孵育一小时，以使细胞贴附。贴附阶段结束后，小心地将培养板从台上取下，并从输出孔中吸除细菌，注意不要扰动通道内的细胞。

然后，使用新的移液器吸头从输入孔中移除培养基。