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微生物学
0 次观看 • 1:59 分钟 • November 28th, 2025
从霍乱弧菌(Vibrio cholerae)菌株的过夜培养物开始,该致病菌在营养丰富的培养基中培养。
离心培养物以沉淀细胞。弃去含有胞外化合物的上清液,并将沉淀重悬于生理盐水中。
接着,将无菌金属接种环浸入培养物中,然后垂直刺入动力琼脂,将细菌接种到培养基表面以下,注意不要横向扩散。
每次接种不同菌株之间,需将接种环在火焰上灭菌,以防止交叉污染。
孵育平板,使细菌在运动性琼脂中迁移。
琼脂中含有氯化三苯基四氮唑(TTC),这是一种氧化还原指示剂,可被代谢活跃的细胞还原后变为红色。
运动性菌株可在较大范围内还原TTC,形成较大的红色区域,而非运动性菌株的染色则局限于穿刺线内。
红色区域的大小和扩散范围表明了每种菌株的运动能力。
洗涤从过夜培养物中获得的细胞沉淀。用接种针蘸取洗涤后的液体培养物,垂直穿刺接种至运动性琼脂平板中。
接种穿刺时应确保接种针不发生弯曲。每次接种之间,需使用本生灯对金属接种针进行灼烧灭菌。将平板倒置(皿盖朝上),于37°C条件下培养14至24小时。
14 小时后,密切观察运动性平板,以防止培养物过度生长。