Vibrio cholerae 生物型分化的 Voges-Proskauer 试验

0 次观看 • 2:27 分钟 • November 28th, 2025

分别培养三种不同生物型的霍乱弧菌(Vibrio cholerae),一种致病性细菌,包括古典生物型、野生型埃尔托生物型和埃尔托变异型,每种分别代表遗传上不同的亚群。

将每种培养物接种到装有专用培养基的试管中,以进行伏-普二氏(Voges-Proskauer,VP)试验。

振荡培养以促进细菌增殖。

野生型埃尔托霍乱弧菌能在培养基中发酵葡萄糖并产生乙酰甲基甲醇,而古典生物型和变异生物型则不能。

接下来,向每支试管中加入 α-萘酚和氢氧化钾,充分混匀后孵育。

在氢氧化钾存在下,大气中的氧气可催化乙偶姻氧化为双乙酰。

二乙酰与培养基中含胍基的化合物反应,生成粉红色至红色产物,其颜色强度可被α-萘酚增强。

颜色的生成表明伏-普二氏(VP)反应呈阳性,这是野生型埃尔托(El Tor)生物型的特征,而古典生物型和变异生物型则不显色。

用移液器将10微升预先准备的过夜培养物接种到装有4毫升甲基红-伏普(Methyl Red Voges-Proskauer,MR-VP)肉汤的无菌培养管中,使总体积为4毫升,然后在37摄氏度、225 rpm条件下于摇床培养箱中振荡培养12至16小时。接着,分别向无菌培养管中MR-VP过夜培养物的1毫升等分试样中加入150微升5%(质量/体积)的α-萘酚溶液和50微升40%(质量/体积)的氢氧化钾溶液。

然后,短暂涡旋振荡试管。将试管置于室温下静置,最长不超过四小时,直至颜色发生变化。

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