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微生物学
0 次观看 • 2:10 分钟 • November 28th, 2025
接种含有两者的培养物 沙门氏菌 和非沙门氏菌 将菌种接种至亚硒酸盐胱氨酸培养基中,并进行培养。
亚硒酸盐通过破坏对硒敏感的细菌的代谢过程来抑制其生长。
然而,一些耐硒细菌(包括Salmonella)能够代谢亚硒酸盐并生长。
将培养物划线接种至木糖赖氨酸脱氧胆酸盐(XLD)琼脂平板上,并进行培养。
沙门氏菌在XLD琼脂中将硫代硫酸钠还原为硫化氢,后者与培养基中的三价铁离子反应生成黑色的硫化铁,从而形成具有黑色中心的菌落。
相比之下,非沙门氏菌 不产生硫化氢的菌种形成的菌落无黑色中心,可通过视觉与之区分 沙门氏菌.
选择一个具有黑色中心的菌落,并将其划线接种到 沙门氏菌 显色培养基以提高特异性。
显色琼脂含有与发色团相连的、针对Salmonella的特异性酶底物。
Salmonella 酶可切割这些底物,释放出发色团并形成有色菌落。
选择这些菌落进行进一步分析。
取100微升预增菌培养物加入5毫升亚硒酸盐胱氨酸培养基中。然后在36摄氏度下培养18至24小时。接着,挑取一环培养物并涂布于平板上。
然后,在36摄氏度下将平板孵育18至24小时。孵育结束后,挑选可疑菌落并将其转接到一个新的平板上。在36摄氏度下将该平板再次孵育18至24小时。