在微流控系统中以单细胞分辨率追踪细菌生长

从安装在倒置荧光显微镜舞台上的微流控装置开始。

该器件由具有水平供电通道的聚合物芯片组成。每个通道内衬有一系列狭窄沟槽，一端密封，设计用来将细菌细胞限制成线性链。

沟槽内存在非运动的细菌细胞，表达荧光蛋白，使其能够被可视化。

每个供给通道都连接到注射器泵，以受控流量输送富含养分的培养基。

启动流动，使介质扩散到沟槽中，支持细菌生长。

受限的细菌细胞在沟槽内分裂，形成后代链。

沟槽设计确保开口端的新电池被冲刷干净，从而实现对最古老电池的长期追踪。

拍摄沟槽随时间变化的图像，以追踪单个细菌细胞的生长和分裂。

通过将PDMS两侧的盖玻璃贴在舞台插入件底部，小心地将已加载设备安装到舞台插入件上。将级插入装置组件倒置，使PDMS朝上，并将其放置在软质表面，如无尘擦拭器。

将一相注射器泵的流量调整为每分钟35微升。然后一次只穿一条通道，插入进水针和通往废水烧杯的出口针。目视检查设备是否有泄漏后，检查出口管道是否有多余细胞，这些细胞在中质半月板中呈现出浑浊条纹，这些细胞会缓慢向废液烧杯方向移动。

设备运行约15分钟后，将一相注射器泵设置为每分钟1.5微升，并暂停流量。将整个泵和设备带到倒置荧光显微镜，以每分钟1.5微升的速度重新启动一级培养液流动。小心地将带有该装置的舞台插入件安装到显微镜上，必要时用胶带布线以布线进出口管。

找到设备上适合成像的位置，并按需要开始成像。注意，这些细胞通常需要数小时读取稳态、指数相位增长，成像的开始可根据需要延迟，以便在平衡期后开始成像。