0 次观看 • 2:10 分钟 • November 28th, 2025
取一个微流控装置,该装置包含一根与微流控腔室相连的进样管,微流控腔室由可供细菌移动的多孔通道构成。
该腔室通过出口管连接至一个观察腔室,而观察腔室与注射泵相连。
用缓冲液充分填充腔室,以去除所有气泡。
将装置置于显微镜载物台上,并调整物镜使其位于观察室上方。
调整显微镜设置,以清晰观察单个细菌细胞。
将进样管放入荧光标记细菌的悬液中。
启动流体,使细菌进入微流控腔室,细菌将通过多孔通道进入观察腔室。
定期对观察室进行成像。
生成穿透曲线,该曲线表示随时间推移穿过孔隙介质的细菌比例。
将微流控装置从真空环境中取出,并放置在显微镜载物台上。使用注射泵将其充满运动缓冲液。
使用明场显微镜或相差显微镜,调节放大倍数以观察单个细菌细胞,并聚焦于观察通道的中心。切换光路设置至荧光显微镜模式。通过调整焦距偏移和相机曝光时间来清晰分辨单个细菌细胞,本例中曝光时间为100毫秒。
接下来,将进样管插入含有细菌悬液的2毫升离心管中。反转泵的运行方向,以每分钟1 µL的流速开始吸取悬液。
扫描整个观察通道的横截面,每隔一分钟记录一张图像。
本文介绍了一种通过微流控装置可视化细菌运动的方法。该装置可实现对单个细菌细胞在多孔通道中穿行过程的观察。
在微流控多孔基质中量化细菌运动性,能够精确评估与感染模型、微生物组研究及抗感染筛选相关的微生物迁移。突破曲线输出可提供一种定量且可重复的读数,用于在受控条件下比较细菌运动。该能力有助于生物制药研发管线中的早期发现与机制性风险排除。
这种微流控运动性检测方法适用于从早期发现到先导物识别的连续过程,为基本的微生物表征与临床前感染建模之间提供了桥梁。
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最后更新:29 八月 2026