利用微流控装置评估细菌运动性

0 次观看2:10 分钟 • November 28th, 2025

取一个微流控装置,该装置包含一根与微流控腔室相连的进样管,微流控腔室由可供细菌移动的多孔通道构成。

该腔室通过出口管连接至一个观察腔室,而观察腔室与注射泵相连。

用缓冲液充分填充腔室,以去除所有气泡。

将装置置于显微镜载物台上,并调整物镜使其位于观察室上方。

调整显微镜设置,以清晰观察单个细菌细胞。

将进样管放入荧光标记细菌的悬液中。

启动流体,使细菌进入微流控腔室,细菌将通过多孔通道进入观察腔室。

定期对观察室进行成像。

生成穿透曲线,该曲线表示随时间推移穿过孔隙介质的细菌比例。

将微流控装置从真空环境中取出,并放置在显微镜载物台上。使用注射泵将其充满运动缓冲液。

使用明场显微镜或相差显微镜,调节放大倍数以观察单个细菌细胞,并聚焦于观察通道的中心。切换光路设置至荧光显微镜模式。通过调整焦距偏移和相机曝光时间来清晰分辨单个细菌细胞,本例中曝光时间为100毫秒。

接下来,将进样管插入含有细菌悬液的2毫升离心管中。反转泵的运行方向,以每分钟1 µL的流速开始吸取悬液。

扫描整个观察通道的横截面,每隔一分钟记录一张图像。