使用甘油或二甲基亚砜对蓝藻菌株进行长期低温保存

首先将一环蓝藻菌株接种到培养基上。孵育以使细胞生长至所需密度。

通过离心洗涤细胞，并弃去含有残留代谢物和碎片的上清液。

用少量培养基重悬沉淀，制成浓缩的悬浮液。

将该悬浮液的等分试样与甘油混合，甘油是一种冷冻保护剂，可稳定膜结构并防止冷冻过程中冰晶的形成。

向另一份等分试样中加入二甲基亚砜，这是一种可穿透细胞并抑制冰晶成核的冷冻保护剂。

将样品储存在低温条件下，以停止代谢活动，使细胞在较长时间内保持活性。

复苏时，将少量冷冻的生物材料刮取到不含抗生素的琼脂平板上，进行划线培养，以减少应激并促进逐步恢复。

该方法可实现蓝藻菌株的长期低温冷冻保存与复苏，以供未来研究使用。

为长期保存菌株，需通过将一环细胞接种至30至50毫升BG11培养基中来建立新鲜培养物。培养三至四天，使培养物的OD₇₅₀达到0.4至0.7。

使用 BG11 缓冲液洗涤细胞一次后，将沉淀重悬于约两毫升的 BG11 缓冲液中。取 0.8 毫升浓缩细胞加入一支离心管中，然后加入 0.2 毫升 80% 经滤膜除菌的甘油。

向另一管中加入 0.93 毫升浓缩细胞和 0.07 毫升 DMSO。将两管样品均置于负 80 摄氏度保存。复苏菌株时，取出冻存管，用钝头牙签刮取少量细胞至不含抗生素的琼脂平板上，然后用无菌接种环按常规方法划线分离。