0 次观看 • 3:25 分钟 • February 2nd, 2026
取一个带盖小瓶，其中含有覆盖滤纸的营养琼脂。
将致病菌悬液涂布于滤纸上。
将一只饥饿处理的 Drosophila melanogaster 果蝇放入小瓶中，然后盖上盖子。孵育以使其进食，并确保摄入细菌。
摄入的细菌进入肠道并穿透覆盖肠腔的保护性膜。
细菌黏附于下方的上皮组织，释放促进上皮损伤和侵袭的毒素，并定植于内部组织。
将果蝇浸入酒精中以去除表面附着的细菌，然后用清水冲洗以去除酒精。
加入缓冲液并匀浆果蝇，以释放其内部的细菌内容物。
在微孔板中对匀浆液进行连续稀释。随后将稀释液接种至营养琼脂平板上，并进行培养以促进菌落形成。
计数菌落以确定果蝇经口腔感染后产生的可存活细菌细胞数量。
口服感染前 2 至 4 小时，将果蝇转移至不含食物的标准琼脂试管中。同时，为每只果蝇准备一个感染用试管。
首先，在一个7毫升样品管的管盖中加入500微升的标准糖琼脂，并使其凝固。接着，将一片滤纸贴在琼脂表面。然后，用移液器将100微升的细菌培养物直接滴加到滤纸片上。作为对照，使用5%的蔗糖水溶液。
饥饿处理结束后，将单只果蝇转移至已准备好的试管中。将果蝇孵育18至24小时后，对果蝇进行表面灭菌。将个体放入含有100 µL 70%乙醇的试管中。
20 到 30 秒后，吸除乙醇，并加入 100 µL 三蒸水。再过 20 到 30 秒后，吸除水。然后加入 100 µL PBS，并匀浆果蝇。
将匀浆液转移至96孔板的最上一排，并在下方每个孔中加入90微升1×PBS。然后，取10微升等分试样，进行连续稀释，以区分不同范围的CFU值。接着，将连续稀释液以5微升液滴的形式接种到LB营养琼脂平板上。
将液滴置于平板上，确保其位置分布清晰可辨。随后将平板过夜培养。次日，根据产生 10 至 60 个清晰可见菌落的稀释度，计算菌落形成单位（CFU）数量。